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血清4型禽腺病毒六邻体Hexon单克隆抗体研制

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
英文缩略词表第11-12页
绪论第12-13页
第一篇 文献综述第13-23页
    1 禽腺病毒简介第13-20页
        1.1 禽腺病毒分类第13-14页
        1.2 禽腺病毒结构及理化特性第14-15页
        1.3 禽腺病毒基因组特点与功能第15-16页
        1.4 禽腺病毒复制第16-17页
        1.5 禽腺病毒致病性和流行特点第17-18页
        1.6 Hexon蛋白的结构和抗原性分析第18-19页
        1.7 Hexon的免疫反应第19-20页
        1.8 检测技术的发展第20页
    2 研究的目的和意义第20-23页
第二篇 研究内容第23-51页
    1 材料和方法第23-27页
        1.1 病毒、载体、细胞和实验动物第23-24页
        1.2 主要试剂第24-25页
        1.3 主要仪器设备及产地第25页
        1.4 主要溶液的配制第25-27页
    2 试验方法第27-39页
        2.1 原代鸡胚肾细胞(CEK)的制备第27页
        2.2 病毒扩增及基因组提取第27页
        2.3 截短体Hexon PCR扩增第27-29页
        2.4 pET-30a-hexon原核表达载体构建第29-30页
        2.5 pcDNA3-hexon真核表达载体的构建第30页
        2.6 Hexon蛋白的可容性检测与诱导表达第30-31页
        2.7 Hexon的免疫原制备及小鼠免疫第31页
        2.8 间接免疫荧光(IFA)抗原的制备第31-32页
        2.9 IFA测定多抗血清第32页
        2.10 SP2/0骨髓瘤细胞的培养第32页
        2.11 脾细胞的制备第32页
        2.12 小鼠腹腔巨噬细胞的培养第32页
        2.13 细胞融合第32-33页
        2.14 杂交瘤细胞IFA检测和筛选第33页
        2.15 Western Blot检测第33-34页
        2.16 杂交瘤细胞的冻存第34页
        2.17 单抗腹水的制备第34页
        2.18 超离病毒的制备第34-35页
        2.19 ELISA检测板制备第35页
        2.20 Hexon单克隆抗体效价测定第35-36页
        2.21 Hexon单克隆抗体的亚型鉴定第36页
        2.22 Hexon单克隆抗体抗原表位的鉴定第36-38页
        2.23 Hexon蛋白分段扩增、克隆、表达与初步抗原表位的检测第38页
        2.24 Hexon单克隆抗体的特异性鉴定第38-39页
    3 结果第39-48页
        3.1 Hexon重组表达质粒的构建及鉴定第39-40页
        3.2 Hexon原核表达与可溶性分析第40页
        3.3 阳性小鼠血清效价检测结果第40-41页
        3.4 真核转染检测结果第41-42页
        3.5 病毒感染检测结果第42页
        3.6 免疫印迹检测第42-43页
        3.7 单克隆抗体亚型鉴定第43-44页
        3.8 单克隆抗体的效价的鉴定第44-45页
        3.9 抗Hexon蛋白单克隆抗体抗原表位的鉴定结果第45-47页
        3.10 抗Hexon蛋白单克隆抗体特异性鉴定结果第47-48页
    4 讨论第48-51页
参考文献第51-55页
全文总结第55-57页
致谢第57页

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