摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第14-24页 |
1.1 基因损伤的种类 | 第14页 |
1.2 基因修复及其种类 | 第14-17页 |
1.2.1 碱基切除修复(BER) | 第14-16页 |
1.2.2 DNA错配修复 | 第16页 |
1.2.3 核苷酸切除修复 | 第16-17页 |
1.2.4 DNA修复的研究展望 | 第17页 |
1.3 DNA折纸技术 | 第17-19页 |
1.3.1 用于纳米加工的DNA折纸技术 | 第17页 |
1.3.2 用于生物传感器的DNA折纸技术 | 第17-18页 |
1.3.3 DNA折纸技术在药物递送的应用 | 第18-19页 |
1.3.4 DNA折纸传递效率和生物稳定性的提高 | 第19页 |
1.4 DNA折纸支架酶系统 | 第19-21页 |
1.4.1 DNA折纸支架酶系统的构建 | 第19页 |
1.4.2 支架酶系统对酶活性影响的参数因素 | 第19-20页 |
1.4.3 GOx-HRP系统阐述DNA支架上酶间距与取向因素的影响 | 第20-21页 |
1.5 8-羟基鸟嘌呤糖基化酶与嘌呤嘧啶核苷酸内切酶 | 第21-23页 |
1.5.1 8-羟基鸟嘌呤糖基化酶 | 第21页 |
1.5.2 损伤识别的三个阶段 | 第21-22页 |
1.5.3 嘌呤嘧啶核苷酸内切酶 | 第22页 |
1.5.4 嘌呤嘧啶核苷酸内切酶在BER途径中的作用 | 第22-23页 |
1.6 论文主要研究内容 | 第23-24页 |
第二章 DNA折纸支架的合成与表征 | 第24-34页 |
2.1 实验研究目的和意义 | 第24页 |
2.2 实验材料及仪器 | 第24-26页 |
2.2.1 实验主要试剂 | 第24-25页 |
2.2.2 实验主要仪器 | 第25-26页 |
2.2.3 实验所用寡核苷酸序列 | 第26页 |
2.3 DNA折纸结构的设计理念 | 第26-28页 |
2.3.1 DNA寡核苷酸链溶液的配制 | 第26-27页 |
2.3.2 DNA折纸支架结构的设计理念 | 第27-28页 |
2.4 DNA折纸支架结构的合成 | 第28-30页 |
2.4.1 合成DNA折纸结构用缓冲溶液的配制 | 第28页 |
2.4.2 运用PCR工具合成DNA折纸结构 | 第28-30页 |
2.5 DNA折纸支架结构合成的的表征 | 第30-31页 |
2.5.1 非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳 | 第30-31页 |
2.5.2 原子力显微镜(AFM) | 第31页 |
2.6 实验结果与讨论 | 第31-33页 |
2.6.1 聚丙烯酰氨凝胶电泳表征DNA支架合成 | 第31-32页 |
2.6.2 原子力显微镜(AFM)表征DNA支架合成 | 第32-33页 |
2.7 本章小结 | 第33-34页 |
第三章 基于DNA支架结构的酶级联体系建立 | 第34-48页 |
3.1 实验研究目的和意义 | 第34页 |
3.2 实验材料及仪器 | 第34-35页 |
3.2.1 实验主要试剂 | 第34-35页 |
3.2.2 实验主要仪器 | 第35页 |
3.2.3 实验所用寡核苷酸序列 | 第35页 |
3.3 交联剂SPDP连接酶与巯基修饰的寡核苷酸链 | 第35-38页 |
3.3.1 SPDP与酶通过赖氨酸相连 | 第36页 |
3.3.2 酶与带有巯基的核苷酸偶联 | 第36页 |
3.3.3 聚丙烯酰氨凝胶电泳表征酶连单链的合成 | 第36-38页 |
3.4 构建多酶系统于DNA折纸支架 | 第38-40页 |
3.4.1 酶连DNA支架操作步骤 | 第38-39页 |
3.4.2 酶级联系统中各物质浓度计算说明 | 第39-40页 |
3.5 酶连DNA支架的表征 | 第40-46页 |
3.5.1 聚丙烯酰氨凝胶电泳表征支架酶体系合成 | 第40页 |
3.5.2 不同浓度native PAGE的跑胶结果探索 | 第40-42页 |
3.5.3 不同电压native PAGE的跑胶结果探索 | 第42-44页 |
3.5.4 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱表征酶连支架 | 第44-46页 |
3.6 本章小结 | 第46-48页 |
第四章 基于DNA支架的酶级联活性探究 | 第48-62页 |
4.1 实验研究目的和意义 | 第48页 |
4.2 实验材料及仪器 | 第48-50页 |
4.2.1 实验主要试剂 | 第48页 |
4.2.2 实验主要仪器 | 第48页 |
4.2.3 实验所用寡核苷酸序列 | 第48-49页 |
4.2.4 实验所用DNA探针 | 第49-50页 |
4.3 系统中酶作用的检测 | 第50-54页 |
4.3.1 体系中酶发挥催化作用验证 | 第50-52页 |
4.3.2 基于DNA支架的酶级联活性探究 | 第52-54页 |
4.4 酶与寡核苷酸链比例对酶活性的影响 | 第54-56页 |
4.5 不同酶浓度对体系活性的影响 | 第56-57页 |
4.6 体系中DNA探针对实验结果的影响 | 第57-60页 |
4.7 本章小结 | 第60-62页 |
第五章 结论与展望 | 第62-64页 |
5.1 结论 | 第62页 |
5.2 展望 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
研究成果及发表的学术论文 | 第70-72页 |
作者和导师简介 | 第72-73页 |
附件 | 第73-74页 |