致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
1 引言 | 第13-27页 |
1.1 间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs) | 第13-17页 |
1.1.1 MSCs的定义及鉴定 | 第13页 |
1.1.2 MSCs在临床疾病上的应用 | 第13-17页 |
1.1.2.1 MSCs在肿瘤治疗中的应用 | 第14-15页 |
1.1.2.2 MSCs在急性移植物抗宿主疾病中的应用 | 第15页 |
1.1.2.3 MSCs在神经退行性疾病中的应用 | 第15-17页 |
1.2 肺癌的研究现状 | 第17-27页 |
1.2.1 肺癌的组织学分类 | 第17-18页 |
1.2.2 NSCLC的发病机制 | 第18-19页 |
1.2.3 NSCLC的传统治疗方法 | 第19-21页 |
1.2.4 NSCLC的其它治疗方法 | 第21-27页 |
1.2.4.1 基于抗血管生成的肿瘤治疗策略在NSCLC治疗中的应用 | 第21-22页 |
1.2.4.2 靶向蛋白质翻译过程的肿瘤治疗策略在NSCLC治疗中的应用 | 第22-23页 |
1.2.4.3 免疫疗法在NSCLC治疗中的应用 | 第23-24页 |
1.2.4.4 干细胞疗法在NSCLC治疗中的应用 | 第24-27页 |
2 实验材料 | 第27-33页 |
2.1 细胞株及细胞培养基 | 第27页 |
2.1.1 细胞株 | 第27页 |
2.1.2 细胞培养基 | 第27页 |
2.2 主要试剂 | 第27-28页 |
2.3 主要实验仪器 | 第28-29页 |
2.4 主要实验耗材 | 第29-30页 |
2.5 主要溶液的配制 | 第30-33页 |
2.5.1 细胞实验主要溶液配制 | 第30-31页 |
2.5.2 蛋白质免疫印迹相关试剂配制 | 第31-33页 |
3 实验方法 | 第33-47页 |
3.1 骨髓来源MSCs培养方法 | 第33-34页 |
3.1.1 BM-MSCs的复苏 | 第33页 |
3.1.2 BM-MSCs的传代 | 第33-34页 |
3.1.3 MSCs的冻存 | 第34页 |
3.2 NSCLC细胞和人胚肾细胞HEK293的培养方法 | 第34-36页 |
3.2.1 NSCLC细胞(A549/ H460/MES)和人胚肾细胞(HEK293)的复苏 | 第34-35页 |
3.2.2 NSCLC细胞(A549/H460/MES)和人胚肾细胞(HEK293)的传代 | 第35页 |
3.2.3 NSCLC细胞(A549/H460/MES)或人胚肾细胞(HEK293)的冻存 | 第35-36页 |
3.3 条件培养基(Conditional Medium,CM)的收集 | 第36-37页 |
3.3.1 MSCs CM的收集 | 第36-37页 |
3.3.2 NSCLC细胞(A549/H460/MES)和HEK293细胞CM的收集 | 第37页 |
3.4 MSCs向NSCLC细胞迁移能力的检测 | 第37-38页 |
3.5 MSCs对NSCLC细胞增殖能力的影响 | 第38-40页 |
3.5.1 MSCs与NSCLC细胞共培养 | 第38-39页 |
3.5.2 MSCs CM培养NSCLC细胞 | 第39-40页 |
3.6 MSCs对NSCLC细胞迁移能力的影响 | 第40页 |
3.7 MAPK/eIF4E信号通路相关蛋白表达水平的检测 | 第40-44页 |
3.7.1 细胞总蛋白的提取 | 第40-41页 |
3.7.2 BCA试剂盒测细胞总蛋白的浓度 | 第41页 |
3.7.3 Western blot检测 | 第41-44页 |
3.8 人源VEGF165蛋白及其中和抗体对NSCLC细胞增殖能力的影响 | 第44-45页 |
3.8.1 人源VEGF165蛋白对NSCLC细胞增殖能力的影响 | 第44页 |
3.8.2 VEGF中和抗体对NSCLC细胞增殖能力的影响 | 第44-45页 |
3.9 人源VEGF165蛋白及其中和抗体对NSCLC细胞迁移能力的影响 | 第45-47页 |
4 结果 | 第47-63页 |
4.1 BM-MSCs具有向NSCLC细胞归巢的能力 | 第47-48页 |
4.2 BM-MSCs对NSCLC细胞的增殖能力具有显著抑制作用 | 第48-52页 |
4.3 BM-MSCs对NSCLC细胞迁移能力具有显著抑制作用 | 第52-54页 |
4.4 BM-MSCs对NSCLC细胞抑制作用的机制 | 第54-57页 |
4.4.1 BM-MSCs通过下调MAPK/eIF4E信号通路抑制NSCLC细胞的增殖与迁移 | 第54-55页 |
4.4.2 BM-MSCs来源的VEGF对MAPK/eIF4E信号通路的调控 | 第55-57页 |
4.5 人源VEGF165蛋白对NSCLC细胞的影响 | 第57-63页 |
4.5.1 人源VEGF165蛋白抑制NSCLC细胞的增殖能力 | 第58-60页 |
4.5.2 人源VEGF165蛋白对NSCLC细胞迁移能力的影响 | 第60-63页 |
5 讨论 | 第63-69页 |
6 结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
附录A 英文缩略词表 | 第79-81页 |
作者简介 | 第81-85页 |
学位论文数据集 | 第85页 |