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Erbin反馈调控Akt-Skp2-p27通路影响肿瘤细胞增殖的研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略词表第12-13页
引言第13-17页
1 材料第17-19页
    1.1 实验细胞第17页
    1.2 实验试剂第17-18页
    1.3 表达载体及质粒第18页
    1.4 主要仪器设备第18-19页
2 方法第19-27页
    2.1 细胞的培养第19页
    2.2 siRNA干涉第19-20页
    2.3 质粒在细胞中的过表达第20页
    2.4 免疫印迹(Western Blot)检测第20-21页
    2.5 构建稳定亚克隆细胞系第21页
    2.6 免疫荧光(IF)第21-22页
    2.7 免疫共沉淀(Co-IP)第22页
    2.8 划痕试验第22页
    2.9 实时荧光定量核酸扩增检测系统(Q-PCR)第22-23页
    2.10 免疫组化第23页
    2.11 细胞增殖分析第23-24页
    2.12 细胞周期的同步化法第24-25页
    2.13 构建Skp2及其突变体真核表达载体第25-26页
    2.14 细胞集落形成第26页
    2.15 慢病毒感染第26页
    2.16 动物实验第26-27页
3 结果第27-41页
    3.1 Erbin丢失促进体内外肿瘤细胞的增殖能力第27-28页
    3.2 CKI分子p21和p27介导Erbin缺失对细胞的促增殖效应第28-30页
    3.3 Erbin调控p27特异性E3泛素酶Skp2蛋白稳定性第30-32页
    3.4 Erbin敲低不影响Skp2核-质定位改变第32-33页
    3.5 Akt激活不影响HeLa细胞Skp2细胞定位改变第33-34页
    3.6 Erbin调节Akt活性增强Skp2稳定及功能第34-36页
    3.7 Skp2调控Erbin表达第36-38页
    3.8 SCFSkp2在多种细胞中调控Erbin表达第38页
    3.9 Akt调控Erbin表达第38-40页
    3.10 Erbin丢失可能是Skp2获得癌基因功能的依赖方式第40-41页
4 讨论第41-45页
5 结论第45-47页
参考文献第47-49页
文献综述第49-57页
    参考文献第54-57页
致谢第57-59页
攻读学位期间发表的学术论文第59-60页

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