| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 注释表 | 第9-12页 |
| 目录 | 第12-17页 |
| 1 绪论 | 第17-63页 |
| ·环境光对哺乳动物的生理和行为的影响 | 第18-25页 |
| ·环境光对哺乳动物昼夜节律和睡眠的影响 | 第18-20页 |
| ·环境光对大脑功能的影响 | 第20-23页 |
| ·环境光对动物基因表达的影响 | 第23-25页 |
| ·总结 | 第25页 |
| ·维生素A在动物体内的吸收、代谢和功能 | 第25-34页 |
| ·维生素A的体内吸收 | 第26-27页 |
| ·肝脏中维生素A的吸收 | 第27-28页 |
| ·血液中维生素A的运输 | 第28-29页 |
| ·胞内视黄醛和视黄酸的形成 | 第29-31页 |
| ·维生素A作用机理 | 第31-34页 |
| ·脂肪代谢基因mClps | 第34-36页 |
| ·脂肪代谢基因mClps表达的器官特异性 | 第35-36页 |
| ·脂肪代谢基因mClps对环境光的反应 | 第36页 |
| ·肝纤维化的研究进展 | 第36-38页 |
| ·肝细胞机制 | 第36-37页 |
| ·参与肝纤维化的细胞因子 | 第37-38页 |
| ·S-腺苷甲硫氨酸在肝脏修复和损伤中的作用 | 第38-42页 |
| ·SAMe的合成和降解 | 第39-40页 |
| ·SAMe在肝脏损伤中的作用 | 第40-41页 |
| ·SAMe能调节肝实质细胞的生长 | 第41页 |
| ·SAMe对肝实质细胞凋亡的调控 | 第41-42页 |
| ·SAMe对肝脏疾病的治疗作用 | 第42页 |
| ·MTA在SAMe作用机理中的作用 | 第42页 |
| ·维生素A的代谢和肝脏纤维化 | 第42-45页 |
| ·肝纤维化形成过程中体内类视黄醇的变化 | 第43页 |
| ·视黄酸对肝纤维化形成影响 | 第43-44页 |
| ·CRBP1与肝纤维化 | 第44页 |
| ·LRAT与肝纤维化 | 第44-45页 |
| ·肝纤维化过程中的RNA特异性干扰 | 第45-47页 |
| ·水动力转染 | 第46页 |
| ·局部注射 | 第46-47页 |
| ·本课题提出的意义和主要研究方向 | 第47-48页 |
| ·参考文献 | 第48-63页 |
| 2 环境光通过影响血液中全反式视黄酸含量调控肝脏mPlrp2、mClps表达和肝内脂肪代谢 | 第63-107页 |
| ·实验材料 | 第63-64页 |
| ·实验仪器 | 第63-64页 |
| ·实验动物 | 第64页 |
| ·实验试剂 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-79页 |
| ·血清中ATRA含量的测定 | 第64-65页 |
| ·血清中视黄醇含量分析 | 第65页 |
| ·肝脏中ATRA含量分析 | 第65-66页 |
| ·肝脏中ATR含量分析 | 第66页 |
| ·肝脏中维生素A酯含量分析 | 第66页 |
| ·基因表达分析 | 第66-70页 |
| ·SDS PAGE蛋白电泳 | 第70-71页 |
| ·Western Blot | 第71-72页 |
| ·血清中腺苷-5'-单磷酸含量的测定 | 第72-73页 |
| ·血清中甘油三酯、胆固醇含量的测定 | 第73-74页 |
| ·肝组织切片的制作和染色 | 第74-77页 |
| ·RNA印迹(Northern Blot) | 第77-79页 |
| ·实验设计 | 第79-83页 |
| ·不同光照条件下血清中ATRA含量的分析 | 第79-80页 |
| ·环境光对肝脏脂肪代谢基因表达影响的分析 | 第80页 |
| ·ATRA对小鼠肝脏中mClps、mPlrp2表达影响的分析 | 第80-81页 |
