摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
英文缩略词表 | 第14-16页 |
前言 | 第16-18页 |
一、材料与方法 | 第18-32页 |
技术路线1 | 第18页 |
技术路线2 | 第18-19页 |
1.1 组织标本的收集及分组 | 第19页 |
1.2 细胞株选择及培养环境 | 第19页 |
1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
1.4 主要试剂与器材 | 第20-21页 |
1.5 实验方法 | 第21-31页 |
1.5.1 RT-PCR检测iqgapl mRNA表达水平(包括新鲜组织标本及细胞的检测) | 第21-24页 |
1.5.2 Western blotting检测IQGAP1蛋白表达量 | 第24-25页 |
1.5.3 免疫组化定性分析IQGAP1表达及其细胞分布情况 | 第25-26页 |
1.5.4 细胞培养 | 第26-27页 |
1.5.5 siRNA转染细胞 | 第27-28页 |
1.5.6 MTT法绘制生长曲线 | 第28-29页 |
1.5.7 流式细胞仪测定细胞生长周期,细胞凋亡 | 第29-30页 |
1.5.8 平板克隆形成实验 | 第30页 |
1.5.9 Transwell实验测定细胞迁移侵袭能力 | 第30页 |
1.5.10 划痕实验测定细胞迁移侵袭能力 | 第30-31页 |
1.6 统计学处理 | 第31-32页 |
二、实验结果 | 第32-42页 |
2.1 PCR检测IQGAP1 mRNA及Western blotting检测IQGAP1蛋白在组织中表达情况 | 第32-34页 |
2.1.1 Real-time PCR检测IQGAP1可行性分析 | 第32-33页 |
2.1.2 一二两组组织IQGAP1 mRNA及蛋白的相对表达量 | 第33-34页 |
2.2 免疫组化检测IQGAP1蛋白在组织中表达情况 | 第34-35页 |
2.3 K1、BCPAP、TPC-1及正常甲状腺细胞株Nthy-ori 3-1细胞IQGAP1检测结果 | 第35-36页 |
2.4 RNAi转染效率判断 | 第36-37页 |
2.5 筛靶实验结果显示siIQ2沉默IQGAP1表达效率最高 | 第37-38页 |
2.6 沉默IQGAP1抑制肿瘤细胞生长 | 第38-40页 |
2.6.1 MTT法 | 第38页 |
2.6.2 流式细胞仪分析细胞增殖指数及细胞凋亡分析 | 第38-39页 |
2.6.3 平板克隆形成实验 | 第39-40页 |
2.7 沉默IQGAP1抑制肿瘤细胞侵袭转移 | 第40-42页 |
2.7.1 Transwell侵袭实验 | 第40-41页 |
2.7.2 划痕实验 | 第41-42页 |
三、讨论 | 第42-44页 |
四、结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
综述 IQGAP1功能研究进展 | 第50-63页 |
参考文献 | 第56-63页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |