| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 第一部分 前言 | 第13-15页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第15-35页 |
| 1 实验材料、试剂及设备 | 第15-18页 |
| 1.1 实验用动物 | 第15页 |
| 1.2 实验材料及试剂 | 第15-16页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 1.4 主要试剂及其配制 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-25页 |
| 2.1 实验用动物模型制备 | 第18-20页 |
| 2.1.1 Tgfb1~(flox/-)小鼠制备及筛选 | 第18页 |
| 2.1.2 Tgfb1~(flox/flox)转基因动物基因型的鉴定 | 第18-20页 |
| 2.2 敲除小鼠牙齿形态观察 | 第20页 |
| 2.2.1 体视显微镜观察分析 | 第20页 |
| 2.2.2 扫描电镜观察 | 第20页 |
| 2.3 釉质矿化及釉柱形态结构观察 | 第20-21页 |
| 2.3.1 Micro-CT对釉质矿化的分析 | 第20-21页 |
| 2.3.2 SEM对切牙牙冠断面的釉柱形态观察 | 第21页 |
| 2.4 HE染色观察釉质基质含量及成釉细胞的改变 | 第21-22页 |
| 2.5 IHC检测Tgfb1蛋白在野生型小鼠及敲除型小鼠成釉细胞内的表达 | 第22-23页 |
| 2.5.1 免疫组化标本制备 | 第22页 |
| 2.5.2 IHC步骤 | 第22-23页 |
| 2.6 Realtime-PCR技术 | 第23-25页 |
| 2.6.1 收集组织标本 | 第23页 |
| 2.6.2 小鼠下颌磨牙区RNA的提取 | 第23页 |
| 2.6.3 RNA反转录 | 第23-24页 |
| 2.6.4 qRT-PCR检测釉质相关基因的表达量 | 第24页 |
| 2.6.5 Real-time-PCR分析结果 | 第24页 |
| 2.6.6 统计学分析 | 第24-25页 |
| 3 实验结果 | 第25-35页 |
| 3.1 K14-cre-Tgfb1~(-/-)小鼠构建及筛选 | 第25-28页 |
| 3.1.1 Tgfb1基因条件敲除小鼠设计策略 | 第25-26页 |
| 3.1.2 Tgfb1~(flox/flox)筛选及繁殖 | 第26-27页 |
| 3.1.3 Tgfb1敲除小鼠筛选 | 第27-28页 |
| 3.2 Tgfb1敲除小鼠验证及表型观察 | 第28-30页 |
| 3.3 SEM对小鼠牙齿表面形态的分析 | 第30-31页 |
| 3.4 Micro-CT对小鼠牙釉质矿化进行分析 | 第31-32页 |
| 3.5 扫描电镜对釉柱结构的观察 | 第32-33页 |
| 3.6 HE分析 | 第33-34页 |
| 3.7 Real-time-PCR分析牙釉质相关基因的表达 | 第34-35页 |
| 第三部分 讨论 | 第35-38页 |
| 第四部分 结论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 综述 | 第43-48页 |
| 参考文献 | 第46-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 学术论文目录及参与科研学术活动 | 第49页 |