| ·ATRA对血清中5'-AMP含量影响 | 第81-82页 |
| ·腺苷受体对肝脏中mClps和mPlrp2表达的影响 | 第82页 |
| ·LD和DD条件下小鼠体内维生素A含量变化的分析 | 第82页 |
| ·LD和DD条件下小鼠体内脂肪代谢变化的分析 | 第82-83页 |
| ·持续黑暗对小鼠肝内脂肪代谢的变化 | 第83页 |
| ·实验结果 | 第83-98页 |
| ·不同光照条件下血清中ATRA含量的变化 | 第83-85页 |
| ·环境光对肝脏脂肪代谢基因表达的影响 | 第85-87页 |
| ·ATRA对小鼠肝脏中mClps、mPlrp2表达影响的分析 | 第87-90页 |
| ·ATRA对胞外-5'核苷酸酶的表达和血清中5'-AMP含量影响 | 第90-93页 |
| ·腺苷受体对肝脏中mClps和mPlrp2表达的影响 | 第93-94页 |
| ·LD和DD条件下小鼠体内维生素A含量变化的分析 | 第94-96页 |
| ·LD和DD条件下小鼠体内脂肪代谢变化 | 第96页 |
| ·持续黑暗对小鼠肝内脂肪代谢的影响 | 第96-98页 |
| ·结果讨论 | 第98-100页 |
| ·参考文献 | 第100-107页 |
| 3 mClps、mPlrp2参与肝脏中维生素A酯水解 | 第107-134页 |
| ·实验材料 | 第108页 |
| ·实验仪器 | 第108页 |
| ·实验动物 | 第108页 |
| ·实验试剂 | 第108页 |
| ·实验方法 | 第108-112页 |
| ·肝星状细胞系HSC-T6细胞中RE含量分析 | 第108-109页 |
| ·血清中ATR含量分析 | 第109-110页 |
| ·基因表达分析 | 第110-112页 |
| ·HSC-T6细胞转染方案 | 第112页 |
| ·实验设计 | 第112-115页 |
| ·光波长和光照强度对肝脏中mPlrp2和mClps表达的影响 | 第112-113页 |
| ·喂饲VA-free食物对肝中mPlrp2和mClps表达的影响 | 第113-114页 |
| ·5'-甲硫腺苷对肝中mPlrp2和mClps的表达和血清中视黄醇含量的影响 | 第114页 |
| ·肝星状细胞HSC-T6中mPlrp2和mClps的表达情况 | 第114页 |
| ·5'-甲硫腺苷对HSC-T6中维生素A酯水解的影响 | 第114-115页 |
| ·SiRNA-Plrp2对HSC-T6中维生素A酯水解的影响 | 第115页 |
| ·实验结果 | 第115-128页 |
| ·弱光照激活肝脏中mPlrp2和mClps的表达 | 第116-117页 |
| ·喂饲VA-free食物激活肝中mPlrp2和mClps的表达 | 第117-119页 |
| ·甲硫腺苷抑制肝中mPlrp2和mClps的表达,并明显降低血清中视黄醇含量 | 第119-120页 |
| ·肝星状细胞HSC-T6特异性表达mPlrp2和mClps | 第120-121页 |
| ·5’-甲硫腺苷抑制HSC-T6中维生素A酯的水解 | 第121-122页 |
| ·SiRNA-Plrp2质粒的构建和结构 | 第122-125页 |
| ·SiRNA-Plrp2抑制HSC-T6中维生素A酯的水解 | 第125-128页 |
| ·结果讨论 | 第128-129页 |
| ·参考文献 | 第129-134页 |
| 4 S-腺苷蛋氨酸和S-腺苷高半胱氨酸的比例调控mPlrp2和mClps组织特异性表达 | 第134-152页 |
| ·实验材料 | 第134-135页 |
| ·实验仪器 | 第134-135页 |
| ·实验动物 | 第135页 |
| ·实验试剂 | 第135页 |
| ·实验方法 | 第135-138页 |
| ·组织中AdoMet和AhoHcy含量的测定 | 第135-136页 |
