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草鱼SARM1基因与其剪切体的克隆、表达、定位及免疫功能研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 文献综述第12-22页
    1.1 草鱼及草鱼出血病第12页
    1.2 鱼类免疫系统概述第12页
    1.3 鱼类干扰素抗病毒反应的调节第12-17页
        1.3.1 鱼类 IFNs 的分类第13-14页
        1.3.2 鱼类 TLR 信号通路调节 IFN 反应第14-16页
        1.3.3 鱼类 RLR 信号通路调节 IFN 反应第16-17页
    1.4 TLRs 信号通路中的接头分子 SARM1第17-21页
        1.4.1 TLRs 信号通路中的接头分子第17-19页
        1.4.2 SARM1 分子的功能探索第19-21页
    1.5 本研究的目的和意义第21-22页
第二章 草鱼 SARM1 基因与其剪切体的克隆、表达、定位及免疫功能研究第22-52页
    2.1 前言第22页
    2.2 材料与方法第22-35页
        2.2.1 试验材料第22-23页
        2.2.2 主要试验仪器和试剂第23页
        2.2.3 总 RNA 提取与 cDNA 的合成第23页
        2.2.4 CiSARM1 基因第一片段的扩增第23-25页
        2.2.5 CiSARM1 基因 cDNA 全长的获得第25-28页
        2.2.6 DNA 的提取第28页
        2.2.7 CiSARM1 基因组序列全长的获得第28-29页
        2.2.8 序列的生物信息学分析第29页
        2.2.9 CiSARM1、CiSARM1s1 和 CiSARM1s2 的组织表达取样第29-30页
        2.2.10 实时定量 PCR第30-32页
        2.2.11 实时定量 PCR 检测 GCRV 感染头肾和脾脏中 CiSARM1、CiSARM1s1 和CiSARM1s2 的时序性表达差异第32页
        2.2.12 实时定量 PCR 检测 GCRV、poly(I:C)、LPS 和 PGN 刺激细胞中 CiSARM1、CiSARM1s1 和 CiSARM1s2 的时序表达模式第32页
        2.2.13 EGFP 融合载体和过表达载体的构建第32-33页
        2.2.14 CiSARM1 和 CiSARM1s 的发夹 RNA(shRNA)的设计与载体构建第33页
        2.2.15 质粒转染 CIK 细胞以及构建稳定转基因细胞系第33-34页
        2.2.16 激光共聚焦显微镜观察 CiSARM1、CiSARM1s1 和 CiSARM1s2 的亚细胞定位第34页
        2.2.17 实时定量 PCR 检测 GCRV 处理过表达细胞系中基因的时序表达模式第34页
        2.2.18 实时定量 PCR 检测 GCRV 处理转染干扰载体细胞系中基因的表达变化第34页
        2.2.19 抗病毒活性试验第34-35页
    2.3 结果与分析第35-48页
        2.3.1 CiSARM1、CiSARM1s1 和 CiSARM1s2 序列分析第35-38页
        2.3.2 CiSARM1、CiSARM1s1 和 CiSARM1s2 亚细胞定位第38-40页
        2.3.3 CiSARM1、CiSARM1s1 和 CiSARM1s2 的组织分布第40-41页
        2.3.4 GCRV 感染草鱼头肾和脾脏中 CiSARM1、CiSARM1s1 和 CiSARM1s2 的时序表达第41页
        2.3.5 GCRV、poly(I:C)、LPS 或者 PGN 处理的细胞中 CiSARM1、CiSARM1s1 和CiSARM1s2 的时序表达模式第41-42页
        2.3.6 GCRV 处理条件下 CiSARM1、CiSARM1s1 和 CiSARM1s2 分别在三种转基因细胞系中的时序表达模式第42-44页
        2.3.7 GCRV 处理条件下 CiTRIF、CiMyD88、CiIPS-1、CiTRAF6、CiTBK1、CiIRF3、CiIRF7、CiIFN-I 以及 CiMx1 分别在转基因细胞系中的时序表达模式第44-46页
        2.3.8 GCRV 处理条件下 CiTRIF、CiMyD88、CiIPS-1、CiTRAF6、CiTBK1、CiIRF3、CiIRF7、CiIFN-I 以及 CiMx1 在转染干扰载体细胞系中的表达变化第46-48页
        2.3.9 CiSARM1、CiSARM1s1 和 CiSARM1s2 的抗病毒活性第48页
    2.4 讨论第48-52页
总结与展望第52-54页
参考文献第54-60页
附录第60-63页
缩略词第63-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页

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