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基于DNA纳米结构支架的高效基因修复体系

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 绪论第14-24页
    1.1 基因损伤的种类第14页
    1.2 基因修复及其种类第14-17页
        1.2.1 碱基切除修复(BER)第14-16页
        1.2.2 DNA错配修复第16页
        1.2.3 核苷酸切除修复第16-17页
        1.2.4 DNA修复的研究展望第17页
    1.3 DNA折纸技术第17-19页
        1.3.1 用于纳米加工的DNA折纸技术第17页
        1.3.2 用于生物传感器的DNA折纸技术第17-18页
        1.3.3 DNA折纸技术在药物递送的应用第18-19页
        1.3.4 DNA折纸传递效率和生物稳定性的提高第19页
    1.4 DNA折纸支架酶系统第19-21页
        1.4.1 DNA折纸支架酶系统的构建第19页
        1.4.2 支架酶系统对酶活性影响的参数因素第19-20页
        1.4.3 GOx-HRP系统阐述DNA支架上酶间距与取向因素的影响第20-21页
    1.5 8-羟基鸟嘌呤糖基化酶与嘌呤嘧啶核苷酸内切酶第21-23页
        1.5.1 8-羟基鸟嘌呤糖基化酶第21页
        1.5.2 损伤识别的三个阶段第21-22页
        1.5.3 嘌呤嘧啶核苷酸内切酶第22页
        1.5.4 嘌呤嘧啶核苷酸内切酶在BER途径中的作用第22-23页
    1.6 论文主要研究内容第23-24页
第二章 DNA折纸支架的合成与表征第24-34页
    2.1 实验研究目的和意义第24页
    2.2 实验材料及仪器第24-26页
        2.2.1 实验主要试剂第24-25页
        2.2.2 实验主要仪器第25-26页
        2.2.3 实验所用寡核苷酸序列第26页
    2.3 DNA折纸结构的设计理念第26-28页
        2.3.1 DNA寡核苷酸链溶液的配制第26-27页
        2.3.2 DNA折纸支架结构的设计理念第27-28页
    2.4 DNA折纸支架结构的合成第28-30页
        2.4.1 合成DNA折纸结构用缓冲溶液的配制第28页
        2.4.2 运用PCR工具合成DNA折纸结构第28-30页
    2.5 DNA折纸支架结构合成的的表征第30-31页
        2.5.1 非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳第30-31页
        2.5.2 原子力显微镜(AFM)第31页
    2.6 实验结果与讨论第31-33页
        2.6.1 聚丙烯酰氨凝胶电泳表征DNA支架合成第31-32页
        2.6.2 原子力显微镜(AFM)表征DNA支架合成第32-33页
    2.7 本章小结第33-34页
第三章 基于DNA支架结构的酶级联体系建立第34-48页
    3.1 实验研究目的和意义第34页
    3.2 实验材料及仪器第34-35页
        3.2.1 实验主要试剂第34-35页
        3.2.2 实验主要仪器第35页
        3.2.3 实验所用寡核苷酸序列第35页
    3.3 交联剂SPDP连接酶与巯基修饰的寡核苷酸链第35-38页
        3.3.1 SPDP与酶通过赖氨酸相连第36页
        3.3.2 酶与带有巯基的核苷酸偶联第36页
        3.3.3 聚丙烯酰氨凝胶电泳表征酶连单链的合成第36-38页
    3.4 构建多酶系统于DNA折纸支架第38-40页
        3.4.1 酶连DNA支架操作步骤第38-39页
        3.4.2 酶级联系统中各物质浓度计算说明第39-40页
    3.5 酶连DNA支架的表征第40-46页
        3.5.1 聚丙烯酰氨凝胶电泳表征支架酶体系合成第40页
        3.5.2 不同浓度native PAGE的跑胶结果探索第40-42页
        3.5.3 不同电压native PAGE的跑胶结果探索第42-44页
        3.5.4 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱表征酶连支架第44-46页
    3.6 本章小结第46-48页
第四章 基于DNA支架的酶级联活性探究第48-62页
    4.1 实验研究目的和意义第48页
    4.2 实验材料及仪器第48-50页
        4.2.1 实验主要试剂第48页
        4.2.2 实验主要仪器第48页
        4.2.3 实验所用寡核苷酸序列第48-49页
        4.2.4 实验所用DNA探针第49-50页
    4.3 系统中酶作用的检测第50-54页
        4.3.1 体系中酶发挥催化作用验证第50-52页
        4.3.2 基于DNA支架的酶级联活性探究第52-54页
    4.4 酶与寡核苷酸链比例对酶活性的影响第54-56页
    4.5 不同酶浓度对体系活性的影响第56-57页
    4.6 体系中DNA探针对实验结果的影响第57-60页
    4.7 本章小结第60-62页
第五章 结论与展望第62-64页
    5.1 结论第62页
    5.2 展望第62-64页
参考文献第64-68页
致谢第68-70页
研究成果及发表的学术论文第70-72页
作者和导师简介第72-73页
附件第73-74页

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