摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-23页 |
1. 热激蛋白概述 | 第11-12页 |
·热激蛋白的发现 | 第11页 |
·热激蛋白的种类及分布 | 第11-12页 |
·热激蛋白的特点 | 第12页 |
·smHSPs | 第12页 |
2. 内质网分子伴侣与未折叠蛋白应答 | 第12-21页 |
·内质网分子伴侣 | 第12-15页 |
·GRP78 (BiP) | 第13页 |
·类凝集素分子伴侣(Calnexin 和Calreticulin) | 第13-14页 |
·PDI(protein disulfide isomerases) | 第14页 |
·其它内质网驻留分子伴侣 | 第14页 |
·内质网小分子热激蛋白 | 第14-15页 |
·未折叠蛋白反应 | 第15-20页 |
·酵母中的UPR | 第15-16页 |
·哺乳动物细胞的UPR | 第16-19页 |
·Ire1 及ATF6 介导的UPR 信号途径 | 第16-18页 |
·PERK 介导的UPR 信号途径 | 第18-19页 |
·植物UPR | 第19-20页 |
·UPR 和内质网相关性蛋白质降解 | 第20页 |
·UPR 和细胞凋亡 | 第20-21页 |
3. 植物的非生物胁迫保护机制 | 第21-23页 |
·高温胁迫与植物的适应性 | 第21页 |
·干旱胁迫与植物的适应性 | 第21-22页 |
·盐胁迫与植物的适应性 | 第22-23页 |
第二部分 实验论文 | 第23-32页 |
1 实验材料 | 第23-24页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌株和质粒 | 第23页 |
·酶和生化试剂 | 第23页 |
·PCR 引物及其序列 | 第23页 |
·培养基 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·分析软件 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-32页 |
·质粒提取与转化 | 第24-26页 |
·质粒DNA 的提取 | 第24页 |
·质粒的酶切、连接 | 第24-25页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25页 |
·切胶回收 | 第25页 |
·质粒DNA 向大肠杆菌中转化——热激法 | 第25-26页 |
·组成型表达载体的构建与转化 | 第26-28页 |
·组成型表达AtHSP22.0 载体的构建 | 第26页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第27页 |
·农杆菌的培养 | 第27页 |
·拟南芥的遗传转化 | 第27页 |
·转基因拟南芥的遗传学分析 | 第27-28页 |
·Basta 抗性转化子的筛选 | 第27页 |
·转基因拟南芥纯合系的培育 | 第27-28页 |
·组成型表达AtHSP22.0 拟南芥的分子鉴定 | 第28-29页 |
·转基因拟南芥的Northern 杂交 | 第28-29页 |
·拟南芥叶片总RNA 的提取——Trizol 法 | 第28页 |
·RNA 甲醛变性凝胶电泳 | 第28页 |
·转膜及固定 | 第28-29页 |
·探针的制备 | 第29页 |
·Northern 杂交 | 第29页 |
·洗膜及显影 | 第29页 |
·转基因拟南芥的耐逆性分析 | 第29-32页 |
·转基因拟南芥的衣霉素抗性分析 | 第29页 |
·转基因拟南芥的耐盐性分析(弯根实验) | 第29-30页 |
·转基因拟南芥的盐胁迫处理 | 第30页 |
·转基因拟南芥的耐旱性分析(一) | 第30页 |
·转基因拟南芥的耐旱性分析(二) | 第30页 |
·衣霉素处理对内质网分子伴侣表达的影响 | 第30-31页 |
·转基因拟南芥的基础耐热性分析 | 第31-32页 |
第三部分 结果与分析 | 第32-44页 |
1 转基因拟南芥的Northern-blotting 鉴定结果 | 第32页 |
2 转基因拟南芥的耐逆性分析 | 第32-44页 |
·转基因拟南芥的衣霉素抗性分析 | 第32-35页 |
·转基因拟南芥的耐盐性分析 | 第35-37页 |
·弯根实验 | 第35-36页 |
·盐胁迫处理 | 第36-37页 |
·转基因拟南芥的耐旱性分析(一) | 第37-39页 |
·转基因拟南芥的耐旱性分析(二) | 第39-41页 |
·衣霉素处理对内质网分子伴侣表达的影响 | 第41-42页 |
·转基因拟南芥的基础耐热性分析 | 第42-44页 |
第四部分 讨论 | 第44-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |