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大豆子叶节遗传转化体系的优化及基因IFS2和CHI Ⅱ的遗传转化

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 引言第12-33页
    1.1 植株转基因技术的概述第12-16页
        1.1.1 农杆菌介导的遗传转化第12-13页
        1.1.2 聚乙二醇(PEG)介导的基因转化第13-14页
        1.1.3 花粉管通道法第14页
        1.1.4 基因枪法第14-15页
        1.1.5 电穿孔法第15页
        1.1.6 其他转化方法第15-16页
    1.2 大豆遗传转化体系的研究进展第16-20页
        1.2.1 丛生芽器官发生途径第17-19页
        1.2.2 原生质体系统第19页
        1.2.3 体细胞胚胎途径第19-20页
    1.3 影响农杆菌介导遗传转化的主要因素第20-24页
        1.3.1 大豆种类及基因型第21-22页
        1.3.2 农杆菌菌株第22页
        1.3.3 侵染及培养过程的添加剂第22-23页
        1.3.4 筛选剂及标记基因第23-24页
    1.4 大豆异黄酮的研究概况第24-29页
        1.4.1 大豆异黄酮的结构和性质第25页
        1.4.2 大豆异黄酮的生物学活性第25-27页
        1.4.3 大豆异黄酮的生物合成第27页
        1.4.4 大豆异黄酮测定方法第27-29页
    1.5 合成大豆异黄酮的基因工程研究进展第29-31页
        1.5.1 合成大豆异黄酮相关的转录因子第30页
        1.5.2 合成大豆异黄酮关键酶基因工程的研究第30-31页
    1.6 试验的目的和意义第31-33页
第二章 大豆子叶节遗传转化体系的优化第33-51页
    2.1 材料第33-34页
        2.1.1 基因材料和植物材料第33页
        2.1.2 农杆菌菌种第33页
        2.1.3 培养过程相关培养基第33页
        2.1.4 用仪器设备第33-34页
    2.2 方法第34-40页
        2.2.1 IFS2 和 CHIⅡ基因核苷酸序列第34-35页
        2.2.2 IFS2 和 CHIⅡ基因克隆相关引物第35页
        2.2.3 菌液 PCR 检测农杆菌阳性菌株第35-36页
        2.2.4 大豆的灭菌消毒及外植体的获得第36-37页
        2.2.5 农杆菌的制备第37页
        2.2.6 侵染及共培养第37页
        2.2.7 诱芽培养、抽茎培养和生根培养第37页
        2.2.8 萌发时间对诱芽率和抽茎率的影响第37-38页
        2.2.9 不同侵染方式及时间对诱芽率和抽茎率的影响第38页
        2.2.10 共培养阶段加入表面活性剂对诱芽率和抽茎率的影响第38页
        2.2.11 共培养时大豆子叶节摆放方式对诱芽率和抽茎率的影响第38-39页
        2.2.12 抽茎阶段大豆子叶去除与不去除诱对抽茎率的影响第39页
        2.2.13 抽茎阶段加入硝酸银对萌发率和抽茎率的影响第39页
        2.2.14 数据分析第39-40页
    2.3 结果与分析第40-48页
        2.3.1 IFS2 和 CHIⅡ基因 PCR 扩增产物分析第40页
        2.3.2 萌发时间对萌发率和抽茎率的影响第40-42页
        2.3.3 不同侵染方式及时间对萌发率和抽茎率的影响第42-44页
        2.3.4 共培养阶段加入表面活性剂对萌发率和抽茎率的影响第44-45页
        2.3.5 共培养时大豆子叶节摆放方式对诱芽率和抽茎率的影响第45-46页
        2.3.6 抽茎阶段大豆子叶去除与不去除诱对抽茎率的影响第46-47页
        2.3.7 抽茎阶段加入硝酸银对萌发率和抽茎率的影响第47-48页
        2.3.8 讨论第48页
    2.4 本章小结第48-50页
    2.5 吉林 47 大豆子叶节遗传转化体系流程第50-51页
第三章 阳性植株的鉴定第51-58页
    3.1 材料与方法第51-54页
        3.1.1 主要仪器第51页
        3.1.2 材料第51页
        3.1.3 T2 代转 IFS2 基因植株的 Basta 叶片涂抹检测第51页
        3.1.4 T2 代转 IFS2 基因植株的 bar 基因试纸条检测第51-52页
        3.1.5 T2 转 IFS2 基因代植株的 PCR 检测第52-54页
    3.2 结果与分析第54-57页
        3.2.1 转 IFS2 基因 T2 代植株的 Basta 叶片涂抹检测第54-55页
        3.2.2 转 IFS2 基因 T2代植株的 bar 基因试纸条检测第55-56页
        3.2.3 转 IFS2 基因 T2 代植株的 PCR 检测第56-57页
    3.3 本章小结第57-58页
第四章 转基因大豆异黄酮含量的测定第58-64页
    4.1 材料与方法第58-59页
        4.1.1 供试材料第58页
        4.1.2 异黄酮提取液的制备第58页
        4.1.3 供试仪器第58页
        4.1.4 供试试剂第58-59页
        4.1.5 色谱条件第59页
        4.1.6 标准品的配置第59页
        4.1.7 数据采集和分析第59页
    4.2 结果与分析第59-63页
        4.2.1 大豆异黄酮含量分析线性关系的考察第59-60页
        4.2.2 大豆异黄酮含量分析第60-63页
    4.3 本章小结第63-64页
结论第64-65页
参考文献第65-78页
作者简介第78-79页
致谢第79页

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