中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-17页 |
研究现状、成果 | 第12-15页 |
研究目的、方法 | 第15-17页 |
一、miR-19a和miR-19b在宫颈癌中的作用研究 | 第17-37页 |
1.1 材料和方法 | 第17-28页 |
1.1.1 实验材料 | 第17-18页 |
1.1.2 实验方法 | 第18-28页 |
1.2 结果 | 第28-35页 |
1.2.1 Real-time PCR检测miR-19a、miR-19b在宫颈癌组织和正常宫颈组中的差异表达 | 第28-29页 |
1.2.2 pcDNA3/pri-miR-19a、pcDNA3/pri-miR-19b质粒的构建 | 第29页 |
1.2.3 细胞转染效率检测 | 第29-30页 |
1.2.4 Real-time PCR检测pcDNA3/pri-miR-19a、pcDNA3/pri-miR-19b质粒的有效性 | 第30-31页 |
1.2.5 WST-1实验检测miR-19a、miR-19b对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第31页 |
1.2.6 细胞集落形成实验检测miR-19a、miR-19b对宫颈癌细胞集落形成能力的影响 | 第31-32页 |
1.2.7 生长曲线实验检测miR-19a、miR-19b对宫颈癌细胞增值能力的影响 | 第32-33页 |
1.2.8 划痕实验检测miR-19a、miR-19b对宫颈癌细胞体外迁移能力的影响 | 第33-34页 |
1.2.9 Transwell检测miR-19a、miR-19b对宫颈癌细胞侵袭能力的影响 | 第34-35页 |
1.3 小结 | 第35-37页 |
二、miR-19a和miR-19b在宫颈癌中靶基因的确定及验证 | 第37-52页 |
2.1 材料和方法 | 第37-45页 |
2.1.1 实验材料 | 第37-39页 |
2.1.2 实验方法 | 第39-45页 |
2.2 结果 | 第45-51页 |
2.2.1 EGFP荧光报告载体的构建 | 第45-46页 |
2.2.2 EGFP荧光报告载体实验验证IGF2R是miR-19a、miR-19b的直接作用靶基因 | 第46-48页 |
2.2.3 Real-Time PCR方法检测在过表达和封闭miR-19a、miR-19b后的HeLa细胞中IGF2R mRNA的表达水平 | 第48-49页 |
2.2.4 Western blot检测在过表达miR-19a、miR-19b后的HeLa细胞中IGF2R蛋白的表达水平 | 第49-51页 |
2.3 小结 | 第51-52页 |
三、靶基因IGF2R在宫颈癌中的作用研究 | 第52-61页 |
3.1 材料和方法 | 第52-53页 |
3.1.1 实验材料 | 第52页 |
3.1.2 实验方法 | 第52-53页 |
3.2 结果 | 第53-59页 |
3.2.1 pSilencer/si-IGF2R质粒的构建 | 第53-54页 |
3.2.2 Western blot验证pSilencer/si-IGF2R质粒的有效性 | 第54页 |
3.2.3 WST-1检测基因IGF2R对宫颈癌细胞生长活性的影响 | 第54-55页 |
3.2.4 细胞集落形成实验分析IGF2R对宫颈癌细胞集落形成能力的影响 | 第55-56页 |
3.2.5 生长曲线实验检测IGF2R对宫颈癌细胞增殖能力的影响 | 第56-57页 |
3.2.6 划痕实验检测IGF2R对宫颈癌细胞体外迁移能力的影响 | 第57-58页 |
3.2.7 Transwell检测IGF2R对宫颈癌细胞侵袭能力的影响 | 第58-59页 |
3.3 小结 | 第59-61页 |
讨论 | 第61-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第74-75页 |
综述 | 第75-83页 |
综述参考文献 | 第79-83页 |
致谢 | 第83页 |