摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
前言 | 第13-16页 |
第一部分 害嗜鳞螨Ⅱ类变应原基因的原核表达及纯化 | 第16-40页 |
1. 研究内容 | 第16页 |
2. 材料与方法 | 第16-25页 |
2.1 质粒和引物 | 第16页 |
2.2 主要试剂 | 第16-18页 |
2.3 主要仪器设备 | 第18-20页 |
2.4 主要试剂配制 | 第20-25页 |
3. 实验方法 | 第25-34页 |
3.1 pET-28a(+)空质粒的提取 | 第25-26页 |
3.2 重组质粒的构建 | 第26-29页 |
3.3 重组蛋白Lep d2的小量诱导表达 | 第29页 |
3.4 Lepd2的SDS-PAGE | 第29-31页 |
3.5 大量诱导表达 | 第31页 |
3.6 Lep d2蛋白的纯化及浓缩 | 第31-32页 |
3.7 Lep d2的免疫印记(western blot)分析 | 第32-33页 |
3.8 Bradford’s法测定Lep d2蛋白浓度 | 第33-34页 |
4 结果 | 第34-38页 |
4.1 重组质粒pET-28a(+)-Lepd2的双酶切验证及测序 | 第34-35页 |
4.2 阳性菌的菌落PCR验证 | 第35-36页 |
4.3 Lep d2的表达、纯化和浓缩后的SDS-PAGE分析 | 第36页 |
4.4 Lep d2的免疫印迹(Western blot)鉴定 | 第36-37页 |
4.5 重组蛋白浓度测定 | 第37-38页 |
5 讨论 | 第38-40页 |
第二部分Lep d2对尘螨致敏小鼠模型的免疫治疗效果分析 | 第40-50页 |
1. 研究内容 | 第40页 |
2. 材料与方法 | 第40-44页 |
2.1 材料与试剂 | 第40-42页 |
2.2 实验方法 | 第42-44页 |
3. 结果 | 第44-47页 |
3.1 各组小鼠症状和体征的改变 | 第44页 |
3.2 BALF中特异性细胞因子水平 | 第44-45页 |
3.4 各组小鼠肺组织切片HE染色 | 第45-46页 |
3.5 脾细胞培养上清液抗原特异性细胞因子含量 | 第46页 |
3.6 血清特异性IgE(sIgE)、IgG2a含量 | 第46-47页 |
4. 讨论 | 第47-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
综述 | 第56-67页 |
参考文献 | 第63-67页 |
作者简介及读研期间主要科研成果 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |