摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
文献综述 | 第12-20页 |
第一章 SH2B3基因功能与体外诱导产生红细胞 | 第12-16页 |
1.1 红细胞的简介 | 第12-13页 |
1.1.1 红细胞的形态结构和功能 | 第12页 |
1.1.2 红细胞的体内来源 | 第12-13页 |
1.2 SH2B3基因的简介 | 第13页 |
1.3 SH2B3基因在血细胞诱导过程的作用 | 第13-16页 |
第二章 CRISPR/Cas9基因编辑技术 | 第16-20页 |
2.1 CRISPR/Cas9基因编辑技术 | 第16-17页 |
2.2 CRISPR/Cas9技术存在的问题 | 第17-20页 |
2.2.1 脱靶效率 | 第17-18页 |
2.2.2 转染效率 | 第18-20页 |
实验研究 | 第20-40页 |
第三章 同源重组筛选载体和敲除载体的构建 | 第20-28页 |
3.1 材料和方法 | 第20-21页 |
3.1.1 材料 | 第20-21页 |
3.1.2 方法 | 第21页 |
3.2 结果 | 第21-25页 |
3.2.1 pSH2B3-KO的构建 | 第21-22页 |
3.2.2 载体pTGP的构建 | 第22-25页 |
3.2.3 载体pTMN和pTMP的构建 | 第25页 |
3.3 讨论 | 第25-27页 |
3.4 小结 | 第27-28页 |
第四章 双抗性双荧光SH2B3敲除体系的建立及其鉴定 | 第28-40页 |
4.1 材料和方法 | 第28-31页 |
4.1.1 材料 | 第28页 |
4.1.2 方法 | 第28-31页 |
4.2 结果 | 第31-37页 |
4.2.1 同源重组筛选载体功能的鉴定 | 第31页 |
4.2.2 SH2B3敲除体系在293细胞上的建立和检测 | 第31-32页 |
4.2.3 SH2B3敲除体系在HeLa细胞上的建立和检测 | 第32-34页 |
4.2.4 SH2B3敲除体系的敲除效率 | 第34-35页 |
4.2.5 荧光信号的增强 | 第35-36页 |
4.2.6 SH2B3敲除体系在人脐带间充质干细胞上的运用 | 第36-37页 |
4.3 讨论 | 第37-39页 |
4.4 小结 | 第39-40页 |
总结 | 第40-42页 |
本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
附录 | 第50-51页 |
英文缩略词表 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53页 |