| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第13-15页 |
| 2 文献综述 | 第15-45页 |
| 2.1 昆虫病毒 | 第15-21页 |
| 2.1.1 昆虫病毒的结构特征 | 第16页 |
| 2.1.2 昆虫病毒资源的鉴定 | 第16-17页 |
| 2.1.3 昆虫病毒的分子基础 | 第17-19页 |
| 2.1.4 研究昆虫病毒的意义 | 第19-21页 |
| 2.2 T4病毒 | 第21-36页 |
| 2.2.1 T4病毒的分类 | 第22-24页 |
| 2.2.2 T4病毒基因组RNA的总体特征 | 第24页 |
| 2.2.3 松天蛾β类似病毒基因组组成以及复制模型 | 第24-27页 |
| 2.2.4 松天蛾ω类似病毒基因组组成以及复制模型 | 第27-29页 |
| 2.2.5 PrV在脂肪体细胞系中的复制 | 第29-30页 |
| 2.2.6 衣壳组装 | 第30页 |
| 2.2.7 衣壳蛋白的结构与动力学 | 第30-34页 |
| 2.2.8 T4病毒病理学特征 | 第34-35页 |
| 2.2.9 T4病毒的应用 | 第35-36页 |
| 2.3 解旋酶 | 第36-45页 |
| 2.3.1 解旋酶的活性 | 第36-38页 |
| 2.3.2 解旋酶的分类与结构 | 第38-39页 |
| 2.3.3 举例证实解旋酶在核酸代谢中的重要作用 | 第39-45页 |
| 3 松毛虫T4病毒解旋酶的原核表达及抗体制备 | 第45-68页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-60页 |
| 3.1.1 材料 | 第45-49页 |
| 3.1.2 方法 | 第49-60页 |
| 3.2 结果 | 第60-65页 |
| 3.2.1 病毒纯化及解旋酶基因的扩增与序列分析 | 第60-63页 |
| 3.2.2 重组质粒的构建以及酶切鉴定 | 第63-64页 |
| 3.2.3 解旋酶重组蛋白的表达与亲和纯化 | 第64-65页 |
| 3.2.4 血清效价的测定 | 第65页 |
| 3.3 讨论 | 第65-68页 |
| 4 利用杆状病毒表达系统表达松毛虫T4病毒解旋酶蛋白及其突变体蛋白 | 第68-86页 |
| 4.1 材料与方法 | 第68-79页 |
| 4.1.1 材料 | 第68-70页 |
| 4.1.2 方法 | 第70-79页 |
| 4.2 结果 | 第79-83页 |
| 4.2.1 DpTV解旋酶片段及其点突变体片段的扩增 | 第79-80页 |
| 4.2.2 载体pFastBac~(TM)HT B的改造 | 第80页 |
| 4.2.3 目的片段与载体pFastBac~(TM)HT B-MBP的连接 | 第80-81页 |
| 4.2.4 重组Bacmid质粒的获取 | 第81页 |
| 4.2.5 重组Bacmid质粒的鉴定 | 第81-82页 |
| 4.2.6 Sf9细胞被杆状病毒感染后形态变化 | 第82页 |
| 4.2.7 重组蛋白的纯化与鉴定 | 第82-83页 |
| 4.3 讨论 | 第83-86页 |
| 5 松毛虫T4病毒解旋酶蛋白的NTP酶活性研究 | 第86-100页 |
| 5.1 前言 | 第86页 |
| 5.2 材料与方法 | 第86-92页 |
| 5.2.1 材料 | 第86-88页 |
| 5.2.2 方法 | 第88-92页 |
| 5.3 结果 | 第92-97页 |
| 5.3.1 无机磷标准曲线的制作 | 第92-93页 |
| 5.3.2 DpTV MBP-Hel蛋白的ATP酶活性检测 | 第93页 |
| 5.3.3 DpTV MBP-Hel及其突变体蛋白的ATP酶活性比较 | 第93-94页 |
| 5.3.4 反应条件对DpTV MBP-Hel蛋白ATP酶活性的影响 | 第94-95页 |
| 5.3.5 核酸对DpTV MBP-Hel及其突变体蛋白ATP酶活性的影响 | 第95-96页 |
| 5.3.6 DpTV MBP-Hel蛋白对各种NTP以及dNTP底物的水解效率 | 第96-97页 |
| 5.4 讨论 | 第97-100页 |
| 6 松毛虫T4病毒解旋酶蛋白的核酸结合以及解旋特性研究 | 第100-120页 |
| 6.1 前言 | 第100-101页 |
| 6.2 材料与方法 | 第101-105页 |
| 6.2.1 材料 | 第101页 |
| 6.2.2 方法 | 第101-105页 |
| 6.3 结果 | 第105-116页 |
| 6.3.1 DNA模板的扩增以及RNA链的制备 | 第105-106页 |
| 6.3.2 带标记的ssRNA,dsRNA,ssDNA与dsDNA的制备 | 第106-107页 |
| 6.3.3 DpTV MBP-Hel及其突变体蛋白与核酸链的结合活性 | 第107-108页 |
| 6.3.4 DpTV MBP-Hel蛋白的解旋活性 | 第108-109页 |
| 6.3.5 保守位点突变对DpTV MBP-Hel蛋白解旋活性的影响 | 第109-110页 |
| 6.3.6 DpTV MBP-Hel蛋白解旋方向的确定 | 第110-111页 |
| 6.3.7 底物5’突出长短对DpTV MBP-Hel蛋白解旋活性的影响 | 第111-112页 |
| 6.3.8 DpTV MBP-Hel蛋白对含DNA底物链的解旋分析 | 第112-113页 |
| 6.3.9 DpTV MBP-Hel蛋白解旋反应对金属离子的特异性分析 | 第113-114页 |
| 6.3.10 反应条件对DpTV MBP-Hel蛋白解旋活性的影响 | 第114-115页 |
| 6.3.11 NTP和dNTP对DpTV MBP-Hel蛋白解旋活性的影响 | 第115-116页 |
| 6.4 讨论 | 第116-120页 |
| 6.4.1 DpTV MBP-Hel及其突变体蛋白的核酸结合活性 | 第116-117页 |
| 6.4.2 DpTV MBP-Hel及其突变体蛋白的RNA解旋活性 | 第117页 |
| 6.4.3 DpTV MBP-Hel蛋白的解旋特性 | 第117-120页 |
| 研究总结 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-138页 |
| 博士在读期间发表和待发表的文章 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139页 |
