| 中文摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩写词表 | 第12-17页 |
| 第1章 绪论 | 第17-33页 |
| 1.1 萜类化合物的分类和分布 | 第17-19页 |
| 1.2 植物萜类化合物的生物合成 | 第19-26页 |
| 1.2.1 甲羟戊酸(MVA)途径:基因、酶和亚细胞定位 | 第20-23页 |
| 1.2.2 2-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸(MEP)途径:基因、酶和亚细胞定位 | 第23-24页 |
| 1.2.3 MVA和MEP途径的异同 | 第24-26页 |
| 1.3 MEcDP是拟南芥MEP途径的关键中间产物 | 第26-28页 |
| 1.3.1 生物体对MEcDP的生物合成及代谢的调控 | 第26-27页 |
| 1.3.2 MEcDP是植物一种潜在信号转导分子 | 第27页 |
| 1.3.3 MEcDP流向MEP途径以外的生物合成途径 | 第27-28页 |
| 1.4 无水密度梯度分离技术 | 第28-29页 |
| 1.5 同位素动态标记法 | 第29-30页 |
| 1.6 立题依据、研究意义及主要研究内容 | 第30-33页 |
| 1.6.1 立题依据和研究意义 | 第30-31页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第31-33页 |
| 第2章 拟南芥ceh1突变体转录组生物信息学分析 | 第33-41页 |
| 2.1 数据来源 | 第33页 |
| 2.2 方法 | 第33-34页 |
| 2.2.1 数据处理与差异表达基因的筛选 | 第33页 |
| 2.2.2 差异基因功能富集分析 | 第33-34页 |
| 2.2.3 蛋白质互作网络的构建 | 第34页 |
| 2.3 结果 | 第34-38页 |
| 2.3.1 数据处理与差异表达基因的筛选 | 第34-35页 |
| 2.3.2 差异基因功能富集分析 | 第35-36页 |
| 2.3.3 差异基因互作网络 | 第36-38页 |
| 2.4 分析与讨论 | 第38-40页 |
| 2.5 小结 | 第40-41页 |
| 第3章 利用NAF分离技术分析拟南芥MEP途径代谢中间产物的细胞区室分布 | 第41-67页 |
| 3.1 材料 | 第41-42页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 3.1.2 试剂 | 第41页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
| 3.2 方法 | 第42-56页 |
| 3.2.1 利用无水密度梯度离心技术富集不同细胞区室的MEP途径中间产物 | 第42-45页 |
| 3.2.2 野生型拟南芥不同细胞区室中MEP途径代谢产物的测定 | 第45-46页 |
| 3.2.3 野生型拟南芥不同细胞区室标签化合物的测定 | 第46-48页 |
| 3.2.4 不同细胞区室标签酶的提取与检测 | 第48-55页 |
| 3.2.5 数据拟合 | 第55-56页 |
| 3.3 结果 | 第56-64页 |
| 3.3.1 利用无水密度梯度离心技术富集不同细胞区室的MEP途径中间产物 | 第56页 |
| 3.3.2 野生型拟南芥NAF样品的标签化合物及酶的提取及检测 | 第56-59页 |
| 3.3.3 野生型拟南芥NAF样品中MEP途径相关代谢产物的提取及检测 | 第59-61页 |
| 3.3.4 数据BestFit拟合 | 第61-64页 |
| 3.4 分析与讨论 | 第64-65页 |
| 3.5 小结 | 第65-67页 |
| 第4章 植物表达载体的构建及转基因拟南芥的筛选 | 第67-89页 |
| 4.1 材料 | 第67-69页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第67页 |
| 4.1.2 宿主菌株以及载体 | 第67页 |
| 4.1.3 酶及试剂 | 第67-68页 |
| 4.1.4 常用培养基及溶液配方 | 第68页 |
| 4.1.5 引物 | 第68-69页 |
| 4.1.6 主要仪器设备 | 第69页 |
| 4.2 方法 | 第69-81页 |
| 4.2.1 拟南芥RNA的提取和cDNA的合成 | 第69-71页 |
| 4.2.2 拟南芥HDS基因的扩增 | 第71页 |
| 4.2.3 PCR产物的回收 | 第71-72页 |
| 4.2.4 BP和LR反应构建表达载体pK7FWG2.0::HDS | 第72-75页 |
| 4.2.5 农杆菌转化 | 第75-76页 |
| 4.2.6 拟南芥的遗传转化 | 第76-77页 |
| 4.2.7 转基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第77-78页 |
| 4.2.8 过量表达HDS基因的拟南芥株系MEP代谢产物化学分析 | 第78-79页 |
| 4.2.9 Real Time PCR检测不同拟南芥品系HDS基因的转录水平 | 第79-81页 |
| 4.3 结果 | 第81-86页 |
| 4.3.1 拟南芥HDS基因cDNA全长序列的获得及其序列分析 | 第81页 |
| 4.3.2 拟南芥真核表达载体pK7FWG2.0::HDS的构建 | 第81-82页 |
| 4.3.3 过量表达HDS基因拟南芥的鉴定 | 第82-84页 |
| 4.3.4 过量表达HDS基因拟南芥MEP途径代谢产物的分析 | 第84-85页 |
| 4.3.5 Real Time PCR检测拟南芥的转录水平 | 第85-86页 |
| 4.4 分析与讨论 | 第86-87页 |
| 4.5 小结 | 第87-89页 |
| 第5章 拟南芥HDS基因对MEP途径的调控 | 第89-109页 |
| 5.1 材料 | 第89-90页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第89页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第89页 |
| 5.1.3 仪器 | 第89-90页 |
| 5.2 方法 | 第90-94页 |
| 5.2.1 植物培养条件 | 第90页 |
| 5.2.2 气体交换和动态标记系统 | 第90-91页 |
| 5.2.3 MEP途径代谢产物~(13)C掺入的测定 | 第91-92页 |
| 5.2.4 利用~(13)C标记的方法检测计算拟南芥MEP途径的代谢通量 | 第92-94页 |
| 5.2.5 拟南芥色素的化学分析 | 第94页 |
| 5.3 结果与分析 | 第94-106页 |
| 5.3.1 拟南芥DXP的代谢库的研究 | 第94-100页 |
| 5.3.2 不同拟南芥品系MEcDP代谢库的研究 | 第100-103页 |
| 5.3.3 不同品系拟南芥色素分析 | 第103-106页 |
| 5.4 分析与讨论 | 第106-107页 |
| 5.5 小结 | 第107-109页 |
| 第6章 结论与创新点 | 第109-111页 |
| 6.1 结论 | 第109-110页 |
| 6.2 创新点 | 第110页 |
| 6.3 展望 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-121页 |
| 附录 | 第121-125页 |
| 作者简介及在学期间科研成果 | 第125-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
