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日本血吸虫肝期童虫表膜结合多肽的筛选与初步鉴定

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
课题基金资助第8-11页
缩略词第11-12页
前言第12-14页
第一章 材料与方法第14-28页
 1 随机肽库与菌株第14页
 2 寄生虫和实验动物来源第14页
 3 主要仪器第14页
 4 主要试剂及器材第14-15页
 5 ER2738大肠杆菌准备第15-16页
   ·主要试剂配制第15-16页
   ·具体操作步骤第16页
 6 噬菌斑计数法第16-18页
   ·主要试剂配制第16页
   ·具体操作步骤第16-18页
 7 噬菌体的扩增与纯化第18-19页
   ·主要试剂配制第18页
   ·具体操作步骤第18-19页
 8 噬菌体随机12肽库对日本血吸虫肝期童虫的亲和筛选第19-21页
   ·主要试剂配制第19页
   ·肝期童虫的收集第19页
   ·技术路线第19-20页
   ·具体操作步骤第20-21页
 9 噬菌体DNA制备和DNA序列测定第21-22页
   ·主要试剂配制第21页
   ·具体操作步骤第21-22页
 10 噬菌体表面展示的短肽的生物信息学分析第22-23页
   ·跟据DNA测序结果推测其编码的12个氨基酸序列第22-23页
   ·氨基酸序列同源性分析第23页
 11 免疫组织化学检测目标噬菌体结合第23-24页
   ·主要试剂配制第23页
   ·具体操作步骤第23-24页
 12 Western blot检测目标噬菌体结合第24-27页
   ·主要试剂配制第24-26页
   ·具体操作步骤第26-27页
 13 体内回输试验验证目标噬菌体对体内虫体的靶向结合能力第27-28页
   ·噬菌体体内代谢实验第27页
   ·体内回输试验验证目标噬菌体对体内虫体的靶向结合能力第27-28页
第二章 结果第28-35页
 1 噬菌体十二肽库的库容鉴定第28页
 2 阳性噬菌体的富集分析第28-29页
 3 噬菌体单链DNA的序列测定及其氨基酸序列推导第29页
 4 氨基酸序列同源性分析第29-30页
 5 阳性噬菌体ZW-15与Sj肝期童虫表膜结合的免疫组化结果第30-31页
 6 Western blot检测阳性噬菌体ZW-15与Sj肝期童虫表膜的结合第31-32页
 7 阳性噬菌体ZW-15与体内Sj肝期童虫表膜结合的试验结果第32-35页
   ·噬菌体体内代谢实验结果第32-34页
   ·阳性噬菌体ZW-15与体内Sj肝期童虫表膜结合的回输试验结果第34-35页
第三章 讨论第35-40页
 1 血吸虫表膜的研究及标本选择第35页
 2 噬菌体展示技术筛选Sj肝期活童虫表膜特异结合肽的意义第35-36页
 3 实验方法及结果分析第36-37页
 4 肽库筛选条件的优化第37-38页
     ·洗涤剂的浓度及洗涤时间第37页
     ·温度第37-38页
     ·洗脱时间第38页
     ·筛选的轮次第38页
 5 肽库筛选中常遇到的问题及解决方案第38-39页
     ·野生型噬菌体的污染第38页
     ·扩增的噬菌体滴定较低第38-39页
     ·非特异性结合噬菌体的去除第39页
 6 进一步工作展望第39-40页
第四章 结论第40-41页
参考文献第41-46页
综述第46-55页
 1 利用噬菌体展示技术筛选血吸虫抗原模拟表位并评估其免疫效果第46-47页
 2 利用噬菌体展示cDNA文库筛选血吸虫的新抗原基因第47页
 3 将噬菌体直接用作血吸虫病疫苗载体第47-48页
 4 利用噬菌体展示技术筛选血吸虫病靶向治疗载体第48-49页
 参考文献第49-55页
致谢第55-56页
攻读学位期间主要的研究成果第56-57页
附录第57页

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