| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第15-34页 |
| 1.1 卵母细胞的成熟 | 第15-16页 |
| 1.1.1 核成熟和胞质成熟 | 第15-16页 |
| 1.1.2 卵母细胞的体外成熟 | 第16页 |
| 1.2 卵母细胞减数分裂的调控 | 第16-18页 |
| 1.2.1 MPF与GV期停滞 | 第16-17页 |
| 1.2.2 减数分裂的恢复 | 第17-18页 |
| 1.2.3 卵母细胞内cAMP的来源 | 第18页 |
| 1.3 体外抑制卵母细胞GVBD | 第18-23页 |
| 1.3.1 卵泡液中的生理性抑制因子 | 第19-20页 |
| 1.3.1.1 CNP | 第19页 |
| 1.3.1.2 嘌呤及其衍生物 | 第19-20页 |
| 1.3.2 蛋白质合成抑制剂 | 第20页 |
| 1.3.3 蛋白磷酸化抑制剂 | 第20-22页 |
| 1.3.3.1 6 -DMAP | 第21页 |
| 1.3.3.2 BL-I和Roscovitine | 第21-22页 |
| 1.3.4 cAMP | 第22-23页 |
| 1.4 核进程与卵母细胞发育 | 第23页 |
| 1.5 细胞质成熟与卵母细胞发育能力 | 第23-26页 |
| 1.5.1 活性氧和谷胱甘肽 | 第23-24页 |
| 1.5.2 钙储量 | 第24页 |
| 1.5.3 皮质颗粒的迁移 | 第24-25页 |
| 1.5.4 与胚胎发育能力相关mRNA的表达量 | 第25-26页 |
| 1.6 卵丘颗粒细胞与卵母细胞发育 | 第26-27页 |
| 1.6.1 卵丘颗粒细胞凋亡与卵母细胞发育能力的关系 | 第26-27页 |
| 1.6.2 卵丘扩展与卵母细胞发育 | 第27页 |
| 1.7 卵泡液与卵母细胞发育 | 第27-29页 |
| 1.7.1 卵泡液中的抗氧化成分 | 第28页 |
| 1.7.2 卵泡液中通过作用于卵丘细胞促进卵母细胞发育的成分 | 第28-29页 |
| 1.8 哺乳动物GV期卵母细胞染色质构型 | 第29-33页 |
| 1.8.1 GV期卵母细胞染色质构型的分类 | 第29-31页 |
| 1.8.2 卵母细胞生长和成熟过程中GV期染色质构型的改变 | 第31页 |
| 1.8.3 卵母细胞GV染色质构型与转录活性的关系 | 第31-32页 |
| 1.8.4 卵母细胞GV染色质构型与发育能力的关系 | 第32-33页 |
| 1.9 本研究的主要内容与意义 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-36页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第34页 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 | 第34-36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-43页 |
| 2.2.1 卵母细胞的收集 | 第36页 |
| 2.2.2 卵母细胞的成熟培养 | 第36页 |
| 2.2.3 卵母细胞的孤雌激活和胚胎培养 | 第36-37页 |
| 2.2.4 皮质颗粒的重新分布 | 第37页 |
| 2.2.5 卵丘细胞凋亡检测 | 第37页 |
| 2.2.6 卵母细胞内钙离子储量的检测 | 第37-38页 |
| 2.2.7 卵母细胞内活性氧物质的检测 | 第38页 |
| 2.2.8 卵母细胞内谷胱甘肽的检测 | 第38-39页 |
| 2.2.9 实时定量PCR | 第39-41页 |
| 2.2.9.1 总RNA的提取 | 第39页 |
| 2.2.9.2 反转录 | 第39页 |
| 2.2.9.3 荧光定量检测mRNA含量的变化 | 第39-41页 |
| 2.2.9.4 标准曲线的制作 | 第41页 |
| 2.2.9.5 荧光定量数据的分析及处理 | 第41页 |
| 2.2.10 总体转录活性的检测 | 第41-42页 |
| 2.2.11 猪卵母细胞染色质构型的观察 | 第42页 |
| 2.2.12 观察卵母细胞成熟核进程 | 第42页 |
| 2.2.13 数据统计 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-61页 |
| 3.1 抑制猪卵母细胞生发泡破裂抑制剂的筛选 | 第43-45页 |
| 3.2 抑制生发泡破裂对猪卵母细胞成熟和发育能力的影响 | 第45-46页 |
| 3.3 抑制生发泡破裂对猪卵母细胞核进程的影响 | 第46-49页 |
| 3.4 抑制猪卵母细胞生发泡破裂对卵丘的影响 | 第49-51页 |
| 3.4.1 改变抑制期间培养液的成分对卵丘扩展的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.2 改变抑制期间培养液的成分对卵丘细胞凋亡比例以及调亡相关基因表达量的影响 | 第50-51页 |
| 3.5 抑制生发泡破裂对猪卵母细胞皮质颗粒重排的影响 | 第51-53页 |
| 3.6 抑制生发泡破裂对猪卵母细胞钙储量的影响 | 第53-55页 |
| 3.7 抑制生发泡破裂对猪卵母细胞内活性氧物质(ROS)水平、总谷胱甘肽含量(GSX)和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值的检测 | 第55-56页 |
| 3.8 抑制生发泡破裂对猪卵母细胞染色质构型的影响 | 第56-58页 |
| 3.9 抑制生发泡破裂对猪卵母细胞基因转录的影响 | 第58-59页 |
| 3.10 抑制生发泡破裂对猪卵母细胞发育能力和调亡相关基因表达的影响 | 第59-61页 |
| 4.讨论 | 第61-67页 |
| 4.1 不同抑制剂抑制猪卵母细胞生发泡破裂的效果 | 第61-62页 |
| 4.2 卵母细胞胞质成熟度与发育能力的关系 | 第62-63页 |
| 4.3 卵丘细胞与卵母细胞发育能力的关系 | 第63-64页 |
| 4.4 mRNA的表达量与发育能力之间的关系 | 第64页 |
| 4.5 染色质构型与转录及卵母细胞发育能力的关系 | 第64-65页 |
| 4.6 抑制卵母细胞生发泡破裂期间,卵泡液与卵母细胞发育能力的关系 | 第65-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第97页 |
