| 摘要 | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-19页 |
| 1.1 杆状病毒简介及其应用 | 第8-9页 |
| 1.1.1 杆状病毒分类 | 第8页 |
| 1.1.2 杆状病毒的感染过程 | 第8-9页 |
| 1.1.3 杆状病毒应用及作为生物杀虫剂的优缺点 | 第9页 |
| 1.2 杆状病毒的分子生物学研究现状 | 第9-12页 |
| 1.2.1 杆状病毒的基因组研究 | 第9-10页 |
| 1.2.2 杆状病毒的蛋白质组研究 | 第10-11页 |
| 1.2.3 杆状病毒系统进化与基因组的分析技术 | 第11-12页 |
| 1.3 口服感染因子的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.3.1 口服感染因子PIFs | 第12-13页 |
| 1.3.2 不同口服感染因子的特征与功能 | 第13-15页 |
| 1.3.2.1 口服感染因子P74(PIF0) | 第13页 |
| 1.3.2.2 口服感染因子PIF1 | 第13页 |
| 1.3.2.3 口服感染因子PIF2 | 第13-14页 |
| 1.3.2.4 口服感染因子PIF3 | 第14页 |
| 1.3.2.5 口服感染因子PIF4 | 第14页 |
| 1.3.2.6 口服感染因子PIF5 | 第14页 |
| 1.3.2.7 口服感染因子PIF6 | 第14-15页 |
| 1.3.3 口服感染因子复合物及其相关蛋白质 | 第15-16页 |
| 1.3.3.1 口服感染因子复合物 | 第15-16页 |
| 1.3.3.2 口服感染因子复合物相关的蛋白质 | 第16页 |
| 1.4 ClanGV的研究现状 | 第16-17页 |
| 1.5 酵母双杂交系统 | 第17-18页 |
| 1.6 研究内容和意义 | 第18-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-31页 |
| 3.1 材料 | 第20-22页 |
| 3.1.1 菌株、质粒、病毒 | 第20页 |
| 3.1.2 酶及其它试剂 | 第20页 |
| 3.1.3 实验中自配溶液 | 第20-22页 |
| 3.1.4 耗材与仪器 | 第22页 |
| 3.1.5 引物合成和测序 | 第22页 |
| 3.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 3.2.1 病毒的提取 | 第22页 |
| 3.2.2 病毒基因组的提取 | 第22-23页 |
| 3.2.3 目的基因的扩增 | 第23-26页 |
| 3.2.3.1 目的基因pif的跨膜区分析 | 第23页 |
| 3.2.3.2 目的基因pif的引物设计 | 第23-26页 |
| 3.2.4 酵母PGADT7,PGBKT7重组载体的构建 | 第26-29页 |
| 3.2.4.1 PGADT7,PGBKT7质粒提取 | 第26-27页 |
| 3.2.4.2 PGADT7,PGBKT7质粒双酶切 | 第27页 |
| 3.2.4.3 pif基因连接到PGADT7,PGBKT7载体 | 第27页 |
| 3.2.4.4 连接体系转化大肠杆菌DH5α | 第27-28页 |
| 3.2.4.5 重组捕获载体和诱饵载体的鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2.5 诱饵载体的自激活检验 | 第29页 |
| 3.2.6 酵母双杂交验证PIFs的互作 | 第29-31页 |
| 3.2.6.1 酵母感受态的制备 | 第29-30页 |
| 3.2.6.2 重组诱饵载体和重组捕获载体的共转化 | 第30页 |
| 3.2.6.3 蛋白互作的进一步验证 | 第30-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-38页 |
| 4.1 ClanGV病毒基因组的提取 | 第31页 |
| 4.2 pif基因的PCR扩增 | 第31页 |
| 4.3 重组载体的构建 | 第31-33页 |
| 4.4 重组诱饵载体的自激活检测 | 第33-34页 |
| 4.5 酵母双杂验证PIFs间的互作 | 第34-38页 |
| 4.5.1 营养缺陷筛选验证PIFs间的互作 | 第34-36页 |
| 4.5.2 X-α-gal显色验证 | 第36-37页 |
| 4.5.3 PCR验证 | 第37-38页 |
| 5 讨论 | 第38-40页 |
| 6 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| ABSTRACT | 第47-48页 |
