摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 HDACs的功能 | 第11-12页 |
1.2 HDACs分类与结构 | 第12-14页 |
1.3 HDACs的三维结构和催化机理 | 第14-15页 |
1.4 机体对HDACs的调控 | 第15-16页 |
1.5 HDACs抑制剂 | 第16-18页 |
1.6 HDACs在寄生原虫中的研究进展 | 第18-19页 |
1.6.1 疟原虫的HDACs | 第18页 |
1.6.2 弓形虫HDACs | 第18-19页 |
1.6.3 锥虫HDACs | 第19页 |
1.6.4 溶组织内阿米巴原虫HDACs | 第19页 |
1.6.5 利什曼原虫HDACs | 第19页 |
1.7 艾美耳球虫HDACs研究的目的和意义 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-32页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 虫种、菌株和载体 | 第21页 |
2.1.2 试验动物 | 第21页 |
2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
2.1.4 主要试剂 | 第21-22页 |
2.1.5 引物 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-32页 |
2.2.1 EtHDAC3基因的克隆 | 第22-26页 |
2.2.2 EtHDAC3基因的诱导表达 | 第26-28页 |
2.2.3 E.tenella不同发育阶段EtHDAC3基因转录的变化 | 第28-30页 |
2.2.4 利用同源模建和分子对接分析EtHDAC3和ChHDAC3的活性位点 | 第30-32页 |
3 结果 | 第32-51页 |
3.1 EtHDAC3基因ORF的克隆 | 第32-41页 |
3.1.1 EtHDAC3基因ORF的预测 | 第32-33页 |
3.1.2 E.tenella第二代裂殖子总RNA提取结果 | 第33页 |
3.1.3 EtHDAC3的RT-PCR结果 | 第33-34页 |
3.1.4 转化菌落的PCR鉴定 | 第34-35页 |
3.1.5 测序结果 | 第35-36页 |
3.1.6 EtHDAC3信号肽序列预测结果 | 第36-37页 |
3.1.7 EtHDAC3 NLS和NES的预测 | 第37-38页 |
3.1.8 各顶复门原虫HDAC3氨基酸序列的比对结果 | 第38-41页 |
3.2. EtHDAC3基因的诱导表达 | 第41-44页 |
3.2.1 带有酶切位点的EtHDAC3基因的扩增及鉴定 | 第41页 |
3.2.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第41页 |
3.2.3 EtHDAC3基因的诱导表达结果 | 第41-42页 |
3.2.4 pMAL-C2X-EtHDAC3不同温度的诱导表达 | 第42-43页 |
3.2.5 pMAL-C2X-EtHDAC3不同IPTG浓度的诱导表达 | 第43-44页 |
3.3 E.tenella不同发育阶段EtHDAC3基因转录的变化 | 第44-47页 |
3.3.1 各个时期总RNA的提取结果 | 第44-45页 |
3.3.2 引物的检验 | 第45页 |
3.3.3 EtHDAC3和β-actin的扩增效率、标准曲线和溶解曲线 | 第45-46页 |
3.3.4 待测样品EtHDAC3和β-actin Real-time RT-PCR结果 | 第46-47页 |
3.4 利用同源模建和分子对接分析EtHDAC3和ChHDAC3的活性位点的差异 | 第47-51页 |
3.4.1 ChHDAC3基因的扩增及鉴定 | 第47页 |
3.4.2 EtHDAC3和ChHDAC3的活性位点的分析 | 第47-48页 |
3.4.3 同源建模 | 第48页 |
3.4.4 分子对接 | 第48-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
4.1 EtHDAC3的克隆与表达 | 第51页 |
4.2 E.tenella不同发育阶段EtHDAC3基因转录的变化 | 第51-52页 |
4.3 利用同源模建和分子对接分析EtHDAC3和ChHDAC3的活性位点的差异 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |