摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第15-25页 |
1.1 石油污染相关情况概述 | 第15-16页 |
1.1.1 石油污染相关的现状 | 第15页 |
1.1.2 石油污染土壤的现状与危害 | 第15-16页 |
1.2 常见石油污染的修复 | 第16-18页 |
1.2.1 物理修复法 | 第16页 |
1.2.2 化学修复法 | 第16页 |
1.2.3 生物修复法 | 第16页 |
1.2.4 植物修复机制 | 第16-17页 |
1.2.5 花卉植物修复污染的土壤 | 第17页 |
1.2.6 植物逆境胁迫适应机制 | 第17-18页 |
1.3 热休克蛋白的概述 | 第18-19页 |
1.3.1 热休克蛋白的类型与分类 | 第18页 |
1.3.2 小热休克蛋白及其分类 | 第18页 |
1.3.3 小热休克蛋白的结构特性 | 第18-19页 |
1.3.4 小热休克蛋白的功能 | 第19页 |
1.4 植物逆境与热休克蛋白 | 第19-22页 |
1.4.1 植物逆境胁迫与内质网应激 | 第19页 |
1.4.2 UPR与细胞凋亡 | 第19-20页 |
1.4.3 小热休克蛋白与氧化胁迫耐受 | 第20-21页 |
1.4.4 小热休克蛋白与细胞凋亡 | 第21-22页 |
1.5 酿酒酵母 | 第22-23页 |
1.5.1 酿酒酵母中UPR信号通路 | 第22-23页 |
1.5.2 酿酒酵母与细胞凋亡 | 第23页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第23-25页 |
第二章 紫茉莉热休克蛋白的生物信息学分析 | 第25-33页 |
2.1 实验材料与方法 | 第25页 |
2.1.1 实验材料 | 第25页 |
2.1.2 实验方法 | 第25页 |
2.2 结果与分析 | 第25-29页 |
2.2.1 蛋白质的理化性质分析 | 第25-26页 |
2.2.2 蛋白质二级结构与结构域分析 | 第26-27页 |
2.2.3 功能预测结果分析 | 第27-28页 |
2.2.4 蛋白质的三级结构预测 | 第28-29页 |
2.3 MjsHsp18.2与MjsHsp17.7同源性分析以及聚类分析 | 第29-31页 |
2.3.1 MjsHsp18.2与MjsHsp17.7同源性分析 | 第30页 |
2.3.2 MjsHsp18.2与MjsHsp17.7蛋白的聚类分析 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
第三章 紫茉莉中MjsHsp实时PCR检测及转化酿酒酵母免疫验证 | 第33-46页 |
3.1 实验材料 | 第33页 |
3.1.1 实时荧光定量实验材料 | 第33页 |
3.1.2 Westernblot实验材料 | 第33页 |
3.2 实验试剂 | 第33-34页 |
3.2.1 实时荧光定量相关试剂 | 第33-34页 |
3.2.2 酿酒酵母总蛋白提取相关试剂 | 第34页 |
3.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)相关试剂 | 第34页 |
3.2.4 Westernblot相关试剂 | 第34页 |
3.3 实验仪器与培养基 | 第34-36页 |
3.3.1 培养基配制 | 第34-35页 |
3.3.2 实验仪器 | 第35-36页 |
3.4 实验方法 | 第36-39页 |
3.4.1 紫茉莉根部RNA提取及cDNA的合成 | 第36页 |
3.4.2 实时荧光定量PCR | 第36页 |
3.4.3 酿酒酵母菌体蛋白提取 | 第36-37页 |
3.4.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第37页 |
3.4.5 Westernblot验证 | 第37-39页 |
3.4.6 酵母敏感性实验 | 第39页 |
3.5 引物设计 | 第39页 |
3.6 结果与分析 | 第39-44页 |
3.6.1 紫茉莉根部的RNA鉴定 | 第39-40页 |
3.6.2 PCR扩增鉴定 | 第40页 |
3.6.3 紫茉莉中MjsHsp18.2与MjsHsp17.7基因实时荧光定量PCR | 第40-42页 |
3.6.4 SDS-PAGE电泳分析 | 第42页 |
3.6.5 Westernblot分析 | 第42-43页 |
3.6.6 酿酒酵母细胞对衣霉素处理的敏感性实验结果分析 | 第43-44页 |
3.7 讨论 | 第44-46页 |
第四章 MjsHsp基因与酵母内质网应激及细胞凋亡关系鉴定 | 第46-55页 |
4.1 试验材料与相关试剂 | 第46-47页 |
4.1.1 试验材料 | 第46页 |
4.1.2 试验试剂 | 第46-47页 |
4.2 实验仪器与引物 | 第47-48页 |
4.2.1 实验仪器 | 第47页 |
4.2.2 引物设计 | 第47-48页 |
4.3 实验方法 | 第48-49页 |
4.3.1 酿酒酵母RNA的提取以及反转录cDNA | 第48页 |
4.3.2 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第48页 |
4.3.3 酿酒酵母细胞凋亡率测定 | 第48-49页 |
4.3.4 MTT细胞存活率测定 | 第49页 |
4.4 结果分析 | 第49-53页 |
4.4.1 酿酒酵母中BiP实时荧光定量PCR检测结果 | 第49-50页 |
4.4.2 酿酒酵母中PDI1实时荧光定量PCR检测结果 | 第50-51页 |
4.4.3 超氧化物歧化酶(SOD)测定结果 | 第51页 |
4.4.4 酿酒酵母中Yca1实时荧光定量PCR检测结果 | 第51-52页 |
4.4.5 细胞凋亡率结果分析 | 第52-53页 |
4.4.6 MTT细胞存活率测定结果分析 | 第53页 |
4.5 讨论 | 第53-55页 |
第五章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-65页 |