摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略语表 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-30页 |
1.1 亚硝酸盐概论 | 第15-19页 |
1.1.1 亚硝酸盐在水体的产生 | 第15-16页 |
1.1.2 亚硝酸盐在水体中的含量 | 第16页 |
1.1.3 亚硝酸盐的毒性效应 | 第16-18页 |
1.1.4 亚硝酸盐的致毒机制 | 第18-19页 |
1.2 鱼类的甲状腺系统 | 第19-25页 |
1.2.1 鱼类的甲状腺 | 第19-20页 |
1.2.2 鱼类的甲状腺激素 | 第20-22页 |
1.2.3 鱼类的脱碘酶 | 第22-25页 |
1.3 环境污染物对鱼类甲状腺内分泌系统的影响 | 第25-28页 |
1.3.1 干扰HPT轴的激素分泌 | 第26页 |
1.3.2 干扰THs的合成 | 第26页 |
1.3.3 干扰THs的转运 | 第26页 |
1.3.4 干扰THs的转化与代谢 | 第26-27页 |
1.3.5 干扰TRs的结合与表达 | 第27-28页 |
1.4 本论文的研究目的、意义和研究内容 | 第28-30页 |
1.4.1 研究目的和意义 | 第28页 |
1.4.2 研究内容 | 第28-30页 |
第二章 亚硝酸盐对草鱼甲状腺激素代谢的急性毒性效应 | 第30-66页 |
2.1 前言 | 第30-32页 |
2.2 材料与方法 | 第32-49页 |
2.2.1 主要试剂 | 第32-34页 |
2.2.2 草鱼的急性毒性实验设计 | 第34-35页 |
2.2.2.1 草鱼的饲养及实验的条件 | 第34-35页 |
2.2.2.2 暴露水体中亚硝酸盐含量的测定 | 第35页 |
2.2.3 草鱼甲状腺滤泡组织学结构观察 | 第35-38页 |
2.2.3.1 组织脱钙 | 第35-37页 |
2.2.3.2 组织包埋 | 第37页 |
2.2.3.3 组织切片 | 第37页 |
2.2.3.4 组织切片染色 | 第37-38页 |
2.2.4 草鱼血清中激素含量的测定 | 第38-40页 |
2.2.4.1 血清THs含量的测定 | 第38-39页 |
2.2.4.2 T_3/T_4值的计算 | 第39页 |
2.2.4.3 血清TSH含量的测定 | 第39-40页 |
2.2.5 草鱼脱碘酶活性的测定 | 第40-42页 |
2.2.5.1 组织匀浆液的制备 | 第40-41页 |
2.2.5.2 组织匀浆液蛋白含量的测定 | 第41页 |
2.2.5.3 脱碘酶活性的测定 | 第41-42页 |
2.2.6 草鱼甲状腺系统相关基因表达的测定 | 第42-48页 |
2.2.6.1 RNA的提取及反转录 | 第42-44页 |
2.2.6.2 引物设计及合成 | 第44-45页 |
2.2.6.3 PCR反应体系及条件 | 第45页 |
2.2.6.4 PCR产物的回收、连接和转化 | 第45-47页 |
2.2.6.5 荧光定量引物设计及合成 | 第47页 |
2.2.6.6 荧光定量PCR反应体系及条件 | 第47-48页 |
2.2.7 数据统计分析 | 第48-49页 |
2.3 结果 | 第49-62页 |
2.3.1 亚硝酸盐急性暴露的草鱼死亡率 | 第49页 |
2.3.2 急性亚硝酸盐暴露对甲状腺组织结构的影响 | 第49-50页 |
2.3.3 急性亚硝酸盐暴露对血清激素水平的影响 | 第50-54页 |
2.3.3.1 血清TSH水平 | 第50页 |
2.3.3.2 血清THs水平 | 第50-54页 |
2.3.3.3 血清T_3/T_4值 | 第54页 |
2.3.4 急性亚硝酸盐暴露对组织IDs活性的影响 | 第54-55页 |
2.3.5 急性亚硝酸盐暴露对甲状腺相关基因表达的影响 | 第55-62页 |
2.3.5.1 crh和tshβ表达水平 | 第55-58页 |
2.3.5.2 ids、ttr、tr-α和tr-β基因表达水平 | 第58-62页 |
2.4 讨论 | 第62-66页 |
第三章 亚硝酸盐对草鱼甲状腺激素代谢的慢性毒性效应 | 第66-90页 |
3.1 前言 | 第66-68页 |
3.2 材料与方法 | 第68-71页 |
3.2.1 主要试剂 | 第68页 |
3.2.2 草鱼的慢性毒性实验设计 | 第68-69页 |
3.2.2.1 草鱼的饲养及实验的条件 | 第68-69页 |
3.2.2.2 暴露水体中亚硝酸盐含量的测定 | 第69页 |
3.2.3 草鱼甲状腺滤泡结构切片的观察 | 第69页 |
3.2.4 草鱼血清中激素含量的测定 | 第69页 |
3.2.5 草鱼脱碘酶活性的测定 | 第69页 |
3.2.6 草鱼甲状腺系统相关基因表达的测定 | 第69页 |
3.2.7 数据统计分析 | 第69-71页 |
3.3 结果 | 第71-86页 |
3.3.1 草鱼亚硝酸盐暴露的死亡率 | 第71页 |
3.3.2 慢性亚硝酸盐暴露对草鱼甲状腺组织结构的影响 | 第71-73页 |
3.3.3 慢性亚硝酸盐暴露对草鱼血清激素水平的影响 | 第73-78页 |
3.3.3.1 血清TSH水平 | 第73-74页 |
3.3.3.2 血清THs水平 | 第74-78页 |
3.3.3.3 T_3/T_4值 | 第78页 |
3.3.4 慢性亚硝酸盐暴露对组织IDs活性的影响 | 第78-81页 |
3.3.5 慢性亚硝酸盐暴露对草鱼甲状腺相关基因表达的影响 | 第81-86页 |
3.3.5.1 crh和tshβ表达水平 | 第81页 |
3.3.5.2 ids、ttr、tr-α和tr-β基因表达水平 | 第81-86页 |
3.4 讨论 | 第86-90页 |
第四章 小结及展望 | 第90-93页 |
4.1 小结 | 第90-91页 |
4.2 展望 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-109页 |
发表论文及专利情况 | 第109-110页 |
致谢 | 第110-112页 |