| 摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 国内外研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 我国Cd污染现状 | 第13-14页 |
| 1.1.2 Cd的来源及对人和植物的影响 | 第14-15页 |
| 1.1.3 植物耐Cd机制研究进展 | 第15-17页 |
| 1.1.4 短链脱氢/还原酶(SDR)基因家族 | 第17页 |
| 1.1.5 黄瓜基因组学及转基因技术研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2 研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 1.3 试验研究内容及技术路线 | 第19-20页 |
| 1.3.1 试验主要研究内容 | 第19页 |
| 1.3.2 试验主要技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株、质粒和试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-29页 |
| 2.2.1 黄瓜RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第21页 |
| 2.2.3 引物的设计合成 | 第21-22页 |
| 2.2.4 CsNRSP的CDS序列全长扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.5 质粒的提取 | 第23页 |
| 2.2.6 生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2.7 CsNRSP的表达分析 | 第23页 |
| 2.2.8 过表达载体的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.9 拟南芥遗传转化和抗性苗的筛选 | 第25-26页 |
| 2.2.10 转基因拟南芥分子鉴定 | 第26页 |
| 2.2.11 转CsNRSP基因拟南芥在Cd胁迫下功能分析 | 第26-27页 |
| 2.2.12 黄瓜遗传转化 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-40页 |
| 3.1 CsNRSP基因的获得 | 第29页 |
| 3.2 CsNRSP在Cd胁迫条件下的表达分析 | 第29-30页 |
| 3.3 CsNRSP的克隆 | 第30页 |
| 3.4 CsNRSP的序列分析 | 第30-31页 |
| 3.5 CsNRSP系统进化分析 | 第31-32页 |
| 3.6 CsNRSP的过表达载体构建 | 第32-34页 |
| 3.6.1 目的基因的连接及菌落PCR验证 | 第32-33页 |
| 3.6.2 质粒双酶切验证 | 第33页 |
| 3.6.3 重组质粒导入根癌农杆菌 | 第33-34页 |
| 3.6.4 转基因拟南芥的获得 | 第34页 |
| 3.7 转CsNRSP基因拟南芥在Cd胁迫下功能分析 | 第34-38页 |
| 3.7.1 CsNRSP基因表达对根长的影响 | 第34-35页 |
| 3.7.2 CsNRSP基因表达对鲜重的影响 | 第35-36页 |
| 3.7.3 CsNRSP基因表达对光合作用的影响 | 第36-37页 |
| 3.7.4 CsNRSP基因表达对抗氧化酶的影响 | 第37页 |
| 3.7.5 CsNRSP基因表达对耐Cd相关基因表达的影响 | 第37-38页 |
| 3.8 转基因黄瓜的获得 | 第38-40页 |
| 3.8.1 转基因黄瓜的抗性苗的获得 | 第38-39页 |
| 3.8.2 转基因黄瓜的抗性苗的鉴定 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53页 |
