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YAP负调控p21的表达影响软骨表型衰老的机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1.前言第9-15页
2.主要缩略词中英文对照第15-17页
3.实验材料和方法第17-36页
    3.1 实验材料第17-22页
        3.1.1 细胞及细胞培养第17页
        3.1.2 主要试剂第17-19页
        3.1.3 主要溶液及试剂的配置第19-20页
        3.1.4 主要仪器第20-22页
    3.2 实验方法第22-35页
        3.2.1 免疫组化与细胞免疫荧光第22-23页
        3.2.2 Westernblotting蛋白印记实验第23-25页
        3.2.3 细胞活性CCK-8实验第25页
        3.2.4 流式细胞学相关检测第25-26页
        3.2.5 克隆成形结晶紫染色第26-27页
        3.2.6 RNA干扰敲低实验第27-28页
        3.2.7 RNA的收集与提取第28页
        3.2.8 实时定量荧光PCR实验第28-29页
        3.2.9 细胞活性EdU实验第29-30页
        3.2.10 核质分离实验第30-31页
        3.2.11 质粒构建第31-32页
        3.2.12 DNA损伤彗星实验第32-33页
        3.2.13 构建慢病毒及建立稳定的shYAP细胞系第33-34页
        3.2.14 衰老染色实验第34页
        3.2.15 裸鼠成瘤实验第34-35页
    3.3 统计分析第35-36页
4.实验结果第36-60页
    4.1 软骨肉瘤的生长需要核YAP的表达第36-40页
    4.2 YAP/TEAD介导细胞周期阻滞并引起细胞衰老第40-47页
    4.3 敲低YAP引起的细胞生长抑制与体内p21的表达有关第47-49页
    4.4 YAP表达缺失参与DNA损伤并且与化疗敏感性相关第49-51页
    4.5 YAP通过非依赖p53和Sp1的方式调节p21的表达及其介导的细胞衰老第51-56页
    4.6 靶向致癌基因YAP和p21促进消除由治疗诱导的衰老细胞第56-60页
讨论第60-64页
参考文献第64-70页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第70页
研究生期间参加的学术会议第70-71页
致谢第71页

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