摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
引言 | 第10-12页 |
1 文献综述 | 第12-29页 |
·转录辅激活因子AIB1概述 | 第12-20页 |
·AIBI的基本结构 | 第12-14页 |
·AIB1的翻译后修饰 | 第14-20页 |
·结语 | 第20页 |
·PIAS蛋白家族概述 | 第20-25页 |
·PIAS蛋白家族的结构 | 第21页 |
·PIAS的SUMO连接酶E3功能 | 第21-22页 |
·PIAS的构架蛋白功能 | 第22-25页 |
·形成基因转录复合物 | 第23-24页 |
·形成细胞信号通路复合物 | 第24-25页 |
·结语 | 第25页 |
·本论文的选题依据和研究内容 | 第25-29页 |
·选题依据 | 第25-26页 |
·研究内容 | 第26-29页 |
2 PIAS1抑制了AIB1的转录活性 | 第29-36页 |
·引言 | 第29页 |
·仪器与试剂 | 第29-31页 |
·仪器 | 第29-30页 |
·试剂 | 第30页 |
·质粒 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-32页 |
·细胞培养 | 第31页 |
·哺乳动物外源转染 | 第31页 |
·双荧光素酶报告基因检测 | 第31-32页 |
·结果与讨论 | 第32-35页 |
·PIAS1抑制了AIB1的转录活性 | 第32-34页 |
·PIAS1抑制AIB1转录活性具有一定的剂量依赖性 | 第34-35页 |
·小结 | 第35-36页 |
3 PIAS1与AIB1存在相互作用 | 第36-46页 |
·引言 | 第36页 |
·仪器与试剂 | 第36-39页 |
·仪器 | 第36-37页 |
·试剂 | 第37-39页 |
·质粒 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-42页 |
·细胞培养 | 第39页 |
·免疫共沉淀 | 第39页 |
·哺乳动物细胞外源转染 | 第39-40页 |
·Western blotting | 第40-41页 |
·考马斯亮蓝法测蛋白浓度 | 第41页 |
·免疫荧光实验 | 第41-42页 |
·结果与讨论 | 第42-44页 |
·在MCF-7细胞内PIAS1可与AIB1结合 | 第42页 |
·外源Myc-PIAS1和Flag-AIB1能在COS-7细胞内结合 | 第42-43页 |
·PIAS1和AIB1能在MCF-7细胞内共定位于细胞核 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-46页 |
4 PIAS1为AIB1的SUMO-1修饰连接酶E3 | 第46-50页 |
·引言 | 第46页 |
·仪器与试剂 | 第46页 |
·仪器 | 第46页 |
·试剂 | 第46页 |
·质粒 | 第46页 |
·实验方法 | 第46页 |
·结果与讨论 | 第46-49页 |
·PIAS1促进了AIB1的SUMO-1修饰 | 第46-47页 |
·PIAS1抑制AIB1转录活性依赖于SUMO连接酶E3活性 | 第47-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
5 PIAS1增强AIB1稳定性和削弱其与ERα的相互作用 | 第50-54页 |
·引言 | 第50页 |
·仪器与试剂 | 第50页 |
·仪器 | 第50页 |
·试剂 | 第50页 |
·质粒 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-51页 |
·细胞培养 | 第50-51页 |
·免疫共沉淀 | 第51页 |
·Western blotting | 第51页 |
·考马斯亮蓝法测蛋白浓度 | 第51页 |
·结果与讨论 | 第51-53页 |
·PIAS1增强了AIB1的稳定性 | 第51-52页 |
·PIAS1削弱了AIB1与ERα间的相互作用 | 第52-53页 |
·小结 | 第53-54页 |
讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-66页 |