摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 引言 | 第8-17页 |
1.1 血管平滑肌细胞与疾病 | 第8-12页 |
1.1.1 血管平滑肌细胞表型及转化 | 第8-9页 |
1.1.2 影响平滑肌细胞表型转化的因素 | 第9-11页 |
1.1.3 平滑肌细胞与血管疾病 | 第11-12页 |
1.2 血清反应因子(SRF)概述 | 第12-13页 |
1.3 micro RNAs概述 | 第13-16页 |
1.3.1 mi RNAs的生物合成与作用机制 | 第13-15页 |
1.3.2 mi R-181a/b在血管系统中的作用 | 第15页 |
1.3.3 mi RNAs功能相关研究方法 | 第15-16页 |
1.4 论文的目的和意义 | 第16-17页 |
第二章 实验材料与方法 | 第17-30页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 实验细胞 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-19页 |
2.1.3 实验仪器和设备 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-30页 |
2.2.1 细胞培养 | 第19-20页 |
2.2.2 PDGF诱导HAo SMCs向合成型转变 | 第20页 |
2.2.3 过表达SRF质粒构建 | 第20-21页 |
2.2.3.1 SRF基因片段的获得 | 第20-21页 |
2.2.3.2 重组质粒的构建和鉴定 | 第21页 |
2.2.4 细胞转染 | 第21-22页 |
2.2.5 mi RNA和基因表达检测 | 第22-27页 |
2.2.5.1 RNA提取 | 第22页 |
2.2.5.2 基因反转录及实时定量PCR | 第22-25页 |
2.2.5.3 mi RNA反转录及实时定量PCR | 第25-27页 |
2.2.6 Western blot | 第27-28页 |
2.2.7 CCK-8 细胞增殖检测 | 第28页 |
2.2.8 Transwell检测细胞迁移能力 | 第28页 |
2.2.9 双荧光素酶报告系统检测 | 第28页 |
2.2.10统计学分析 | 第28-30页 |
第三章 实验结果与分析 | 第30-43页 |
3.1 mi R-181a/b在增殖的平滑肌细胞中的表达 | 第30-31页 |
3.2 mi R-181a/b在平滑肌细胞中的功能 | 第31-36页 |
3.2.1 过表达mi R-181a/b对平滑肌细胞表型标记基因的影响 | 第31-33页 |
3.2.2 抑制mi R-181a/b对平滑肌细胞表型标记基因表达的影响 | 第33-34页 |
3.2.3 mi R-181a/b对平滑肌细胞迁移和增殖能力的影响 | 第34-36页 |
3.3 SRF在平滑肌细胞中的功能 | 第36-40页 |
3.3.1 过表达SRF对平滑肌细胞表型的影响 | 第36-38页 |
3.3.2 抑制SRF对平滑肌细胞表型的影响 | 第38-40页 |
3.4 mi R-181a/b靶向调控SRF | 第40-43页 |
3.4.1 双荧光素酶报告系统验证mi R-181a/b靶向SRF | 第40-41页 |
3.4.2 mi R-181a/b调控SRF的表达 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-45页 |
第五章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-54页 |
综述:mi RNAs与细胞通讯 | 第54-59页 |
综述参考文献 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
个人简介 | 第60页 |