| 英文缩写词对照表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 第一章 利用CRISPR/Cas9技术获得丹参游离毛状根突变体 | 第14-68页 |
| 1 材料与方法 | 第14-39页 |
| 1.1 实验材料 | 第14-19页 |
| 1.2 实验方法 | 第19-39页 |
| 2 结果与讨论 | 第39-67页 |
| 2.1 丹参的CRISPR/Cas9系统 | 第39-40页 |
| 2.2 丹参酮GGPP下游途径基因及靶点序列 | 第40-46页 |
| 2.3 CRISPR/Cas9靶点序列的潜在脱靶可能性分析 | 第46-55页 |
| 2.4 AtU6-26SK-spacer载体的PCR鉴定与酶切回收 | 第55-56页 |
| 2.5 35S-Cas9-SK载体的酶切回收 | 第56-57页 |
| 2.6 pCambia1300载体的酶切回收 | 第57页 |
| 2.7 CRISPR/Cas9最终表达载体的PCR鉴定 | 第57-58页 |
| 2.8 丹参毛状根gDNA提取与阳性突变鉴定 | 第58-59页 |
| 2.9 突变体个数与突变情况统计 | 第59-62页 |
| 2.10 毛状根突变体表型观察 | 第62-63页 |
| 2.11 CRISPR/Cas9载体系统的丹参密码子优化与启动子优化 | 第63-67页 |
| 3 小结 | 第67-68页 |
| 第二章 丹参游离毛状根突变体的次生代谢分析与基因功能阐释 | 第68-74页 |
| 1 引言 | 第68页 |
| 2 材料和方法 | 第68-70页 |
| 2.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 2.2 实验方法 | 第69-70页 |
| 3 结果与讨论 | 第70-73页 |
| 3.1 SmCPS1游离毛状根纯合突变体中丹参酮合成受阻 | 第70-72页 |
| 3.2 SmCPS1游离毛状根嵌合突变体中丹参酮含量降低 | 第72-73页 |
| 4 小结 | 第73-74页 |
| 全文总结与工作展望 | 第74-77页 |
| 1 本文工作总结 | 第74-75页 |
| 1.1 获得了丹参SmCPS1和SmCYP76AH1的毛状根突变体 | 第74页 |
| 1.2 对突变体毛状根进行了次生代谢产物的研究 | 第74-75页 |
| 2 今后工作的展望 | 第75-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 综述 | 第83-118页 |
| 1 丹参研究概况 | 第83-97页 |
| 1.1 丹参的主要成分 | 第83-90页 |
| 1.2 二萜化合物与丹参酮合成途径 | 第90-93页 |
| 1.3 丹参的药理学活性 | 第93-96页 |
| 1.4 丹参资源利用现状 | 第96-97页 |
| 2 CRISPR/Cas9综述 | 第97-104页 |
| 2.1 CRISPR/Cas9系统介绍 | 第97-98页 |
| 2.2 影响CRISPR/Cas9基因编辑效率的因素 | 第98-100页 |
| 2.3 CRISPR/Cas9的应用与发展 | 第100-104页 |
| 参考文献 | 第104-118页 |
| 附录Ⅰ 博士研究生期间发表的论文情况 | 第118-119页 |
| 附录Ⅱ 引物序列 | 第119-120页 |
| 附录Ⅲ 基因序列 | 第120-138页 |
| 附录Ⅳ 优化的Cas9基因序列和丹参U6启动子 | 第138-141页 |
