| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-17页 |
| 1.1 冠状病毒的分类及猪δ冠状病毒的发现与由来 | 第7-8页 |
| 1.2 猪δ冠状病毒的分子生物学特征 | 第8-10页 |
| 1.3 猪δ冠状病毒的流行病学 | 第10-12页 |
| 1.4 猪δ冠状病毒的临床症状 | 第12-14页 |
| 1.5 猪δ冠状病毒的诊断方法与防控 | 第14-15页 |
| 1.6 ELISA检测方法 | 第15-16页 |
| 1.7 研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 PDCoV-N基因的克隆及其编码蛋白的原核表达与纯化 | 第17-31页 |
| 引言 | 第17页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 毒株及血清 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 试剂盒 | 第18页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第18-19页 |
| 2.1.5 蛋白纯化溶液的配制 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 PDCoV-N基因扩增 | 第19-21页 |
| 2.2.2 克隆载体rPDCoV-N的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.3 重组质粒rPDCoV-N在大肠杆菌中的表达 | 第23-24页 |
| 2.2.4 Westernblotting分析 | 第24页 |
| 2.2.5 PDCoV-N蛋白表达条件的优化 | 第24页 |
| 2.2.6 PDCoVN蛋白纯化 | 第24-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-29页 |
| 2.3.1 PDCoV-N基因扩增结果 | 第26页 |
| 2.3.2 rPDCoV-N重组表达载体的构建与鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.3 目的蛋白表达及Western-blot鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.4 目的蛋白表达条件的优化 | 第28-29页 |
| 2.3.5 PDCoV-N蛋白纯化 | 第29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-30页 |
| 2.5 小结 | 第30-31页 |
| 第三章 PDCoV-N蛋白的间接ELISA检测方法的建立 | 第31-42页 |
| 引言 | 第31页 |
| 3.1 材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 试剂 | 第31页 |
| 3.1.2 溶液配制 | 第31-32页 |
| 3.1.3 仪器 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-35页 |
| 3.2.1 包被抗原有效性验证 | 第32页 |
| 3.2.2 包被抗原蛋白浓度的测定 | 第32页 |
| 3.2.3 间接ELISA方法的初步建立 | 第32-35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-40页 |
| 3.3.1 包被抗原的制备 | 第35-36页 |
| 3.3.2 ELISA条件优化的结果 | 第36-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 3.5 小结 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 个人简介 | 第49-50页 |
| 导师简介 | 第50-53页 |
