| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-19页 |
| 第一章 雌二醇诱导成骨前体细胞向成骨细胞方向分化 | 第19-41页 |
| 1.1 材料和试剂 | 第19-23页 |
| 1.1.1 实验仪器 | 第20页 |
| 1.1.2 实验试剂、耗材、试剂盒 | 第20-22页 |
| 1.1.3 主要试剂的配制 | 第22-23页 |
| 1.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 1.2.1 细胞培养实验 | 第23-25页 |
| 1.2.2 Western-blot检测蛋白表达 | 第25-26页 |
| 1.2.3 骨桥蛋白分泌的检测 | 第26-27页 |
| 1.2.4 碱性磷酸酶(ALP)活性的检测 | 第27页 |
| 1.2.5 Real-time PCR检测相关基因表达 | 第27-29页 |
| 1.2.6 统计分析 | 第29页 |
| 1.3. 结果 | 第29-37页 |
| 1.3.1 Western-blot检测17β-雌二醇处理MC3T3-E1细胞后的表达 | 第29-31页 |
| 1.3.2 ELISA检测不同浓度17β-雌二醇处理骨桥蛋白的分泌 | 第31-32页 |
| 1.3.3 碱性磷酸酶(ALP)活性的检测 | 第32-34页 |
| 1.3.4 Real-time PCR检测17β-雌二醇处理MC3T3-E1细胞后的表达 | 第34-37页 |
| 1.4 讨论 | 第37-40页 |
| 1.5 结论 | 第40-41页 |
| 第二章 细胞因子白细胞介素6,TGF-β在雌二醇诱导成骨前体细胞向成骨细胞方向分化中的作用研究 | 第41-64页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第41-45页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第41-42页 |
| 2.1.2 实验试剂、耗材、试剂盒 | 第42-43页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第43-45页 |
| 2.2. 实验方法 | 第45-48页 |
| 2.2.1 细胞培养实验方法见第一章 | 第45-46页 |
| 2.2.2 Western-blot检测蛋白表达 | 第46-47页 |
| 2.2.3 碱性磷酸酶(ALP)活性的检测 | 第47页 |
| 2.2.4 Real-time PCR检测相关基因表达 | 第47-48页 |
| 2.2.5 酶联免疫吸附法检测17β-雌二醇处理细胞白细胞介素6和TGF-β的分泌 | 第48页 |
| 2.3 结果 | 第48-58页 |
| 2.3.1 17β-雌二醇处理MC3T3-E1细胞后白细胞介素6和TGF-β的表达 | 第48-50页 |
| 2.3.2 ELISA检测17β-雌二醇处理后白细胞介素6和TGF-β的分泌 | 第50-52页 |
| 2.3.3 Western-blot检测17β-雌二醇与白细胞介素6或TGF-β处理MC3T3-E1细胞后骨相关因子的表达 | 第52-55页 |
| 2.3.4 Real-time PCR检测白细胞介素6或TGF-β处理后骨相关因子的表达 | 第55-56页 |
| 2.3.5 白细胞介素6和TGF-β处理MC3T3-E1后碱性磷酸酶活性的检测 | 第56-58页 |
| 2.4 讨论 | 第58-63页 |
| 2.5 结论 | 第63-64页 |
| 第三章 雌二醇通过ERs调控细胞因子白细胞介素6,TGF-β | 第64-89页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第65-70页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第65页 |
| 3.1.2 实验试剂、耗材、试剂盒 | 第65-70页 |
| 3.2. 实验方法 | 第70-80页 |
| 3.2.1 细胞培养实验方法见第一章 | 第70页 |
| 3.2.2 雌二醇受体ERs沉默载体构建 | 第70-75页 |
| 3.2.3 酶切鉴定小量制备的质粒DNA | 第75-76页 |
| 3.2.4 质粒的大量抽提 | 第76页 |
| 3.2.5 ERs RNAi载体筛选及病毒包装 | 第76-78页 |
| 3.2.6 Western-blot检测目的蛋白 | 第78页 |
| 3.2.7 碱性磷酸酶(ALP)活性的检测 | 第78页 |
| 3.2.8 Real-time PCR检测相关基因表达 | 第78-79页 |
| 3.2.9 酶联免疫吸附法检测白细胞介素6和TGF-β的分泌 | 第79页 |
| 3.2.10 ERs干扰经17β-雌二醇处理MC3T3-E1细胞后白细胞介素6和TGF-β的表达 | 第79-80页 |
| 3.3 结果 | 第80-85页 |
| 3.3.1 病毒包装及细胞感染 | 第80-81页 |
| 3.3.2 Western-blot检测ERs蛋白的干扰 | 第81-82页 |
| 3.3.3 ERs干扰经17β-雌二醇处理后白细胞介素6和TGF-β的表达 | 第82-84页 |
| 3.3.4 酶联免疫吸附法检测ERβ干扰经17β-雌二醇处理后白细胞介素6和TGF-β的分泌 | 第84-85页 |
| 3.4 讨论 | 第85-88页 |
| 3.5 结论 | 第88-89页 |
| 总结 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 综述 | 第100-124页 |
| 参考文献 | 第114-124页 |
| 攻读傅士学位期间主要研究成果 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
