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过表达内质网小分子热激蛋白对拟南芥抗逆性的影响

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一部分 文献综述第11-23页
 1. 热激蛋白概述第11-12页
   ·热激蛋白的发现第11页
   ·热激蛋白的种类及分布第11-12页
   ·热激蛋白的特点第12页
   ·smHSPs第12页
 2. 内质网分子伴侣与未折叠蛋白应答第12-21页
   ·内质网分子伴侣第12-15页
     ·GRP78 (BiP)第13页
     ·类凝集素分子伴侣(Calnexin 和Calreticulin)第13-14页
     ·PDI(protein disulfide isomerases)第14页
     ·其它内质网驻留分子伴侣第14页
     ·内质网小分子热激蛋白第14-15页
   ·未折叠蛋白反应第15-20页
     ·酵母中的UPR第15-16页
     ·哺乳动物细胞的UPR第16-19页
       ·Ire1 及ATF6 介导的UPR 信号途径第16-18页
       ·PERK 介导的UPR 信号途径第18-19页
     ·植物UPR第19-20页
   ·UPR 和内质网相关性蛋白质降解第20页
   ·UPR 和细胞凋亡第20-21页
 3. 植物的非生物胁迫保护机制第21-23页
   ·高温胁迫与植物的适应性第21页
   ·干旱胁迫与植物的适应性第21-22页
   ·盐胁迫与植物的适应性第22-23页
第二部分 实验论文第23-32页
 1 实验材料第23-24页
   ·植物材料第23页
   ·菌株和质粒第23页
   ·酶和生化试剂第23页
   ·PCR 引物及其序列第23页
   ·培养基第23页
   ·主要仪器设备第23-24页
   ·分析软件第24页
 2 实验方法第24-32页
   ·质粒提取与转化第24-26页
     ·质粒DNA 的提取第24页
     ·质粒的酶切、连接第24-25页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第25页
     ·切胶回收第25页
     ·质粒DNA 向大肠杆菌中转化——热激法第25-26页
   ·组成型表达载体的构建与转化第26-28页
     ·组成型表达AtHSP22.0 载体的构建第26页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第26-27页
     ·冻融法转化农杆菌第27页
     ·农杆菌的培养第27页
     ·拟南芥的遗传转化第27页
     ·转基因拟南芥的遗传学分析第27-28页
       ·Basta 抗性转化子的筛选第27页
       ·转基因拟南芥纯合系的培育第27-28页
   ·组成型表达AtHSP22.0 拟南芥的分子鉴定第28-29页
     ·转基因拟南芥的Northern 杂交第28-29页
       ·拟南芥叶片总RNA 的提取——Trizol 法第28页
       ·RNA 甲醛变性凝胶电泳第28页
       ·转膜及固定第28-29页
       ·探针的制备第29页
       ·Northern 杂交第29页
       ·洗膜及显影第29页
   ·转基因拟南芥的耐逆性分析第29-32页
     ·转基因拟南芥的衣霉素抗性分析第29页
     ·转基因拟南芥的耐盐性分析(弯根实验)第29-30页
     ·转基因拟南芥的盐胁迫处理第30页
     ·转基因拟南芥的耐旱性分析(一)第30页
     ·转基因拟南芥的耐旱性分析(二)第30页
     ·衣霉素处理对内质网分子伴侣表达的影响第30-31页
     ·转基因拟南芥的基础耐热性分析第31-32页
第三部分 结果与分析第32-44页
 1 转基因拟南芥的Northern-blotting 鉴定结果第32页
 2 转基因拟南芥的耐逆性分析第32-44页
   ·转基因拟南芥的衣霉素抗性分析第32-35页
   ·转基因拟南芥的耐盐性分析第35-37页
     ·弯根实验第35-36页
     ·盐胁迫处理第36-37页
   ·转基因拟南芥的耐旱性分析(一)第37-39页
   ·转基因拟南芥的耐旱性分析(二)第39-41页
   ·衣霉素处理对内质网分子伴侣表达的影响第41-42页
   ·转基因拟南芥的基础耐热性分析第42-44页
第四部分 讨论第44-47页
参考文献第47-54页
攻读硕士期间发表的论文第54-55页
致谢第55页

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