摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
1 绪论 | 第13-25页 |
1.1 泽泻及其研究现状 | 第13-17页 |
1.1.1 泽泻的化学成分 | 第13-14页 |
1.1.2 泽泻的药理作用 | 第14-17页 |
1.1.3 泽泻的毒性研究 | 第17页 |
1.2 泽泻醇A-24-醋酸酯研究现状 | 第17-19页 |
1.3 调节成熟脂肪细胞脂肪分解的相关信号通路 | 第19-22页 |
1.4 肝脏脂肪变性及其调控机制 | 第22-23页 |
1.5 本课题的研究内容和意义 | 第23-25页 |
2 泽泻醇A-24-醋酸酯促进3T3-L1脂肪细胞脂肪分解及其作用机理 | 第25-57页 |
2.1 前言 | 第25页 |
2.2 实验材料 | 第25-27页 |
2.2.1 实验药品与试剂 | 第25-27页 |
2.2.2 实验仪器 | 第27页 |
2.2.3 细胞株 | 第27页 |
2.3 实验方法 | 第27-35页 |
2.3.1 主要实验试剂配制 | 第27-30页 |
2.3.2 药物配制 | 第30页 |
2.3.3 3T3-L1前脂肪细胞的培养及诱导分化 | 第30-31页 |
2.3.4 MTT法检测细胞活性 | 第31页 |
2.3.5 油红O染色 | 第31页 |
2.3.6 甘油含量测定 | 第31-32页 |
2.3.7 实时荧光定量PCR实验 | 第32-34页 |
2.3.8 免疫印迹(WesternBlotting)实验 | 第34-35页 |
2.3.9 统计学分析 | 第35页 |
2.4 结果与分析 | 第35-52页 |
2.4.1 泽泻醇A-24-醋酸酯对3T3-L1成熟脂肪细胞存活率的影响 | 第35-36页 |
2.4.2 泽泻醇A-24-醋酸酯促进3T3-L1成熟脂肪细胞脂肪分解 | 第36-37页 |
2.4.3 泽泻醇A-24-醋酸酯抑制3T3-L1成熟脂肪细胞脂质积累 | 第37-38页 |
2.4.4 泽泻醇A-24-醋酸酯对3T3-L1成熟脂肪细胞中与脂肪分解、脂肪酸氧化等相关的酶系及转录因子的mRNA表达的影响 | 第38-39页 |
2.4.5 泽泻醇A-24-醋酸酯作用不同时间对3T3-L1成熟脂肪细胞中与脂肪分解相关的重要蛋白表达水平的影响 | 第39-40页 |
2.4.6 泽泻醇A-24-醋酸酯促进3T3-L1成熟脂肪细胞HSL蛋白的磷酸化并且增加ATGL蛋白的表达 | 第40-41页 |
2.4.7 泽泻醇A-24-醋酸酯抑制3T3-L1成熟脂肪细胞中p-PKAsubstrate和PPARγ蛋白的表达,并且促进AMPK蛋白的磷酸化 | 第41-42页 |
2.4.8 泽泻醇A-24-醋酸酯对3T3-L1成熟脂肪细胞中MAPK信号通路的影响 | 第42-43页 |
2.4.9 泽泻醇A-24-醋酸酯对3T3-L1成熟脂肪细胞中AKT信号通路的影响 | 第43-44页 |
2.4.10 泽泻醇A-24-醋酸酯通过激活PKA信号通路促进3T3-L1成熟脂肪细胞脂肪分解 | 第44-46页 |
2.4.11 泽泻醇A-24-醋酸酯通过激活ERK-PPARγ-PerilipinA信号通路促进3 T3-L1成熟脂肪细胞脂肪分解 | 第46-49页 |
2.4.12 泽泻醇A-24-醋酸酯激活AMPK信号通路对其促进脂肪分解作用的影响 | 第49-52页 |
2.5 讨论 | 第52-57页 |
3 泽泻醇A-24-醋酸酯抑制油酸钠诱导的HL7702肝细胞脂肪变性及其作用机理 | 第57-77页 |
3.1 前言 | 第57页 |
3.2 实验材料 | 第57-59页 |
3.2.1 实验药品与试剂 | 第57-58页 |
3.2.2 实验仪器 | 第58-59页 |
3.2.3 细胞株 | 第59页 |
3.3 实验方法 | 第59-61页 |
3.3.1 主要实验试剂配制 | 第59页 |
3.3.2 药物配制 | 第59页 |
3.3.3 HL7702肝细胞的培养及NAFLD模型诱导 | 第59-60页 |
3.3.4 MTT法检测细胞活性 | 第60页 |
3.3.5 油红O染色 | 第60-61页 |
3.3.6 胞内TG含量的测定 | 第61页 |
3.3.7 实时荧光定量PCR实验 | 第61页 |
3.3.8 免疫印迹(WesternBlotting)实验 | 第61页 |
3.3.9 统计学分析 | 第61页 |
3.4 结果与分析 | 第61-74页 |
3.4.1 泽泻醇A-24-醋酸酯对HL7702肝细胞存活率的影响 | 第61-62页 |
3.4.2 泽泻醇A-24-醋酸酯抑制油酸钠诱导的HL7702肝细胞脂肪变性 | 第62-63页 |
3.4.3 泽泻醇A-24-醋酸酯对油酸钠诱导的HL7702肝细胞脂肪变性过程中相关转录因子的mRNA表达的影响 | 第63-64页 |
3.4.4 泽泻醇A-24-醋酸酯对HL7702肝细胞中主要成脂蛋白及主要脂解蛋白表达的影响 | 第64-65页 |
3.4.5 泽泻醇A-24-醋酸酯促进HL7702肝细胞p-AMPK和p-ACC蛋白的表达 | 第65-67页 |
3.4.6 泽泻醇A-24-醋酸酯促进HL7702肝细胞PPARα和CPT1A蛋白的表达 | 第67-68页 |
3.4.7 泽泻醇A-24-醋酸酯对HL7702肝细胞中AKT信号通路的影响 | 第68页 |
3.4.8 泽泻醇A-24-醋酸酯对HL7702肝细胞中MAPK信号通路的影响 | 第68-69页 |
3.4.9 泽泻醇A-24-醋酸酯通过激活AMPK-ACC信号通路抑制油酸钠诱导的HL7702肝细胞脂肪变性 | 第69-72页 |
3.4.10 泽泻醇A-24-醋酸酯通过激活PPARα-CPT1A信号通路抑制油酸钠诱导的HL7702肝细胞脂肪变性 | 第72-74页 |
3.5 讨论 | 第74-77页 |
4 全文总结 | 第77-81页 |
4.1 主要研究发现和创新点 | 第77-79页 |
4.2 展望 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-91页 |
附录Ⅰ 缩略词对照表 | 第91-95页 |
附录Ⅱ 第2章引物序列 | 第95-97页 |
附录Ⅲ 第3章引物序列 | 第97-99页 |
致谢 | 第99-100页 |