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柔嫩艾美耳球虫组蛋白去乙酰化酶3(EtHDAC3)生化特征的研究

摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-21页
    1.1 HDACs的功能第11-12页
    1.2 HDACs分类与结构第12-14页
    1.3 HDACs的三维结构和催化机理第14-15页
    1.4 机体对HDACs的调控第15-16页
    1.5 HDACs抑制剂第16-18页
    1.6 HDACs在寄生原虫中的研究进展第18-19页
        1.6.1 疟原虫的HDACs第18页
        1.6.2 弓形虫HDACs第18-19页
        1.6.3 锥虫HDACs第19页
        1.6.4 溶组织内阿米巴原虫HDACs第19页
        1.6.5 利什曼原虫HDACs第19页
    1.7 艾美耳球虫HDACs研究的目的和意义第19-21页
2 材料与方法第21-32页
    2.1 材料第21-22页
        2.1.1 虫种、菌株和载体第21页
        2.1.2 试验动物第21页
        2.1.3 主要仪器第21页
        2.1.4 主要试剂第21-22页
        2.1.5 引物第22页
    2.2 方法第22-32页
        2.2.1 EtHDAC3基因的克隆第22-26页
        2.2.2 EtHDAC3基因的诱导表达第26-28页
        2.2.3 E.tenella不同发育阶段EtHDAC3基因转录的变化第28-30页
        2.2.4 利用同源模建和分子对接分析EtHDAC3和ChHDAC3的活性位点第30-32页
3 结果第32-51页
    3.1 EtHDAC3基因ORF的克隆第32-41页
        3.1.1 EtHDAC3基因ORF的预测第32-33页
        3.1.2 E.tenella第二代裂殖子总RNA提取结果第33页
        3.1.3 EtHDAC3的RT-PCR结果第33-34页
        3.1.4 转化菌落的PCR鉴定第34-35页
        3.1.5 测序结果第35-36页
        3.1.6 EtHDAC3信号肽序列预测结果第36-37页
        3.1.7 EtHDAC3 NLS和NES的预测第37-38页
        3.1.8 各顶复门原虫HDAC3氨基酸序列的比对结果第38-41页
    3.2. EtHDAC3基因的诱导表达第41-44页
        3.2.1 带有酶切位点的EtHDAC3基因的扩增及鉴定第41页
        3.2.2 重组质粒的酶切鉴定第41页
        3.2.3 EtHDAC3基因的诱导表达结果第41-42页
        3.2.4 pMAL-C2X-EtHDAC3不同温度的诱导表达第42-43页
        3.2.5 pMAL-C2X-EtHDAC3不同IPTG浓度的诱导表达第43-44页
    3.3 E.tenella不同发育阶段EtHDAC3基因转录的变化第44-47页
        3.3.1 各个时期总RNA的提取结果第44-45页
        3.3.2 引物的检验第45页
        3.3.3 EtHDAC3和β-actin的扩增效率、标准曲线和溶解曲线第45-46页
        3.3.4 待测样品EtHDAC3和β-actin Real-time RT-PCR结果第46-47页
    3.4 利用同源模建和分子对接分析EtHDAC3和ChHDAC3的活性位点的差异第47-51页
        3.4.1 ChHDAC3基因的扩增及鉴定第47页
        3.4.2 EtHDAC3和ChHDAC3的活性位点的分析第47-48页
        3.4.3 同源建模第48页
        3.4.4 分子对接第48-51页
4 讨论第51-54页
    4.1 EtHDAC3的克隆与表达第51页
    4.2 E.tenella不同发育阶段EtHDAC3基因转录的变化第51-52页
    4.3 利用同源模建和分子对接分析EtHDAC3和ChHDAC3的活性位点的差异第52-54页
5 结论第54-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-61页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第61页

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