中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第11-17页 |
1 柑桔木虱 | 第11-14页 |
1.1 柑桔木虱的危害与生物学特性 | 第11-12页 |
1.2 柑桔木虱传播柑桔黄龙病 | 第12-13页 |
1.3 柑桔木虱行为学研究 | 第13页 |
1.4 柑桔木虱的防治 | 第13-14页 |
2 昆虫嗅觉受体 | 第14-17页 |
2.1 昆虫嗅觉识别过程 | 第14-15页 |
2.2 昆虫嗅觉受体的鉴定和特性 | 第15-16页 |
2.3 昆虫嗅觉受体的功能 | 第16-17页 |
引言 | 第17-19页 |
第二章 柑桔木虱嗅觉受体基因表达模式解析 | 第19-29页 |
1 材料与方法 | 第19-24页 |
1.1 供试虫源 | 第19-20页 |
1.2 主要试剂 | 第20页 |
1.3 主要仪器 | 第20页 |
1.4 样品准备 | 第20-21页 |
1.5 总RNA提取 | 第21页 |
1.6 去除基因组DNA | 第21页 |
1.7 第一链cDNA的合成 | 第21-22页 |
1.8 实时荧光定量PCR | 第22-24页 |
2 结果与分析 | 第24-27页 |
2.1 柑桔木虱感受月桂烯和丁酸乙酯的嗅觉受体DcitORs的初步鉴定 | 第24-26页 |
2.2 柑桔木虱嗅觉受体DcitORs在不同发育阶段的表达模式 | 第26-27页 |
3 讨论 | 第27-29页 |
第三章 柑桔木虱嗅觉受体基因DcitOR18和DcitOrco的cDNA克隆 | 第29-37页 |
1 材料与方法 | 第29-32页 |
1.1 供试虫源 | 第29页 |
1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
1.3 主要仪器 | 第30页 |
1.4 引物设计与合成 | 第30页 |
1.5 总RNA提取和基因组DNA去除 | 第30页 |
1.6 第一链cDNA的合成 | 第30页 |
1.7 PCR扩增 | 第30-31页 |
1.8 克隆和测序 | 第31页 |
1.9 柑桔木虱DcitOrco序列比对及系统发育分析 | 第31-32页 |
2 结果与分析 | 第32-36页 |
2.1 柑桔木虱嗅觉受体pGEM-T-DcitOrco和pGEM-T-DcitOR18重组质粒的构建 | 第32-33页 |
2.2 柑桔木虱嗅觉受体DcitOrco和DcitOR18基因cDNA克隆及序列分析 | 第33-35页 |
2.3 柑桔木虱嗅觉受体DcitOrco系统发育分析 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-37页 |
第四章 柑桔木虱嗅觉受体DcitOR18和DcitOrco的异源表达及功能验证 | 第37-53页 |
1 材料与方法 | 第37-44页 |
1.1 主要试剂 | 第37-38页 |
1.2 主要仪器 | 第38页 |
1.3 重组表达质粒pcDNA3.1(+)-DmelORx的构建 | 第38-39页 |
1.4 重组质粒pcDNA3.1(+)-mcherry的构建 | 第39-41页 |
1.5 重组表达质粒pcDNA3.1m(+)-DcitORs的构建 | 第41页 |
1.6 HEK293细胞的培养与转染 | 第41-42页 |
1.7 钙离子成像 | 第42页 |
1.8 HEK293稳定表达DcitOrco的筛选 | 第42-44页 |
2 结果与分析 | 第44-51页 |
2.1 果蝇嗅觉受体pcDNA3.1(+)-DmelOR22a和pcDNA3.1(+)-DmelOrco重组质粒的构建 | 第44-45页 |
2.2 果蝇嗅觉受体DmelOR22a和DmelOrco的异源表达及功能测定 | 第45-46页 |
2.3 pcDNA3.1(+)-mcherry重组质粒的构建 | 第46-47页 |
2.4 pcDNA3.1m(+)-DcitOR18和pcDNA3.1m(+)-DcitOrco重组质粒的构建 | 第47-48页 |
2.5 柑桔木虱嗅觉受体DcitOR18和DcitOrco的异源表达 | 第48-50页 |
2.6 HEK293细胞稳定表达DcitOrco株系的构建 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
第五章 主要结果、结论与研究展望 | 第53-55页 |
1 主要结果与结论 | 第53-54页 |
1.1 解析了柑桔木虱嗅觉受体基因表达模式 | 第53页 |
1.2 克隆获得了柑桔木虱嗅觉受体DcitOR18和DcitOrco基因的cDNA序列 | 第53页 |
1.3 实现了柑桔木虱嗅觉受体DcitOR18和DcitOrco的异源表达 | 第53-54页 |
2 研究展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-65页 |
在读期间发表的论文 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |