| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 LPS刺激诱导原代枯否细胞细胞基因表达谱变化分析 | 第13-34页 |
| 1.1 实验材料 | 第14-17页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第14-15页 |
| 1.1.2 主要设备 | 第15-16页 |
| 1.1.3 实验动物 | 第16-17页 |
| 1.2 实验方法 | 第17-25页 |
| 1.2.1 大鼠原代KC的分离与培养 | 第17-18页 |
| 1.2.2 大鼠原代KC吞噬功能鉴定及细胞活性检测 | 第18-19页 |
| 1.2.3 大鼠原代KC分组与处理 | 第19页 |
| 1.2.4 大鼠原代KC总RNA提取及质量检测 | 第19-20页 |
| 1.2.5 RNA样品放大及荧光标记反应 | 第20-22页 |
| 1.2.6 Phalanx OneArray ~(TM)杂交反应流程 | 第22-23页 |
| 1.2.7 影像扫描和数据分析 | 第23页 |
| 1.2.8 实时荧光定量PCR | 第23-24页 |
| 1.2.9 统计学分析 | 第24-25页 |
| 1.3 实验结果 | 第25-30页 |
| 1.3.1 原代KC分离培养结果 | 第25页 |
| 1.3.2 原代KC吞噬功能鉴定 | 第25-26页 |
| 1.3.3 RNA质量检测结果 | 第26-27页 |
| 1.3.4 差异基因筛选 | 第27-29页 |
| 1.3.5 两组细胞Ceslf基因表达情况 | 第29-30页 |
| 1.4 讨论 | 第30-34页 |
| 第二章 LPS诱导Raw 264.7细胞炎症反应期间Irak1bp1表达的研究 | 第34-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-37页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.2 主要设备 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-44页 |
| 2.2.1 细胞培养与分组处理 | 第37页 |
| 2.2.2 Raw 264.7细胞总RNA提取及质量检测 | 第37页 |
| 2.2.3 实时荧光定量PCR | 第37-38页 |
| 2.2.4 酶联免疫技术(ELISA) | 第38-39页 |
| 2.2.5 Raw 264.7细胞蛋白抽提 | 第39-40页 |
| 2.2.6 蛋白质浓度测定、配平及变性 | 第40-41页 |
| 2.2.7 蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第41-43页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第43-44页 |
| 2.3 实验结果 | 第44-48页 |
| 2.3.1 RNA质量检测 | 第44页 |
| 2.3.2 两组细胞IL-6 mRNA表达 | 第44-45页 |
| 2.3.3 两组细胞上清IL-6蛋白表达 | 第45页 |
| 2.3.4 两组细胞Irak1bp1 mRNA表达 | 第45-46页 |
| 2.3.5 各组细胞Irak1bp1总蛋白表达 | 第46-47页 |
| 2.3.6 各组细胞lrak1bp1浆蛋白表达 | 第47-48页 |
| 2.3.7 各组细胞Irak1bp1核蛋白表达 | 第48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 敲减干扰素调节因子3(IRF3)对LPS刺激Raw 264.7细胞核内Irak1bp1表达的影响 | 第50-64页 |
| 3.1 实验材料 | 第51页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第51页 |
| 3.1.2 主要设备 | 第51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-56页 |
| 3.2.1 IRF3 shRNA腺病毒扩增 | 第51-52页 |
| 3.2.2 IRF3 shRNA腺病毒滴度检测 | 第52页 |
| 3.2.3 IRF3 shRNA腺病毒感染最适感染复数(MOI)测定 | 第52-53页 |
| 3.2.4 细胞培养与分组处理 | 第53页 |
| 3.2.5 Raw 264.7细胞总RNA提取及质量检测 | 第53页 |
| 3.2.6 实时荧光定量PCR | 第53-54页 |
| 3.2.7 Raw 264.7细胞核蛋白抽提 | 第54页 |
| 3.2.8 蛋白质浓度测定、配平及变性 | 第54页 |
| 3.2.9 蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第54页 |
| 3.2.10 统计学分析 | 第54-56页 |
| 3.3 实验结果 | 第56-61页 |
| 3.3.1 IRF3 shRNA腺病毒扩增结果 | 第56页 |
| 3.3.2 IRF3 shRNA腺病毒滴度检测 | 第56-57页 |
| 3.3.3 IRF3 shRNA腺病毒感染最佳MOI值测定 | 第57-58页 |
| 3.3.4 IRF3 shRNA腺病毒对Raw 264.7细胞IRF3 mRNA表达影响 | 第58-59页 |
| 3.3.5 IRF3shRNA腺病毒对核内IRF3蛋白表达的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.6 IRF3shRNA腺病毒对核内Irak1bp1蛋白表达的影响 | 第60-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-64页 |
| 第四章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 文献综述 | 第72-86页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 附录 | 第86-87页 |
| 攻读学位期间发表的文章 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
