| 中文摘要 | 第1-21页 |
| Abstract | 第21-26页 |
| 符号说明 | 第26-30页 |
| 第一章 绪论 | 第30-54页 |
| ·炎症与炎症相关疾病 | 第30-34页 |
| ·炎症 | 第30-32页 |
| ·急性炎症与慢性炎症 | 第32-33页 |
| ·自身免疫性疾病与自身炎症性疾病 | 第33-34页 |
| ·类风湿性关节炎 | 第34页 |
| ·细胞因子与炎症 | 第34-37页 |
| ·自身免疫性疾病中的炎性因子 | 第35-36页 |
| ·自身免疫性疾病中的抗炎因子 | 第36-37页 |
| ·炎症的控制与抗炎药物 | 第37-42页 |
| ·炎症的控制 | 第37-38页 |
| ·抗炎药物 | 第38-39页 |
| ·生物工程类抗炎药物 | 第39-40页 |
| ·自身免疫性疾病治疗药物新策略 | 第40-42页 |
| ·生长因子Progranulin的生物功能 | 第42-45页 |
| ·PGRN的性质、结构及功能 | 第42-43页 |
| ·PGRN与组织修复 | 第43页 |
| ·PGRN与肿瘤 | 第43-44页 |
| ·PGRN与神经退行性疾病 | 第44页 |
| ·PGRN结合蛋白 | 第44-45页 |
| ·TNF/TNFR超家族 | 第45-47页 |
| ·RANKL/RANK与骨质疏松症 | 第47-48页 |
| ·骨质疏松症与破骨细胞 | 第47-48页 |
| ·针对RANKL-RANK的抗骨质疏松药物 | 第48页 |
| ·免疫系统与骨质疏松症 | 第48-54页 |
| 第二章 PGRN结合TNFRs及PGRN基因缺失对类风湿性关节炎动物模型的影响 | 第54-86页 |
| ·引言 | 第54-55页 |
| ·实验材料和方法 | 第55-62页 |
| ·酵母双杂交文库筛选 | 第55页 |
| ·PGRN结合TNFR2的酵母双杂交体系验证 | 第55页 |
| ·免疫共沉淀 | 第55-56页 |
| ·重组人PGRN的纯化 | 第56-57页 |
| ·固相结合分析 | 第57页 |
| ·PGRN与TNFRs的动力学与亲和分析 | 第57-58页 |
| ·流式细胞术分析 | 第58页 |
| ·中性粒细胞活性检测 | 第58页 |
| ·一氧化氮产生检测 | 第58页 |
| ·软骨体外组织培养与TNFα诱导的COMP降解 | 第58-59页 |
| ·体外抑制检测 | 第59页 |
| ·CD4~+T细胞体外分化 | 第59-60页 |
| ·Ⅱ型胶原蛋白诱导的关节炎模型 | 第60页 |
| ·TNFα转基因小鼠模型 | 第60页 |
| ·关节炎临床评估 | 第60-61页 |
| ·关节组织病理学检查 | 第61-62页 |
| ·实验结果和讨论 | 第62-84页 |
| ·PGRN结合蛋白的酵母双杂交文库筛选 | 第62-63页 |
| ·PGRN与TNFRs相互结合的细胞内和细胞外检测 | 第63-66页 |
| ·PGRN与TNFR1和TNFR2亲和力分析 | 第66-67页 |
| ·PGRN抑制TNFα与TNFR1和TNFR2的结合 | 第67-68页 |
| ·PGRN缺失导致TNFα诱导的炎性分子产生和COMP降解增强 | 第68-70页 |
| ·PGRN抑制TNFα对T细胞的调节作用 | 第70-73页 |
| ·PGRN基因缺失小鼠对CIA敏感性增强 | 第73-77页 |
| ·重组PGRN抑制PGRN基因缺失CIA小鼠的炎症性关节炎 | 第77-80页 |
| ·PGRN基因敲除促进TNF转基因小鼠中炎症性关节炎的自发产生 | 第80-83页 |
| ·重组PGRN抑制TNF-Tg小鼠炎症性关节炎的自动发生 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-86页 |
| 第三章 PGRN来源工程蛋白Atsttrin的构建及其在类风湿性关节炎小鼠模型中的防治效果 | 第86-132页 |
| ·引言 | 第86-87页 |
| ·实验材料和方法 | 第87-100页 |
| ·PGRN结合TNFR2的结合区段分析 | 第87页 |
