摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略语 | 第9-12页 |
第一章 绪论(Introduction) | 第12-22页 |
1.1 选题背景和意义 | 第12-13页 |
1.2 文献综述及研究现状 | 第13-19页 |
1.2.1 肿瘤、癌基因、抑癌基因 | 第13页 |
1.2.2 卵巢癌相关的原癌基因、抑癌基因 | 第13-15页 |
1.2.3 基因治疗 | 第15-16页 |
1.2.4 卵巢癌的基因治疗 | 第16-18页 |
1.2.5 Huwel与卵巢癌 | 第18-19页 |
1.3 试验设计、试验内容 | 第19-22页 |
第二章 材料与方法(Materials and Methods) | 第22-48页 |
2.1 实验仪器与材料试剂 | 第22-26页 |
2.1.1 实验仪器 | 第22-23页 |
2.1.2 实验材料、试剂 | 第23-25页 |
2.1.3 本研究中常用试剂的配制 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-48页 |
2.2.1 小鼠卵巢上皮细胞的分离 | 第26-27页 |
2.2.2 小鼠卵巢上皮细胞的培养 | 第27-28页 |
2.2.3 小鼠卵巢上皮细胞恶性转化载体构建 | 第28-36页 |
2.2.4 慢病毒包装和浓缩,慢病毒滴度检测 | 第36-37页 |
2.2.5 小鼠卵巢上皮细胞的恶性转化 | 第37页 |
2.2.6 病毒感染情况检测 | 第37-40页 |
2.2.7 细胞样本总RNA提取 | 第40-41页 |
2.2.8 Transwell细胞小室迁移试验 | 第41页 |
2.2.9 Transwell细胞小室侵袭试验 | 第41-42页 |
2.2.10 细胞划痕实验 | 第42页 |
2.2.11 流式细胞术 | 第42-43页 |
2.2.12 实时定量荧光PCR(Realtime PCR) | 第43-45页 |
2.2.13 软琼脂克隆形成实验 | 第45-46页 |
2.2.14 荧光素酶报告试验(Luciferase Reporter Assay) | 第46-48页 |
第三章 结果(Results) | 第48-62页 |
3.1 小鼠卵巢上皮细胞恶性转化细胞系的建立 | 第48-52页 |
3.1.1 分离小鼠卵巢上皮细胞 | 第49页 |
3.1.2 载体构建及病毒包装 | 第49-50页 |
3.1.3 病毒感染细胞 | 第50-51页 |
3.1.4 细胞形态观察 | 第51-52页 |
3.2 Huwe1敲除对恶性转化小鼠卵巢上皮细胞的影响 | 第52-57页 |
3.2.1 Huwe1敲除对恶性转化小鼠卵巢上皮细胞低血清耐受的影响 | 第52-54页 |
3.2.2 Huwe1敲除对恶性转化小鼠卵巢上皮细胞迁移侵袭能力影响 | 第54-56页 |
3.2.3 Huwe1敲除对恶性转化小鼠卵巢上皮细胞克隆形成能力影响 | 第56-57页 |
3.3 Huwel在恶性转化小鼠卵巢上皮细胞中作用机制的研究 | 第57-62页 |
3.3.1 转录组测序技术(RNAseq)结果 | 第57-59页 |
3.3.2 Real-timePCR验证结果符合RNAseq结果 | 第59页 |
3.3.3 双荧光素酶系统检测Wnt信号通路 | 第59-62页 |
第四章 讨论(Discussions) | 第62-64页 |
参考文献(References) | 第64-68页 |
附录 | 第68-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第76页 |