| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 溶藻弧菌 | 第9-12页 |
| 1.1.1 溶藻弧菌的分布 | 第9-10页 |
| 1.1.2 溶藻弧菌的流行病学 | 第10页 |
| 1.1.3 溶藻弧菌的致病机理 | 第10-12页 |
| 1.2 细菌 | 第12-13页 |
| 1.2.1 细菌的运动 | 第12-13页 |
| 1.2.2 细菌生物膜 | 第13页 |
| 1.3 RpoN(σ~(54)) | 第13-14页 |
| 1.4 tssJ | 第14页 |
| 1.5 自杀质粒pLP12 | 第14-15页 |
| 1.6 基因敲除技术的介绍 | 第15页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第15-17页 |
| 2 溶藻弧菌rpoN基因缺失突变株的构建 | 第17-32页 |
| 2.1 前言 | 第17页 |
| 2.2 试验材料 | 第17-20页 |
| 2.2.1 质粒和菌株 | 第17页 |
| 2.2.2 主要试验仪器 | 第17-18页 |
| 2.2.3 引物 | 第18-19页 |
| 2.2.4 试验试剂 | 第19-20页 |
| 2.3 试验方法 | 第20-24页 |
| 2.3.1 HN08155(WT)的rpoN基因全长序列的克隆 | 第20-21页 |
| 2.3.2 HN08155(WT)的rpoN基因侧翼序列的克隆 | 第21-22页 |
| 2.3.3 获得pLP12反向PCR产物 | 第22页 |
| 2.3.4 感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| 2.3.5 pLP12-rpoN重组质粒的获得 | 第23页 |
| 2.3.6 接合转移 | 第23-24页 |
| 2.4 结果 | 第24-30页 |
| 2.4.1 HN08155(WT)基因组DNA, rpoN基因全长序列及质粒rpoN-T 1的获得 | 第24-27页 |
| 2.4.2 rpoN基因侧翼序列的获得 | 第27-28页 |
| 2.4.3 pLP12反向PCR产物的获得 | 第28页 |
| 2.4.4 pLP12-rpoN重组质粒的获得 | 第28-29页 |
| 2.4.5 接合转移 | 第29-30页 |
| 2.5 讨论 | 第30-32页 |
| 3 溶藻弧菌HN08155, △tssJ,△rpoN菌株表型的比较分析 | 第32-42页 |
| 3.1 前言 | 第32页 |
| 3.2 试验所需材料和仪器 | 第32-33页 |
| 3.2.1 菌株 | 第32页 |
| 3.2.2 试剂 | 第32页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第32-33页 |
| 3.3 方法 | 第33-36页 |
| 3.3.1 生长曲线的测定 | 第33-34页 |
| 3.3.2 平板泳动试验 | 第34页 |
| 3.3.3 鞭毛的观察 | 第34页 |
| 3.3.4 胞外多糖形成能力检测 | 第34-36页 |
| 3.3.5 生物膜检测 | 第36页 |
| 3.4 结果 | 第36-40页 |
| 3.4.1 HN08155(WT)、△tssJ和△rpoN生长曲线的测定 | 第36-37页 |
| 3.4.2 HN08155(WT)、△tssJ和△rpoN平板泳动试验结果 | 第37页 |
| 3.4.3 HN08155(WT)、△tssJ和△rpoN鞭毛的显微观察 | 第37-38页 |
| 3.4.4 HN08155(WT)、△tssJ和△rpoN胞外多糖形成能力检测试验结果 | 第38-39页 |
| 3.4.5 HN08155(WT)、△tssJ和△rpoN生物膜形成试验结果 | 第39-40页 |
| 3.5 讨论 | 第40-42页 |
| 4 结论与展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
