| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略表 | 第13-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-43页 |
| 1.1 引言 | 第18-19页 |
| 1.2 内耳干细胞的基本特性及分布 | 第19-21页 |
| 1.3 内耳干细胞分化为内耳毛细胞的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 其它干细胞分化为毛细胞的研究进展 | 第22-24页 |
| 1.5 内耳干细胞分化为内耳毛细胞的分子机制 | 第24-31页 |
| 1.5.1 细胞周期蛋白抑制剂 | 第24-26页 |
| 1.5.2 Atohl | 第26-27页 |
| 1.5.3 Notch信号通路 | 第27-28页 |
| 1.5.4 内耳毛细胞的存活和成熟机制 | 第28-30页 |
| 1.5.5 内耳毛细胞发育过程中相关分子的相互作用 | 第30-31页 |
| 1.6 内耳中不同细胞特异性分子标志的研究进展 | 第31-32页 |
| 1.7 研究的目的、方法和意义 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-43页 |
| 第二章 新生小鼠内耳干细胞的分离、培养与鉴定 | 第43-57页 |
| 2.1 前言 | 第43-44页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第44-45页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第44页 |
| 2.2.2 主要实验试剂 | 第44页 |
| 2.2.3 常用仪器 | 第44-45页 |
| 2.2.4 常用试剂配置 | 第45页 |
| 2.3 试验方法 | 第45-50页 |
| 2.3.1 小鼠内耳耳蜗基底膜的分离 | 第45-46页 |
| 2.3.2 内耳干细胞的分离及培养 | 第46-47页 |
| 2.3.3 内耳干细胞的鉴定 | 第47-49页 |
| 2.3.4 内耳干细胞传代 | 第49-50页 |
| 2.3.5 统计学处理 | 第50页 |
| 2.4 实验结果 | 第50-53页 |
| 2.4.1 小鼠内耳干细胞的培养与传代 | 第50-51页 |
| 2.4.2 小鼠内耳干细胞标志基因检测 | 第51-52页 |
| 2.4.3 小鼠内耳干细胞Nestin检测 | 第52页 |
| 2.4.4 小鼠内耳干细胞Brdu检测 | 第52-53页 |
| 2.5 讨论 | 第53-54页 |
| 2.6 本章小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第三章 小鼠内耳干细胞体外诱导分化为毛细胞 | 第57-85页 |
| 3.1 前言 | 第57-58页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第58-61页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第58页 |
| 3.2.2 主要实验试剂 | 第58-59页 |
| 3.2.3 常用仪器 | 第59-60页 |
| 3.2.4 常用试剂配置 | 第60-61页 |
| 3.3 实验方法 | 第61-66页 |
| 3.3.1 内耳干细胞的分离与培养 | 第61页 |
| 3.3.2 鸡胚椭圆囊基质细胞的分离、培养与处理 | 第61-62页 |
| 3.3.3 小鼠内耳干细胞的诱导分化 | 第62-63页 |
| 3.3.4 不同发育阶段标志基因的检测 | 第63-64页 |
| 3.3.5 内耳祖细胞特异性蛋白检测 | 第64页 |
| 3.3.6 内耳毛细胞特异性蛋白的检测 | 第64-65页 |
| 3.3.7 扫描电子显微镜的检测 | 第65页 |
| 3.3.8 毛细胞电生理的检测 | 第65-66页 |
| 3.4 实验结果 | 第66-78页 |
| 3.4.1 内耳干细胞体外诱导分化的形态变化 | 第66-68页 |
| 3.4.2 内耳祖细胞Pax-2及Pax-8蛋白检测 | 第68页 |
| 3.4.3 内耳干细胞分化发育过程中基因的表达情况 | 第68-71页 |
| 3.4.4 内耳干细胞诱导分化之后的蛋白检测 | 第71-73页 |
| 3.4.5 毛细胞静纤毛与动纤毛的蛋白检测 | 第73-75页 |
| 3.4.6 毛细胞的电镜检测 | 第75-76页 |
| 3.4.7 毛细胞的电生理检测 | 第76-78页 |
| 3.5 讨论 | 第78-79页 |
| 3.6 本章小结 | 第79-82页 |
| 参考文献 | 第82-85页 |
| 第四章 毛细胞发育过程中特异性分子标志的筛选 | 第85-108页 |
| 4.1 前言 | 第85-86页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第86-88页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第86页 |
| 4.2.2 主要实验试剂 | 第86页 |
| 4.2.3 常用仪器 | 第86-87页 |
| 4.2.4 常用试剂配置 | 第87-88页 |
| 4.3 试验方法 | 第88-90页 |
| 4.3.1 内耳干细胞的分离、培养与诱导分化 | 第88页 |
| 4.3.2 内耳干细胞及内耳祖细胞RNA的准备 | 第88页 |
| 4.3.3 内耳毛细胞的流式分选 | 第88-89页 |
| 4.3.4 基因表达谱的检测 | 第89-90页 |
| 4.3.5 特异基因的筛选及验证 | 第90页 |
| 4.4 实验结果 | 第90-103页 |
| 4.4.1 内耳毛细胞的流式分选 | 第90-92页 |
| 4.4.2 内耳干细胞、祖细胞及毛细胞RNA的提取及质量检测 | 第92-93页 |
| 4.4.3 基因表达谱芯片检测 | 第93-98页 |
| 4.4.4 特异性标志基因的筛选 | 第98-102页 |
| 4.4.5 特异性标志基因的验证 | 第102-103页 |
| 4.5 讨论 | 第103-104页 |
| 4.6 本章小结 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-108页 |
| 第五章 结论与展望 | 第108-110页 |
| 附录 | 第110页 |
