| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 烟草花叶病毒病的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.1 烟草花叶病毒病的发现与进展 | 第12页 |
| 1.1.2 烟草花叶病毒的生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.1.3 烟草花叶病毒的致病性研究 | 第13页 |
| 1.2 植物抗病毒分子机制 | 第13-16页 |
| 1.2.1 植物抗病基因介导的抗病毒机制 | 第13-15页 |
| 1.2.2 基因沉默介导的抗病毒机制 | 第15-16页 |
| 1.3 植物HIN1研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 植物激素调控途径研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4.1 激素相关基因的相互作用 | 第17-18页 |
| 1.4.2 激素调控网络及其的环境应答 | 第18页 |
| 1.5 研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 第二章 HIN1基因的克隆和表达特征分析 | 第20-32页 |
| 2.1 试验材料及试剂 | 第20页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-27页 |
| 2.2.1 植株的培养 | 第20-21页 |
| 2.2.2 植株总RNA的提取及cDNA的合成 | 第21页 |
| 2.2.3 烟草及相关茄科植株Hin1基因的克隆 | 第21-24页 |
| 2.2.4 NtHIN1蛋白的生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.2.5 NtHin1基因的亚细胞定位及组织表达模式 | 第24-27页 |
| 2.2.5.1 表达载体的构建 | 第24-25页 |
| 2.2.5.2 农杆菌转化及接种 | 第25页 |
| 2.2.5.3 亚细胞定位的观察 | 第25-26页 |
| 2.2.5.4 NtHin1基因的组织差异性表达 | 第26页 |
| 2.2.5.5 实时荧光定量PCR | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-30页 |
| 2.3.1 RNA的提取 | 第27页 |
| 2.3.2 RT-PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2.3.3 烟草NtHinl基因序列同源性分析 | 第28-29页 |
| 2.3.4 烟草NtHIN1蛋白生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.3.5 NtHIN1的亚细胞定位分析 | 第29-30页 |
| 2.3.6 NtHin1基因的组织表达模式分析 | 第30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 同源表达NTHIN1蛋白对TMV的抑制作用 | 第32-42页 |
| 3.1 试验材料及试剂 | 第32页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 3.2.1 植物表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 3.2.2 同源瞬时表达NtHIN1及抗病毒试验 | 第33-34页 |
| 3.2.2.1 本氏烟总蛋白及WesternBlot验证 | 第33页 |
| 3.2.2.2 间接ELISA检测TMV含量 | 第33-34页 |
| 3.2.3 烟草遗传转化及阳性检测 | 第34-35页 |
| 3.2.4 T_0代遗传转化植株抗病毒试验 | 第35页 |
| 3.2.5 T_1代遗传转化植株抗病毒试验 | 第35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-40页 |
| 3.3.1 植物表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.3.2 同源瞬时表达NtHIN1对TMV的抗性 | 第36-37页 |
| 3.3.3 烟草遗传转化及阳性检测 | 第37-38页 |
| 3.3.4 T_0代遗传转化植株对TMV的抗性 | 第38-39页 |
| 3.3.5 T_1代遗传转化植株对TMV的抗性 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 基于转录组测序的NTHIN1抗性机理分析 | 第42-56页 |
| 4.1 试验材料及试剂 | 第42页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第42页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-44页 |
| 4.2.1 转录组测序试验 | 第42-43页 |
| 4.2.2 差异表达基因的验证试验 | 第43页 |
| 4.2.3 茉莉酸激素的响应试验 | 第43页 |
| 4.2.4 NtRAB11和NtHIN1的互作试验 | 第43-44页 |
| 4.3 结果与分析 | 第44-52页 |
| 4.3.1 转录组测序结果 | 第44-50页 |
| 4.3.2 差异表达基因的验证 | 第50-51页 |
| 4.3.3 茉莉酸对NtRab11和NtHin1的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.4 NtRAB11和NtHIN1的互作关系 | 第52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-56页 |
| 第五章 结论与展望 | 第56-58页 |
| 5.1 结论 | 第56页 |
| 5.2 展望 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 在学期间已发表和已录用论文及参加课题 | 第68页 |
