| 中文摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 REV的概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 REV的发现 | 第13-14页 |
| 1.1.2 REV的病毒生物学特征 | 第14-15页 |
| 1.1.3 REV的复制 | 第15页 |
| 1.1.4 REV的致病性及其影响 | 第15-16页 |
| 1.2 TRIM62蛋白概述 | 第16-19页 |
| 1.2.1 TRIM家族蛋白概述 | 第16-17页 |
| 1.2.2 TRIM62蛋白的结构 | 第17页 |
| 1.2.3 TRIM62的分布及定位 | 第17-18页 |
| 1.2.4 TRIM62蛋白抑制逆转录病毒的作用 | 第18页 |
| 1.2.5 肿瘤抑制因子和诊断标志物 | 第18-19页 |
| 1.2.6 TRIM62调节天然免疫信号通路 | 第19页 |
| 1.3 本课题研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 细胞、病毒和试验动物 | 第20页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 试验设备 | 第21页 |
| 2.1.4 试验地点 | 第21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-39页 |
| 2.2.1 TRIM62基因克隆 | 第21-23页 |
| 2.2.2 TRIM62的原核表达 | 第23-27页 |
| 2.2.3 原核表达TRIM62的体外抗病毒效果检测 | 第27-31页 |
| 2.2.4 TRIM62多克隆抗体的制备 | 第31-32页 |
| 2.2.5 慢病毒重组载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.6 慢病毒重组载体转染DF-1细胞 | 第33-34页 |
| 2.2.7 过表达TRIM62对REV的抑制 | 第34页 |
| 2.2.8 荧光定量PCR检测REV和TRIM62转录水平 | 第34-35页 |
| 2.2.9 免疫组化检测TRIM62在鸡组织中动态分布和定位 | 第35-37页 |
| 2.2.10 荧光定量PCR检测TRIM62在鸡各组织中动态转录水平 | 第37-39页 |
| 3 结果 | 第39-62页 |
| 3.1 TRIM62基因获取与克隆 | 第39-40页 |
| 3.1.1 TRIM62基因的扩增 | 第39页 |
| 3.1.2 TRIM62基因克隆 | 第39-40页 |
| 3.2 TRIM62基因的诱导表达 | 第40-43页 |
| 3.2.1 蛋白的表达形式 | 第40-41页 |
| 3.2.2 最佳表达条件 | 第41页 |
| 3.2.3 蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| 3.2.4 Westernblot检测蛋白的纯度 | 第42-43页 |
| 3.3 BCA法检测TRIM62浓度 | 第43页 |
| 3.3.1 BCA蛋白定量法制备标准曲线 | 第43页 |
| 3.3.2 原核表达TRIM62浓度的计算 | 第43页 |
| 3.4 原核表达TRIM62体外抗病毒效果 | 第43-44页 |
| 3.5 TRIM62多克隆抗体的效价 | 第44-45页 |
| 3.6 TRIM62多克隆抗体的特异性 | 第45页 |
| 3.7 过表达的TRIM62抑制REV复制 | 第45-48页 |
| 3.7.1 荧光检测 | 第45-46页 |
| 3.7.2 TRIM62抑制REV蛋白表达效果 | 第46-47页 |
| 3.7.3 TRIM62抑制REV基因转录效果 | 第47-48页 |
| 3.8 TRIM62在不同组织内动态分布 | 第48-59页 |
| 3.9 荧光定量PCR检测TRIM62动态转录水平 | 第59-62页 |
| 3.9.1 标准曲线 | 第59-60页 |
| 3.9.2 不同组织内TRIM62转录水平动态变化 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第72页 |