| ·FAC、2/3FAC、1/2FAC和1/4FAC与TNFR2的结合 | 第87-88页 |
| ·PGRN来源的工程蛋白Atsttrin的纯化 | 第88-89页 |
| ·Atsttrin与TNFRs的动力学与亲和分析 | 第89页 |
| ·固相结合分析 | 第89页 |
| ·流式细胞术分析 | 第89-90页 |
| ·中性粒细胞活性检测 | 第90页 |
| ·一氧化氮产生检测 | 第90页 |
| ·TNFα诱导的细胞毒性实验 | 第90-91页 |
| ·TNFα诱导的破骨细胞分化 | 第91页 |
| ·破骨细胞TRAP染色和骨吸收功能分析 | 第91-92页 |
| ·TNFα胞内信号途径检测 | 第92-93页 |
| ·细胞质与细胞核提取物中NF-кB检测 | 第93页 |
| ·细胞免疫荧光检测 | 第93-94页 |
| ·染色质免疫沉淀分析 | 第94-95页 |
| ·报告基因分析 | 第95-96页 |
| ·TNFα诱导的NF-кB依赖性基因表达分析 | 第96-97页 |
| ·MTT法检测细胞增殖 | 第97-98页 |
| ·胶原蛋白抗体诱导的关节炎模型 | 第98页 |
| ·胶原蛋白诱导的关节炎模型 | 第98-99页 |
| ·μCT扫描分析 | 第99页 |
| ·免疫组织化学检测 | 第99页 |
| ·CIA小鼠血清成分检测 | 第99页 |
| ·Atsttrin稳定性分析 | 第99-100页 |
| ·TNF-Tg小鼠模型治疗效果评估 | 第100页 |
| ·实验结果和讨论 | 第100-129页 |
| ·单个Granulin或连接子与TNFR2结合的酵母双杂交检测 | 第100-101页 |
| ·GRN及相邻连接子重组体与TNFR2结合的酵母双杂交检测 | 第101-102页 |
| ·PGRN来源的工程蛋白Atsttrin的构建及纯化鉴定 | 第102-105页 |
| ·Atsttrin与TNFR1和TNFR2亲和力分析 | 第105-106页 |
| ·Atsttrin抑制TNFα、LTα与TNFRs的结合 | 第106-108页 |
| ·Atsttrin抑制TNFα诱导的生物学功能 | 第108-111页 |
| ·PGRN和Atsttrin抑制TNFα诱导的NF-кB与MAPK信号途径活化 | 第111-115页 |
| ·Atsttrin抑制PGRN介导的细胞增殖信号途径活化及细胞增殖 | 第115-117页 |
| ·PGRN和Atsttrin抑制胶原蛋白抗体诱导的关节炎 | 第117-119页 |
| ·PGRN和Atsttrin抑制Ⅱ型胶原蛋白诱导的关节炎 | 第119-124页 |
| ·工程蛋白Atsttrin的药代动力学分析 | 第124-126页 |
| ·Atsttrin的给药剂量与频率研究 | 第126-127页 |
| ·Atsttrin对TNF-Tg小鼠炎症性关节炎的治疗效果 | 第127-128页 |
| ·Atsttrin治疗效果的受体依赖性分析 | 第128-129页 |
| ·小结 | 第129-132页 |
| 第四章 PGRN结合RANK及PGRN基因缺失与骨丢失的关系 | 第132-152页 |
| ·引言 | 第132-133页 |
| ·实验材料和方法 | 第133-139页 |
| ·PGRN和Atsttrin与TNFR超家族成员结合的酵母双杂交体系分析 | 第133页 |
| ·ONPG法定量检测PGRN与TNF受体超家族成员的结合 | 第133-134页 |
| ·固相结合分析 | 第134页 |
| ·BMDMs的分离与破骨细胞分化及骨吸收功能分析 | 第134-135页 |
| ·RANKL诱导的一氧化氮产生检测 | 第135-136页 |
| ·RANKL诱导的破骨细胞分化标志基因表达分析 | 第136-137页 |
| ·骨矿物质密度检测 | 第137页 |
| ·雌激素缺乏诱导的骨质疏松小鼠模型 | 第137页 |
| ·μCT扫描分析 | 第137页 |
| ·组织样本处理与组织学染色 | 第137-139页 |
| ·实验结果和讨论 | 第139-150页 |
