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强力霉素促进小鼠胸腺上皮细胞分泌IL-6及GM-CSF机制初步研究及抗PRD片段缺失的hFOXP3单抗的制备

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
第一部分 强力霉素通过NF-KB及MAPK/ERK通路促进小鼠胸腺上皮细胞分泌IL-6及GM-CSF机制的初步研究第14-42页
 第一章 绪论第14-20页
   ·Dox和其它四环素类药物的结构和抗菌机制第14-15页
   ·四环素及其衍生物的非抗生素作用第15-19页
     ·抑制肿瘤生长及其机制第15页
     ·对牙龈组织的作用及机制第15-16页
     ·对神经组织的保护作用及其机制第16-17页
     ·对骨代谢的影响及其机制第17-19页
   ·TCs的临床应用第19-20页
 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义第20-22页
   ·研究目的第20页
   ·研究方法第20-21页
   ·实验设计方案第21页
   ·研究意义第21-22页
 第三章 DOX促进MTEC1细胞分泌细胞因子的初步研究第22-41页
   ·材料与仪器第22-25页
     ·试剂第22页
     ·主要溶液的配制第22-24页
     ·主要仪器和耗材第24-25页
   ·方法第25-31页
     ·细胞培养第25页
     ·总RNA的提取和Real-time PCR分析第25-29页
     ·细胞总蛋白的提取和Western blot分析第29-31页
     ·细胞上清的收集并用ELISA进行测定第31页
     ·统计分析第31页
   ·结果第31-38页
     ·Dox在蛋白及mRNA水平均能促进IL-6和GM-CSF的表达第31-33页
     ·Dox增强了NF-κB信号通路第33-34页
     ·NF-κB磷酸化抑制剂BAY11-7082的抑制效应第34-36页
     ·MAPK/ERK信号通路对Dox作用的影响第36-38页
   ·讨论第38-41页
 第四章 结论及展望第41-42页
   ·结论第41页
   ·展望第41-42页
第二部分 人△PRD-HFOXP3蛋白的表达及单克隆抗体的制备与鉴定第42-64页
 第一章 绪论第42-45页
   ·调节性T细胞简介第42页
   ·FOXP3简介第42-45页
     ·人FOXP3结构分析第42-43页
     ·FOXP3的生物学功能第43-45页
 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义第45-47页
   ·研究目的、方法第45页
   ·实验方案的设计第45-46页
   ·本研究的意义第46-47页
 第三章 实验材料及实验方法第47-58页
   ·实验材料第47-48页
     ·试验菌株及质粒第47页
     ·细胞株第47页
     ·实验动物第47页
     ·主要试剂第47页
     ·主要溶液第47-48页
   ·方法第48-58页
     ·pET28a载体的酶切第48-49页
     ·目的基因△PRD的回收第49页
     ·pET28a-△PRD的构建第49-50页
     ·转化与鉴定第50-51页
     ·蛋白的诱导第51-52页
     ·目的蛋白的鉴定第52页
     ·细菌裂解第52页
     ·包涵体蛋白的纯化第52-53页
     ·抗原乳化第53页
     ·免疫小鼠第53页
     ·细胞融合第53-55页
     ·杂交瘤细胞筛选第55页
     ·杂交瘤细胞的克隆化第55-56页
     ·△PRD-hFOXP3 mAbs的鉴定第56-58页
 第四章 实验结果与讨论第58-63页
   ·结果第58-61页
     ·重组质粒pET28a-△PRD的构建及鉴定第58-59页
     ·人△PRD融合蛋白的诱导表达及Western blot鉴定第59-60页
     ·抗△PRD-hFOXP3杂交瘤细胞株的建立第60页
     ·mAb的生物学特性分析和鉴定第60-61页
   ·讨论第61-63页
 第五章 主要结论及展望第63-64页
   ·主要结论第63页
   ·展望第63-64页
参考文献第64-74页
致谢第74-76页
攻读硕士学位期间发表的文章第76页

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