中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第12-33页 |
1.1 植株转基因技术的概述 | 第12-16页 |
1.1.1 农杆菌介导的遗传转化 | 第12-13页 |
1.1.2 聚乙二醇(PEG)介导的基因转化 | 第13-14页 |
1.1.3 花粉管通道法 | 第14页 |
1.1.4 基因枪法 | 第14-15页 |
1.1.5 电穿孔法 | 第15页 |
1.1.6 其他转化方法 | 第15-16页 |
1.2 大豆遗传转化体系的研究进展 | 第16-20页 |
1.2.1 丛生芽器官发生途径 | 第17-19页 |
1.2.2 原生质体系统 | 第19页 |
1.2.3 体细胞胚胎途径 | 第19-20页 |
1.3 影响农杆菌介导遗传转化的主要因素 | 第20-24页 |
1.3.1 大豆种类及基因型 | 第21-22页 |
1.3.2 农杆菌菌株 | 第22页 |
1.3.3 侵染及培养过程的添加剂 | 第22-23页 |
1.3.4 筛选剂及标记基因 | 第23-24页 |
1.4 大豆异黄酮的研究概况 | 第24-29页 |
1.4.1 大豆异黄酮的结构和性质 | 第25页 |
1.4.2 大豆异黄酮的生物学活性 | 第25-27页 |
1.4.3 大豆异黄酮的生物合成 | 第27页 |
1.4.4 大豆异黄酮测定方法 | 第27-29页 |
1.5 合成大豆异黄酮的基因工程研究进展 | 第29-31页 |
1.5.1 合成大豆异黄酮相关的转录因子 | 第30页 |
1.5.2 合成大豆异黄酮关键酶基因工程的研究 | 第30-31页 |
1.6 试验的目的和意义 | 第31-33页 |
第二章 大豆子叶节遗传转化体系的优化 | 第33-51页 |
2.1 材料 | 第33-34页 |
2.1.1 基因材料和植物材料 | 第33页 |
2.1.2 农杆菌菌种 | 第33页 |
2.1.3 培养过程相关培养基 | 第33页 |
2.1.4 用仪器设备 | 第33-34页 |
2.2 方法 | 第34-40页 |
2.2.1 IFS2 和 CHIⅡ基因核苷酸序列 | 第34-35页 |
2.2.2 IFS2 和 CHIⅡ基因克隆相关引物 | 第35页 |
2.2.3 菌液 PCR 检测农杆菌阳性菌株 | 第35-36页 |
2.2.4 大豆的灭菌消毒及外植体的获得 | 第36-37页 |
2.2.5 农杆菌的制备 | 第37页 |
2.2.6 侵染及共培养 | 第37页 |
2.2.7 诱芽培养、抽茎培养和生根培养 | 第37页 |
2.2.8 萌发时间对诱芽率和抽茎率的影响 | 第37-38页 |
2.2.9 不同侵染方式及时间对诱芽率和抽茎率的影响 | 第38页 |
2.2.10 共培养阶段加入表面活性剂对诱芽率和抽茎率的影响 | 第38页 |
2.2.11 共培养时大豆子叶节摆放方式对诱芽率和抽茎率的影响 | 第38-39页 |
2.2.12 抽茎阶段大豆子叶去除与不去除诱对抽茎率的影响 | 第39页 |
2.2.13 抽茎阶段加入硝酸银对萌发率和抽茎率的影响 | 第39页 |
2.2.14 数据分析 | 第39-40页 |
2.3 结果与分析 | 第40-48页 |
2.3.1 IFS2 和 CHIⅡ基因 PCR 扩增产物分析 | 第40页 |
2.3.2 萌发时间对萌发率和抽茎率的影响 | 第40-42页 |
2.3.3 不同侵染方式及时间对萌发率和抽茎率的影响 | 第42-44页 |
2.3.4 共培养阶段加入表面活性剂对萌发率和抽茎率的影响 | 第44-45页 |
2.3.5 共培养时大豆子叶节摆放方式对诱芽率和抽茎率的影响 | 第45-46页 |
2.3.6 抽茎阶段大豆子叶去除与不去除诱对抽茎率的影响 | 第46-47页 |
2.3.7 抽茎阶段加入硝酸银对萌发率和抽茎率的影响 | 第47-48页 |
2.3.8 讨论 | 第48页 |
2.4 本章小结 | 第48-50页 |
2.5 吉林 47 大豆子叶节遗传转化体系流程 | 第50-51页 |
第三章 阳性植株的鉴定 | 第51-58页 |
3.1 材料与方法 | 第51-54页 |
3.1.1 主要仪器 | 第51页 |
3.1.2 材料 | 第51页 |
3.1.3 T2 代转 IFS2 基因植株的 Basta 叶片涂抹检测 | 第51页 |
3.1.4 T2 代转 IFS2 基因植株的 bar 基因试纸条检测 | 第51-52页 |
3.1.5 T2 转 IFS2 基因代植株的 PCR 检测 | 第52-54页 |
3.2 结果与分析 | 第54-57页 |
3.2.1 转 IFS2 基因 T2 代植株的 Basta 叶片涂抹检测 | 第54-55页 |
3.2.2 转 IFS2 基因 T2代植株的 bar 基因试纸条检测 | 第55-56页 |
3.2.3 转 IFS2 基因 T2 代植株的 PCR 检测 | 第56-57页 |
3.3 本章小结 | 第57-58页 |
第四章 转基因大豆异黄酮含量的测定 | 第58-64页 |
4.1 材料与方法 | 第58-59页 |
4.1.1 供试材料 | 第58页 |
4.1.2 异黄酮提取液的制备 | 第58页 |
4.1.3 供试仪器 | 第58页 |
4.1.4 供试试剂 | 第58-59页 |
4.1.5 色谱条件 | 第59页 |
4.1.6 标准品的配置 | 第59页 |
4.1.7 数据采集和分析 | 第59页 |
4.2 结果与分析 | 第59-63页 |
4.2.1 大豆异黄酮含量分析线性关系的考察 | 第59-60页 |
4.2.2 大豆异黄酮含量分析 | 第60-63页 |
4.3 本章小结 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-78页 |
作者简介 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |