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PIAS1作为AIB1 SUMO化修饰连接酶E3的鉴定及相关功能性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
引言第10-12页
1 文献综述第12-29页
   ·转录辅激活因子AIB1概述第12-20页
     ·AIBI的基本结构第12-14页
     ·AIB1的翻译后修饰第14-20页
     ·结语第20页
   ·PIAS蛋白家族概述第20-25页
     ·PIAS蛋白家族的结构第21页
     ·PIAS的SUMO连接酶E3功能第21-22页
     ·PIAS的构架蛋白功能第22-25页
       ·形成基因转录复合物第23-24页
       ·形成细胞信号通路复合物第24-25页
     ·结语第25页
   ·本论文的选题依据和研究内容第25-29页
     ·选题依据第25-26页
     ·研究内容第26-29页
2 PIAS1抑制了AIB1的转录活性第29-36页
   ·引言第29页
   ·仪器与试剂第29-31页
     ·仪器第29-30页
     ·试剂第30页
     ·质粒第30-31页
   ·实验方法第31-32页
     ·细胞培养第31页
     ·哺乳动物外源转染第31页
     ·双荧光素酶报告基因检测第31-32页
   ·结果与讨论第32-35页
     ·PIAS1抑制了AIB1的转录活性第32-34页
     ·PIAS1抑制AIB1转录活性具有一定的剂量依赖性第34-35页
   ·小结第35-36页
3 PIAS1与AIB1存在相互作用第36-46页
   ·引言第36页
   ·仪器与试剂第36-39页
     ·仪器第36-37页
     ·试剂第37-39页
     ·质粒第39页
   ·实验方法第39-42页
     ·细胞培养第39页
     ·免疫共沉淀第39页
     ·哺乳动物细胞外源转染第39-40页
     ·Western blotting第40-41页
     ·考马斯亮蓝法测蛋白浓度第41页
     ·免疫荧光实验第41-42页
   ·结果与讨论第42-44页
     ·在MCF-7细胞内PIAS1可与AIB1结合第42页
     ·外源Myc-PIAS1和Flag-AIB1能在COS-7细胞内结合第42-43页
     ·PIAS1和AIB1能在MCF-7细胞内共定位于细胞核第43-44页
   ·小结第44-46页
4 PIAS1为AIB1的SUMO-1修饰连接酶E3第46-50页
   ·引言第46页
   ·仪器与试剂第46页
     ·仪器第46页
     ·试剂第46页
     ·质粒第46页
   ·实验方法第46页
   ·结果与讨论第46-49页
     ·PIAS1促进了AIB1的SUMO-1修饰第46-47页
     ·PIAS1抑制AIB1转录活性依赖于SUMO连接酶E3活性第47-49页
   ·小结第49-50页
5 PIAS1增强AIB1稳定性和削弱其与ERα的相互作用第50-54页
   ·引言第50页
   ·仪器与试剂第50页
     ·仪器第50页
     ·试剂第50页
     ·质粒第50页
   ·实验方法第50-51页
     ·细胞培养第50-51页
     ·免疫共沉淀第51页
     ·Western blotting第51页
     ·考马斯亮蓝法测蛋白浓度第51页
   ·结果与讨论第51-53页
     ·PIAS1增强了AIB1的稳定性第51-52页
     ·PIAS1削弱了AIB1与ERα间的相互作用第52-53页
   ·小结第53-54页
讨论第54-56页
参考文献第56-63页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第63-64页
致谢第64-66页

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