| ·组织中ATP、ADP、AMP含量的测定 | 第136页 |
| ·染色体免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第136-138页 |
| ·实验设计 | 第138-141页 |
| ·胰腺中mPlrp2和mClps的特异性表达与S-腺苷蛋氨酸和S-腺苷高半胱氨酸比例的关系分析 | 第138页 |
| ·光照对肝中S-腺苷蛋氨酸和S-腺苷高半胱氨酸的比例的影响 | 第138-139页 |
| ·分别注射ATRA和5'-AMP对肝中S-腺苷蛋氨酸和S-腺苷高半胱氨酸的比例的影响 | 第139-140页 |
| ·喂饲VA-free食物对小鼠肝脏中mPlrp2和mClps的启动子区域结合组蛋白H3K4三甲基化的影响 | 第140页 |
| ·抑制甲基化酶活对肝脏和星状细胞中mPlrp2和mClps表达的影响 | 第140-141页 |
| ·结果讨论 | 第141-149页 |
| ·胰腺中mPlrp2和mClps的特异性表达与S-腺苷蛋氨酸和S-腺苷高半胱氨酸的比例有关 | 第141-143页 |
| ·持续黑暗和弱光照提升肝中S-腺苷蛋氨酸和S-腺苷高半胱氨酸的比例 | 第143-145页 |
| ·分别注射ATRA和5'-AMP改变肝中S-腺苷蛋氨酸和S-腺苷高半胱氨酸的比例 | 第145-147页 |
| ·喂饲VA-free食物激活肝中肝中mPlrp2和mClps的表达与增加mPlrp2和mClps的启动子区域结合组蛋白H3K4三甲基化有关 | 第147页 |
| ·甲基化酶抑制剂抑制mPlrp2和mClps的表达 | 第147-149页 |
| ·结果讨论 | 第149-150页 |
| ·参考文献 | 第150-152页 |
| 5 S-腺苷蛋氨酸和SiRNA抑制肝脏mClps、mPlrp2的表达并改善肝纤维化 | 第152-178页 |
| ·实验材料 | 第153页 |
| ·实验仪器 | 第153页 |
| ·实验动物 | 第153页 |
| ·实验试剂 | 第153页 |
| ·实验方法 | 第153-159页 |
| ·血清中ATR含量分析 | 第153-154页 |
| ·免疫组化实验方案 | 第154-155页 |
| ·基因表达分析 | 第155-158页 |
| ·Masson's trichrome染色 | 第158-159页 |
| ·实验设计 | 第159-160页 |
| ·肝纤维化对肝脏mPlrp2和mClps的表达的影响 | 第159页 |
| ·mPlrp2和mClps的表达与肝星状细胞的激活的关系 | 第159页 |
| ·SiRNAplrp2对BDL导致的肝纤维化的治疗作用 | 第159-160页 |
| ·SAM对肝内mPlrp2和mClps表达和体内、外维生素A酯水解的影响 | 第160页 |
| ·BDL小鼠肝内mPlrp2启动子区域结合组蛋白H3K4三甲基化增加诱导mPlrp2表达 | 第160页 |
| ·实验结果 | 第160-171页 |
| ·肝纤维化激活肝脏mPlrp2和mClps的表达 | 第160-161页 |
| ·mPlrp2和mClps的表达随着星状细胞的激活而升高 | 第161-163页 |
| ·ShRNAplrp2改善BDL导致的肝纤维化 | 第163-165页 |
| ·SAM抑制肝内mPlrp2表达并减少体内、外维生素A酯水解 | 第165-170页 |
| ·BDL小鼠肝内mPlrp2启动子区域结合组蛋白H3K4三甲基化增加诱导mPlrp2表达 | 第170-171页 |
| ·结果讨论 | 第171-174页 |
| ·参考文献 | 第174-178页 |
| 全文总结 | 第178-180页 |
| 论文创新点 | 第180-181页 |
| 致谢 | 第181-182页 |
| 附录 攻读博士学位期间发表的论文和出版著作情况 | 第182页 |
