| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 绪论 | 第11-13页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-13页 |
| 1.2 研究目的及意义 | 第13页 |
| 2 脂多糖(LPS)诱导HUVEC损伤及Transwell共培养体系的建立 | 第13-18页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-14页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第13页 |
| 2.1.2 试剂与耗材 | 第13页 |
| 2.1.3 仪器 | 第13-14页 |
| 2.2 实验方法 | 第14-16页 |
| 2.2.1 主要试剂的配制 | 第14页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第14页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第14-15页 |
| 2.2.4 细胞复苏 | 第15页 |
| 2.2.5 LPS浓度筛选 | 第15页 |
| 2.2.6 倒置显微镜观察损伤细胞形态变化 | 第15页 |
| 2.2.7 Transwell共培养体系的建立 | 第15-16页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第16页 |
| 2.3 实验结果 | 第16-18页 |
| 2.3.1 LPS刺激人脐血管内皮细胞(HUVECs)损伤模型的建立 | 第16-17页 |
| 2.3.2 共培养条件下HUVECs细胞形态学观察 | 第17-18页 |
| 2.4 讨论 | 第18页 |
| 3 甲基莲心碱对LPS刺激的共培养体系中HUVECs凋亡的影响 | 第18-25页 |
| 3.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第19页 |
| 3.1.2 试剂与耗材 | 第19页 |
| 3.1.3 仪器 | 第19页 |
| 3.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 3.2.1 不同浓度的甲基莲心碱的配制 | 第19页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第19-20页 |
| 3.2.3 CCK8检测不同浓度的甲基莲心碱对LPS损伤HUVECs增殖的影响 | 第20页 |
| 3.2.4 倒置显微镜观察甲基莲心碱对LPS损伤HUVECs形态变化 | 第20页 |
| 3.2.5 流式细胞仪检测甲基莲心碱对LPS损伤HUVECs细胞凋亡率的影响 | 第20-21页 |
| 3.2.6 甲基莲心碱对损伤后共培养中HUVECs的NO含量及NOS分型活力的影响 | 第21页 |
| 3.2.8 统计学分析 | 第21页 |
| 3.3 实验结果 | 第21-24页 |
| 3.3.1 CCK8检测各组细胞增殖情况 | 第21-22页 |
| 3.3.2 观察甲基莲心碱对LPS损伤HUVECs形态变化 | 第22页 |
| 3.3.3 流式细胞仪检测甲基莲心碱对LPS损伤HUVECs细胞凋亡率的影响 | 第22-24页 |
| 3.3.4 甲基莲心碱对损伤后共培养中HUVECs的NO含量及NOS分型活力的影响 | 第24页 |
| 3.4 讨论 | 第24-25页 |
| 4 甲基莲心碱对LPS刺激的共培养体系中HUVEC的保护作用及其分子机制研究 | 第25-34页 |
| 4.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第25页 |
| 4.1.2 试剂与耗材 | 第25-26页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第26页 |
| 4.2 实验方法 | 第26-31页 |
| 4.2.2 主要试剂的配制 | 第26-27页 |
| 4.2.3 细胞培养及药物处理 | 第27页 |
| 4.2.4 Western blot检测细胞中NF-κB信号通路相关蛋白 | 第27-29页 |
| 4.2.5 ELISA检测ICAM-1和TNF-a的分泌水平 | 第29页 |
| 4.2.6 RT-PCR测定ICAM-1、TNF-α在RNA水平上的影响 | 第29-31页 |
| 4.2.7 统计学分析 | 第31页 |
| 4.3 实验结果 | 第31-34页 |
| 4.3.1 Nef对损伤后的HUVECs细胞中NF-κB信号通路相关蛋白的影响 | 第31-32页 |
| 4.3.2 ELISA检测ICAM-1和TNF-α的分泌水平 | 第32-33页 |
| 4.3.3 Nef对共培养条件下LPS诱导损伤HUVECs中ICAM-1、TNF-α在RNA水平上的影响 | 第33-34页 |
| 4.4 讨论 | 第34页 |
| 5 全文小结 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 字母简写表 | 第39-40页 |
| 综述 | 第40-47页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
