| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-36页 |
| 1.1 生物传感器概况 | 第11页 |
| 1.2 信号放大技术在生物传感器中的应用 | 第11-17页 |
| 1.2.1 酶辅助靶标循环放大在生物传感器中的应用 | 第11-16页 |
| 1.2.1.1 T7外切酶辅助循环放大在生物传感器中的应用 | 第12-13页 |
| 1.2.1.2 外切酶Ⅲ辅助循环放大在生物传感器中的应用 | 第13-14页 |
| 1.2.1.3 λ外切酶辅助循环放大在生物传感器中的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.1.4 限制性内切酶辅助循环放大在生物传感器中的应用 | 第15页 |
| 1.2.1.5 双链特异性核酸酶辅助循环放大在生物传感器中的应用 | 第15-16页 |
| 1.2.2 链置换放大在生物传感器中的应用 | 第16页 |
| 1.2.3 杂交链放大在生物传感器中的应用 | 第16-17页 |
| 1.2.4 滚环放大方法和等温指数放大方法在生物传感器中的应用 | 第17页 |
| 1.3 氧化石墨烯(GO)在生物传感器中的应用 | 第17-20页 |
| 1.3.1 氧化石墨烯概况 | 第17-18页 |
| 1.3.2 氧化石墨烯在荧光生物传感器中的应用 | 第18页 |
| 1.3.3 氧化石墨烯在荧光偏振生物传感器中的应用 | 第18-20页 |
| 1.4 G-四链体在生物传感器中的应用 | 第20-23页 |
| 1.4.1 G-四链体概述 | 第20-21页 |
| 1.4.2 G-四链体作为DNAzyme在生物传感器中的应用 | 第21-22页 |
| 1.4.3 G-四链体结合小分子增强荧光在生物传感器中的应用 | 第22-23页 |
| 1.5 生物传感器在核酸检测的发展前景 | 第23页 |
| 1.6 本文的研究思路和内容 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-36页 |
| 第二章 基于T7外切酶辅助靶标循环放大及氧化石墨烯作为放大因子用于荧光偏振检测人免疫缺陷病毒(HIV)DNA | 第36-50页 |
| 2.1 前言 | 第36-37页 |
| 2.2 实验部分 | 第37-38页 |
| 2.2.1 材料和试剂 | 第37页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第37-38页 |
| 2.2.3 实验溶液配制 | 第38页 |
| 2.2.4 血清样品的预处理 | 第38页 |
| 2.2.5 荧光偏振分析 | 第38页 |
| 2.2.6 凝胶电泳实验 | 第38页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第38-45页 |
| 2.3.1 实验可行性分析 | 第38-40页 |
| 2.3.2 实验条件优化 | 第40-43页 |
| 2.3.2.1 优化T7外切酶的孵育温度 | 第40-41页 |
| 2.3.2.2 优化T7外切酶的用量 | 第41页 |
| 2.3.2.3 优化T7外切酶的孵育时间 | 第41-42页 |
| 2.3.2.4 优化氧化石墨烯(GO)的浓度和作用时间 | 第42-43页 |
| 2.3.3 检测性能分析 | 第43-44页 |
| 2.3.4 体系的选择性考察 | 第44-45页 |
| 2.3.5 复杂基质的分析应用 | 第45页 |
| 2.4 总结 | 第45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 第三章 基于T7外切酶辅助的二次循环放大及氧化石墨烯(GO)增强荧光偏振的生物传感器检测人免疫缺陷病毒(HIV DNA) | 第50-65页 |
| 3.1 前言 | 第50-51页 |
| 3.2 实验部分 | 第51-52页 |
| 3.2.1 材料和试剂 | 第51页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第51-52页 |
| 3.2.3 实验溶液配制 | 第52页 |
| 3.2.4 血清样品的预处理 | 第52页 |
| 3.2.5 荧光偏振分析 | 第52页 |
| 3.2.6 凝胶电泳实验 | 第52页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第52-60页 |
| 3.3.1 荧光偏振生物传感器的设计原理 | 第52-53页 |
| 3.3.2 检测HIV DNA的可行性分析 | 第53-55页 |
| 3.3.3 实验条件的优化 | 第55-58页 |
| 3.3.3.1 优化T7外切酶酶水解的反应温度 | 第55页 |
| 3.3.3.2 优化T7外切酶的用量 | 第55-56页 |
| 3.3.3.3 优化T7外切酶的水解反应时间 | 第56-57页 |
| 3.3.3.4 优化GO的用量和作用时间 | 第57-58页 |
| 3.3.4 检测性能分析 | 第58页 |
| 3.3.5 稳定性分析 | 第58-59页 |
| 3.3.6 选择性分析 | 第59页 |
| 3.3.7 实际样品应用 | 第59-60页 |
| 3.4 总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 第四章 基于外切酶Ⅲ和T4 DNA连接酶辅助的无标记荧光生物传感用于检测三磷酸腺苷(ATP) | 第65-82页 |
| 4.1 前言 | 第65-66页 |
| 4.2 实验部分 | 第66-68页 |
| 4.2.1 材料和试剂 | 第66页 |
| 4.2.2 实验设备 | 第66-67页 |
| 4.2.3 实验溶液配制 | 第67页 |
| 4.2.4 实际样品处理 | 第67页 |
| 4.2.5 靶标分子ATP的分析检测 | 第67页 |
| 4.2.6 圆二色谱(CD)测定 | 第67-68页 |
| 4.2.7 凝胶电泳实验 | 第68页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第68-78页 |
| 4.3.1 荧光生物传感器的设计原理 | 第68-69页 |
| 4.3.2 G-四链体的形成环境考察 | 第69-70页 |
| 4.3.3 荧光生物传感器的可行性分析 | 第70-71页 |
| 4.3.4 圆二色谱(CD)表征 | 第71-72页 |
| 4.3.5 条件优化 | 第72-76页 |
| 4.3.5.1 优化探针浓度 | 第72-73页 |
| 4.3.5.2 优化T4 DNA连接酶的用量 | 第73页 |
| 4.3.5.3 优化T4 DNA连接酶的孵育时间 | 第73-74页 |
| 4.3.5.4 优化外切酶Ⅲ的用量和孵育时间 | 第74-75页 |
| 4.3.5.5 优化NMM的浓度 | 第75-76页 |
| 4.3.6 检测性能考察 | 第76-77页 |
| 4.3.7 选择性及干扰性考察 | 第77-78页 |
| 4.3.8 ATP在不同环境中的考察 | 第78页 |
| 4.3.9 实际样品考察 | 第78页 |
| 4.4 总结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
| 攻读硕士学位期间所完成的论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
