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Raf/Erk1/2/Merk信号传导通路在脊髓损伤修复中的病理机制研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语/符号说明第13-15页
前言第15-21页
    研究现状、成果第15-19页
    研究目的、方法第19-21页
一、脊髓运动神经元和星形胶质细胞的分离、培养和鉴定第21-66页
    1.1 对象和方法第21-51页
        1.1.1 实验材料和器械第21-40页
            1.1.1.2 脊髓运动神经元的分离、培养和纯化第26页
            1.1.1.3 脊髓运动神经元的鉴定第26-27页
            1.1.1.4 脊髓运动神经元体外基因转染第27-29页
            1.1.1.5 细胞迁移实验第29-30页
            1.1.1.6 细胞黏附实验第30页
            1.1.1.7 免疫焚光染色第30-31页
            1.1.1.8 Dil轴突染色第31-32页
            1.1.1.9 免疫印迹实验(Western-blot)第32-34页
            1.1.1.10 荧光实时定量PCR(Real-time PCR)第34-39页
            1.1.1.11 细胞电生理检测(Patch-clamp)第39页
            1.1.1.12 统计分析第39-40页
        1.1.2 结果第40-51页
            1.1.2.1 形态学结果第40页
            1.1.2.2 鉴定结果第40-41页
            1.1.2.3 体外基因传递第41页
            1.1.2.4 细胞迁移实验第41页
            1.1.2.5 细胞黏附实验第41-42页
            1.1.2.6 免疫荧光染色第42-43页
            1.1.2.7 轴突染色(DiI)第43-45页
            1.1.2.8 TO-PR03染色第45页
            1.1.2.9 免疫印迹实验(Western-blot)第45-47页
            1.1.2.10 荧光实时定量PCR(Real-time PCR)第47-48页
            1.1.2.11 细胞电生理检测(Patch-clamp)第48-51页
    1.2 星形胶质细胞的分离、培养和鉴定第51-59页
        1.2.1 对象和方法第51-54页
            1.2.1.1 星形胶质细胞的的分离、培养和纯化第51-52页
            1.2.1.2 星形胶质细胞的鉴定第52页
            1.2.1.3 体外基因转染第52页
            1.2.1.4 细胞迁移实验第52页
            1.2.1.5 细胞黏附实验第52页
            1.2.1.6 免疫荧光染色第52-53页
            1.2.1.7 免疫印迹实验(Western-blot)第53页
            1.2.1.8 荧光实时定量PCR(Real-time PCR)第53-54页
            1.2.1.9 细胞电生理检测(patch-clamp)第54页
        1.2.2 结果第54-59页
            1.2.2.1 形态学及鉴定结果第54页
            1.2.2.2 体外基因传递第54页
            1.2.2.3 细胞迁移实验第54页
            1.2.2.4 细胞黏附实验第54-55页
            1.2.2.5 免疫荧光染色第55-56页
            1.2.2.6 免疫印迹实验(Western-blot)第56-57页
            1.2.2.7 荧光实时定量PCR(Real-time PCR)第57-58页
            1.2.2.8 细胞电生理检测(Patch-clamp)第58-59页
    1.3 讨论第59-65页
        1.3.1 脊髓运动神经元的功能和特性第59-61页
        1.3.2 星形胶质细胞的功能和特性第61-63页
        1.3.3 体外基因传递方法和作用第63-65页
    1.4 小结第65-66页
二、脊髓运动神经元和星形胶质细胞的相互作用第66-79页
    2.1 对象和方法第66-67页
        2.1.1 星形胶质细胞的分离、培养和纯化第66-67页
        2.1.2 体外基因转染第67页
        2.1.3 免疫荧光染色第67页
        2.1.4 免疫印迹试验(Western-blot)第67页
        2.1.5 RT-PCR实验第67页
    2.2 结果第67-74页
        2.2.1 形态学结果第67页
        2.2.2 免疫荧光染色第67-69页
        2.2.3 免疫印迹试验(Western-blot)第69-73页
        2.2.4 Real-time PCR检测结果(RT-PCR)第73-74页
    2.3 讨论第74-77页
        2.3.1 脊髓运动神经元和星形胶质细胞之间的相互作用第74-75页
        2.3.2 脊髓运动神经元和星形胶质细胞之间的代谢藕联第75-77页
    2.4 小结第77-79页
三、抑制Raf/Erk/MERK信号通路水平对脊髓损伤修复的作用第79-100页
    3.1 对象和方法第79-83页
        3.1.1 实验材料和器械第79页
        3.1.2 实验分组第79页
        3.1.3 脊髓损伤动物模型制作第79-80页
        3.1.4 运动功能评分及行为学测试第80页
        3.1.5 脊髓标本取材第80页
        3.1.6 BDA顺行示踪第80-81页
        3.1.7 脊髓冰冻切片的制备第81页
        3.1.8 免疫组化染色第81-82页
        3.1.9 神经树突染色(Dlf Labeling)第82页
        3.1.10 免疫印迹实验(Westem-blot)第82页
        3.1.11 脊髓电生理检查(patch-clamp)第82-83页
        3.1.12 数据及图像统计分析第83页
    3.2 结果第83-94页
        3.2.1 BMS评分及行为学结果第84-86页
        3.2.2 免疫荧光染色结果第86-92页
        3.2.3 Western-blot 结果第92-93页
        3.2.4 BDA顺行示踪第93页
        3.2.5 脊髓切片场电位记录第93-94页
    3.3 讨论第94-99页
        3.3.1 脊髓损伤后微环境的改变第94-95页
        3.3.2 Raf/Erk/Merk信号通路在脊髓损伤中作用机制第95-99页
    3.4 小结第99-100页
全文结论第100-101页
论文创新点第101-102页
参考文献第102-116页
发表论文和参加科研情况说明第116-117页
附录第117-135页
综述 脊髓损伤治疗研究进展第135-159页
    参考文献第145-159页
致谢第159页

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