| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词对照表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-39页 |
| 前言 | 第11页 |
| 1.1 睡眠调控研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.1 体液调节对睡眠的调控作用 | 第11-12页 |
| 1.1.2 觉醒中枢神经元的被动去传入机制 | 第12-14页 |
| 1.1.3 睡眠中枢神经元的调控作用 | 第14-15页 |
| 1.2 睡眠的生理学意义 | 第15-18页 |
| 1.2.1 保存能量 | 第15页 |
| 1.2.2 代谢平衡 | 第15-16页 |
| 1.2.3 记忆存储 | 第16-18页 |
| 1.3 睡眠研究策略 | 第18-21页 |
| 1.4 参与睡眠的调控系统 | 第21-27页 |
| 1.4.1 节律调控系统 | 第21-25页 |
| 1.4.2 睡醒稳态调控系统 | 第25-27页 |
| 1.5 参与睡眠调控的分子 | 第27-39页 |
| 1.5.1 生物胺 | 第27-28页 |
| 1.5.2 GABA | 第28-31页 |
| 1.5.3 GABA_A受体 | 第31-39页 |
| 第二章 实验方法和材料 | 第39-57页 |
| 2.1 果蝇品系、突变体果蝇以及转基因果蝇的制备 | 第39-42页 |
| 2.1.1 果蝇品系 | 第39页 |
| 2.1.2 突变体果蝇的制备 | 第39-40页 |
| 2.1.3 转基因果蝇的制备 | 第40-41页 |
| 2.1.4 果蝇的同源重组整合 | 第41-42页 |
| 2.2 果蝇培养和行为学分析 | 第42-43页 |
| 2.2.1 果蝇培养 | 第42页 |
| 2.2.2 果蝇睡眠行为分析 | 第42-43页 |
| 2.3 蛋白纯化 | 第43-46页 |
| 2.3.1 麦芽糖蛋白纯化 | 第43-44页 |
| 2.3.2 His蛋白纯化 | 第44-45页 |
| 2.3.3 GST蛋白纯化 | 第45-46页 |
| 2.4 Westernblot蛋白免疫印迹、Pulldown与免疫共沉淀 | 第46-48页 |
| 2.4.1 WesternBlot免疫印迹 | 第46-47页 |
| 2.4.2 Pulldown | 第47页 |
| 2.4.3 免疫共沉淀 | 第47-48页 |
| 2.4.4 体外泛素化实验 | 第48页 |
| 2.5 免疫组化实验 | 第48-50页 |
| 2.5.1 抗体的纯化 | 第48-49页 |
| 2.5.2 免疫染色 | 第49-50页 |
| 2.6 S2R~+细胞培养 | 第50-51页 |
| 2.6.1 S2R~+细胞培养 | 第50页 |
| 2.6.2 S2R~+细胞转染 | 第50-51页 |
| 2.6.3 S2R~+荧光报告基因实验 | 第51页 |
| 2.7 全细胞电生理记录实验 | 第51-53页 |
| 2.8 定量PCR | 第53-54页 |
| 2.8.1 单细胞定量PCR | 第53页 |
| 2.8.2 果蝇成虫大脑定量PCR | 第53-54页 |
| 2.9 酵母双杂交筛选实验 | 第54页 |
| 2.10 数据统计分析 | 第54-57页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第57-89页 |
| 3.1 GABA_A受体在l-LNvs神经元质膜的动态变化 | 第57-61页 |
| 3.1.1 GABA_A受体抗体制备 | 第57-58页 |
| 3.1.2 GABA_A受体数量在l-LNvs神经元中动态变化 | 第58-59页 |
| 3.1.3 白天和晚上GABA_A受的降解速率不同 | 第59-61页 |
| 3.2 Fbxl4介导GABA_A受体的泛素化和降解 | 第61-68页 |
| 3.2.1 Fbxl4蛋白水平降低会导致GABA_A受体的含量增加 | 第61-63页 |
| 3.2.2 fbxl4~(Δ45)突变体的制备和Fbxl4蛋白表达分布 | 第63-65页 |
| 3.2.3 Fbxl4与GABA_A受体相互作用 | 第65-66页 |
| 3.2.4 Fbxl4介导GABA_A受体的泛素化 | 第66-68页 |
| 3.3 Fbxl4蛋白水平在l-LNvs神经元中是动态变化的 | 第68-70页 |
| 3.4 Fbxl4的表达是CLOCK依赖的,但不参与调控节律系统 | 第70-73页 |
| 3.4.1 Fbxl4的表达是CLOCK依赖的 | 第70-72页 |
| 3.4.2 Fbxl4蛋白本身不参与调控节律系统 | 第72-73页 |
| 3.5 Fbxl4通过减弱对GABA信号的敏感性来调节l-LNvs细胞的活性 | 第73-76页 |
| 3.5.1 fbxl4~(Δ45)突变体l-LNvs神经元的活性降低 | 第73-75页 |
| 3.5.2 fbxl4~(Δ45)突变体增加l-LNvs神经元细胞表面的GABA_A受体 | 第75-76页 |
| 3.6 Fbxl4通过促进GABA_A受体降解来调节睡眠 | 第76-82页 |
| 3.6.1 fbxl4~(Δ45)突变体表现为睡眠增加 | 第76-78页 |
| 3.6.2 Fbxl4蛋白通过介导GABA_A受体降解来调节睡眠 | 第78-82页 |
| 3.7 总结与讨论 | 第82-89页 |
| 3.7.1 Fbxl4蛋白在腹外侧神经元(l-LNvs)中的表达 | 第82-83页 |
| 3.7.2 Fbxl4通过介导GABA_A受体的降解作用调节睡眠 | 第83-85页 |
| 3.7.3 展望 | 第85-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 作者简介 | 第101页 |
| 科研成果 | 第101页 |
