| 摘要 | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-34页 |
| 第一章 皮肤色素沉积的调控 | 第11-20页 |
| 1 黑色素细胞与角质形成细胞 | 第11-12页 |
| 2 色素形成的生物化学机制 | 第12页 |
| 3 色素形成的调节因素 | 第12-14页 |
| 3.1 生化因素 | 第12页 |
| 3.2 发育因素 | 第12-13页 |
| 3.3 黑色素细胞与相邻细胞相互的作用及紫外照射的影响 | 第13-14页 |
| 4 正常黑色素细胞的发育 | 第14-20页 |
| 4.1 Notch | 第14-16页 |
| 4.2 Wnt | 第16-17页 |
| 4.3 内皮素 | 第17-19页 |
| 4.4 SOX蛋白 | 第19页 |
| 4.5 MITF | 第19-20页 |
| 第二章 黑色素细胞和黑素瘤生物学中的MicroRNA | 第20-27页 |
| 1 黑色素细胞发育及疾病的调控途径 | 第22-23页 |
| 2 黑色素细胞生物学中的MicroRNA | 第23-25页 |
| 3 黑素瘤和黑素瘤亚型特异性microRNAs | 第25-27页 |
| 参考文献 | 第27-34页 |
| 第二部分 试验内容 | 第34-93页 |
| 第一章 生物信息学预测和筛选microRNA-5110靶基因及其验证 | 第34-42页 |
| 1 材料与方法 | 第34-37页 |
| 1.1 试验样本 | 第34页 |
| 1.2 试验试剂、耗材及仪器 | 第34-35页 |
| 1.3 试验方法 | 第35-37页 |
| 2 结果 | 第37-39页 |
| 2.1 候选靶向基因Wnt1和MLPH的扩增和验证 | 第37-38页 |
| 2.2 靶基因Wnt1,MLPH双荧光报告载体和microRNA-5110过表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39页 |
| 4 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-42页 |
| 第二章 microRNA-5110转染黑色素细胞对色素生成的影响 | 第42-58页 |
| 1 材料与方法 | 第42-48页 |
| 1.1 试验材料 | 第42页 |
| 1.2 试验试剂、耗材和仪器 | 第42-43页 |
| 1.3 试验方法 | 第43-48页 |
| 2 结果 | 第48-54页 |
| 2.1 转染后羊驼黑色素细胞总RNA的鉴定 | 第48页 |
| 2.2 转染后黑色素细胞总蛋白的鉴定 | 第48-49页 |
| 2.3 microRNA-5110转染羊驼黑色素细胞后的表达差异 | 第49页 |
| 2.4 microRNA-5110转染羊驼黑色素细胞后Wnt1和MLPH基因的表达水平 | 第49-50页 |
| 2.5 microRNA-5110转染羊驼黑色素细胞后Wnt1和MLPH蛋白的表达水平 | 第50页 |
| 2.6 荧光定量PCR检测转染后羊驼黑色素细胞中MITF、TYR、TYRP1、TYRP2、Rab27a和Myosin Va的mRNA表达水平差异 | 第50-51页 |
| 2.7 microRNA-5110转染羊驼黑色素细胞后MITF、TYR、TYRP1、TYRP2、Rab27a和Myosin Va蛋白的表达水平 | 第51-52页 |
| 2.8 microRNA-5110转染羊驼黑色素细胞后,碱溶性总黑色素、褐黑色素和真黑色素含量的测定 | 第52-53页 |
| 2.9 细胞免疫组化实验结果 | 第53-54页 |
| 2.10 原位杂交鉴定MicroRNA-5110在羊驼黑色素细胞中的分布 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-58页 |
| 第三章 microRNA-5110对小鼠黑色素细胞内黑色素颗粒转运的影响 | 第58-73页 |
| 1 材料与方法 | 第59-64页 |
| 1.1 试验动物 | 第59页 |
| 1.2 试验试剂、耗材和仪器 | 第59-60页 |
| 1.3 试验方法 | 第60-61页 |
| 1.4 microRNA-5110过表达在小鼠黑色素细胞与角质形成细胞共培养中对黑色素颗粒合成和转运的影响 | 第61-62页 |
| 1.5 microRNA-5110对小鼠毛色影响的研究 | 第62页 |
| 1.6 注射后小鼠毛内碱溶性黑色素含量的检测 | 第62-63页 |
| 1.7 荧光定量PCR和western blotting检测方法 | 第63-64页 |
| 2 结果 | 第64-69页 |
| 2.1 小鼠黑色素细胞与角质形成细胞的形态观察 | 第64-65页 |
| 2.2 小鼠黑色素细胞与角质形成细胞共培养的鉴定 | 第65-66页 |
| 2.3 Fontana-Masson法染色结果 | 第66-67页 |
| 2.4 小鼠毛色及黑色素含量的变化 | 第67-68页 |
| 2.5 荧光定量PCR和western blotting检测结果 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 4 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| 第四章 羊驼黑色素细胞过表达microRNA-5110的基因表达谱 | 第73-82页 |
| 1 材料和方法 | 第73-74页 |
| 1.1 试验样本 | 第73页 |
| 1.2 试验所用仪器 | 第73页 |
| 1.3 细胞培养用品 | 第73页 |
| 1.4 试验方法 | 第73-74页 |
| 2 结果 | 第74-79页 |
| 2.1 Unigenes数据概述 | 第74-75页 |
| 2.2 Unigenes的功能分类 | 第75-76页 |
| 2.3 KEGG途径分析 | 第76-77页 |
| 2.4 已知基因的差异表达 | 第77页 |
| 2.5 荧光定量PCR验证 | 第77-79页 |
| 3 讨论 | 第79页 |
| 4 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 第五章 sGC在绵羊皮肤和黑色素细胞中的定位与表达 | 第82-93页 |
| 1 材料与方法 | 第82-87页 |
| 1.1 试验材料 | 第82页 |
| 1.2 试验试剂、耗材和仪器 | 第82-83页 |
| 1.3 试验方法 | 第83-87页 |
| 2 结果 | 第87-90页 |
| 2.1 sGC在绵羊皮肤及黑色素细胞中的定位与表达 | 第87-88页 |
| 2.2 sGC在绵羊皮肤中mRNA及蛋白的表达 | 第88页 |
| 2.3 sGC过表达在绵羊皮肤黑色素细胞中的表达 | 第88-89页 |
| 2.4 过表达pGLO-sGC质粒对黑色素生成相关基因的影响 | 第89-90页 |
| 3 讨论 | 第90-91页 |
| 4 结论 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-93页 |
| 全文总结 | 第93-94页 |
| 创新 | 第94-95页 |
| Abstract | 第95-96页 |
| 中英文对照及缩写表 | 第97-98页 |
| 附录 在读期间发表的实验性论文的情况 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
