摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
英文缩略词表 | 第11-12页 |
绪论 | 第12-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-23页 |
1 禽腺病毒简介 | 第13-20页 |
1.1 禽腺病毒分类 | 第13-14页 |
1.2 禽腺病毒结构及理化特性 | 第14-15页 |
1.3 禽腺病毒基因组特点与功能 | 第15-16页 |
1.4 禽腺病毒复制 | 第16-17页 |
1.5 禽腺病毒致病性和流行特点 | 第17-18页 |
1.6 Hexon蛋白的结构和抗原性分析 | 第18-19页 |
1.7 Hexon的免疫反应 | 第19-20页 |
1.8 检测技术的发展 | 第20页 |
2 研究的目的和意义 | 第20-23页 |
第二篇 研究内容 | 第23-51页 |
1 材料和方法 | 第23-27页 |
1.1 病毒、载体、细胞和实验动物 | 第23-24页 |
1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
1.3 主要仪器设备及产地 | 第25页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第25-27页 |
2 试验方法 | 第27-39页 |
2.1 原代鸡胚肾细胞(CEK)的制备 | 第27页 |
2.2 病毒扩增及基因组提取 | 第27页 |
2.3 截短体Hexon PCR扩增 | 第27-29页 |
2.4 pET-30a-hexon原核表达载体构建 | 第29-30页 |
2.5 pcDNA3-hexon真核表达载体的构建 | 第30页 |
2.6 Hexon蛋白的可容性检测与诱导表达 | 第30-31页 |
2.7 Hexon的免疫原制备及小鼠免疫 | 第31页 |
2.8 间接免疫荧光(IFA)抗原的制备 | 第31-32页 |
2.9 IFA测定多抗血清 | 第32页 |
2.10 SP2/0骨髓瘤细胞的培养 | 第32页 |
2.11 脾细胞的制备 | 第32页 |
2.12 小鼠腹腔巨噬细胞的培养 | 第32页 |
2.13 细胞融合 | 第32-33页 |
2.14 杂交瘤细胞IFA检测和筛选 | 第33页 |
2.15 Western Blot检测 | 第33-34页 |
2.16 杂交瘤细胞的冻存 | 第34页 |
2.17 单抗腹水的制备 | 第34页 |
2.18 超离病毒的制备 | 第34-35页 |
2.19 ELISA检测板制备 | 第35页 |
2.20 Hexon单克隆抗体效价测定 | 第35-36页 |
2.21 Hexon单克隆抗体的亚型鉴定 | 第36页 |
2.22 Hexon单克隆抗体抗原表位的鉴定 | 第36-38页 |
2.23 Hexon蛋白分段扩增、克隆、表达与初步抗原表位的检测 | 第38页 |
2.24 Hexon单克隆抗体的特异性鉴定 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-48页 |
3.1 Hexon重组表达质粒的构建及鉴定 | 第39-40页 |
3.2 Hexon原核表达与可溶性分析 | 第40页 |
3.3 阳性小鼠血清效价检测结果 | 第40-41页 |
3.4 真核转染检测结果 | 第41-42页 |
3.5 病毒感染检测结果 | 第42页 |
3.6 免疫印迹检测 | 第42-43页 |
3.7 单克隆抗体亚型鉴定 | 第43-44页 |
3.8 单克隆抗体的效价的鉴定 | 第44-45页 |
3.9 抗Hexon蛋白单克隆抗体抗原表位的鉴定结果 | 第45-47页 |
3.10 抗Hexon蛋白单克隆抗体特异性鉴定结果 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
全文总结 | 第55-57页 |
致谢 | 第57页 |