| ·PGRN与TNFRSF成员的结合及其结合能力分析 | 第139-140页 |
| ·PGRN结合RANK并抑制RANKL与RANK的结合 | 第140-142页 |
| ·重组PGRN抑制RANKL诱导的破骨细胞分化 | 第142-143页 |
| ·PGRN基因敲除的BMDMs对RANKL诱导的破骨细胞分化更敏感 | 第143-144页 |
| ·PGRN抑制RANKL诱导的生物学功能及基因表达 | 第144-146页 |
| ·年老PGRN敲除雌性小鼠骨量明显降低 | 第146-148页 |
| ·年老PGRN敲除雌性小鼠破骨细胞活性显著增强 | 第148-149页 |
| ·PGRN敲除小鼠在卵巢切除小鼠模型中骨丢失更严重 | 第149-150页 |
| ·小结 | 第150-152页 |
| 第五章 PGRN与PGRN来源的工程蛋白对骨质疏松症动物模型的治疗效果及机制分析 | 第152-178页 |
| ·引言 | 第152页 |
| ·实验材料和方法 | 第152-160页 |
| ·介导PGRN结合RANK的PGRN区段酵母双杂交分析 | 第152-153页 |
| ·FAC、2/3FAC、1/2FAC和1/4FAC与RANK的结合分析 | 第153页 |
| ·PGRN来源的工程蛋白Arstrin的纯化 | 第153-154页 |
| ·Arstrin抑制RANKL与RANK的结合 | 第154-155页 |
| ·PGRN、Arstrin和Atsttrin对RANKL诱导一氧化氮产生的影响 | 第155页 |
| ·Arstrin对RANKL诱导的破骨细胞分化标志基因表达的影响 | 第155页 |
| ·Arstrin与Atsttrin对破骨细胞分化和骨吸收功能的影响 | 第155页 |
| ·信号途径活化检测 | 第155-156页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第156页 |
| ·染色质免疫沉淀分析 | 第156-157页 |
| ·报告基因分析 | 第157-159页 |
| ·RANKL诱导的NF-кB依赖性基因表达分析 | 第159页 |
| ·雌激素缺乏诱导的骨质疏松小鼠模型 | 第159-160页 |
| ·TNF-Tg小鼠炎症性骨丢失模型 | 第160页 |
| ·PGRN、Arstrin和Atsttrin抑制破骨细胞分化的受体依赖性分析 | 第160页 |
| ·实验结果和讨论 | 第160-177页 |
| ·PGRN结合RANK的结合区段分析及Arstrin的构建 | 第160-164页 |
| ·Arstrin抑制RANKL与RANK的结合及其生物学功能 | 第164-165页 |
| ·Arstrin抑制RANKL诱导的破骨细胞分化 | 第165-166页 |
| ·PGRN与Arstrin抑制RANKL诱导的NF-кB途径活化 | 第166-168页 |
| ·PGRN与Arstrin抑制RANKL诱导的NF-кB的转录激活作用 | 第168-170页 |
| ·PGRN与Arstrin抑制RANKL诱导的MAPK途径活化 | 第170-171页 |
| ·PGRN、Arstrin和Atsttrin抑制雌激素缺乏诱导的骨质疏松 | 第171-172页 |
| ·PGRN、Arstrin和Atsttrin抑制雌激素缺乏小鼠模型的破骨细胞活性 | 第172-173页 |
| ·PGRN、Arstrin和Atsttrin对TNF-Tg小鼠骨丢失的治疗作用 | 第173-175页 |
| ·PGRN和PGRN来源工程蛋白抑制破骨细胞分化的机制分析 | 第175-177页 |
| ·小结 | 第177-178页 |
| 参考文献 | 第178-194页 |
| 致谢 | 第194-195页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第195-196页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第196-198页 |
| 英文论文一 | 第198-226页 |
| 英文论文二 | 第226-251页 |
