摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英缩写参照表 | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第12-23页 |
1.1 哮喘研究进展 | 第12-17页 |
1.1.1 哮喘简介 | 第12-13页 |
1.1.2 哮喘的流行病学 | 第13-15页 |
1.1.3 哮喘的发病机制研究现状 | 第15-17页 |
1.2 Hippo信号通路 | 第17-22页 |
1.2.1 Hippo信号通路简介 | 第17-18页 |
1.2.2 Hippo信号通路及其下游效应因子 | 第18-19页 |
1.2.3 Hippo信号通路的作用 | 第19页 |
1.2.4 Hippo信号通路/效应因子YAP与哮喘 | 第19-22页 |
1.3 本课题的研究意义及主要内容 | 第22-23页 |
1.3.1 课题的研究意义 | 第22页 |
1.3.2 课题研究的主要内容 | 第22-23页 |
第2章 小鼠哮喘模型的建立和评价 | 第23-38页 |
2.1 前言 | 第23-26页 |
2.1.1 利用微生物制作哮喘模型 | 第23页 |
2.1.2 利用基因技术制作哮喘模型 | 第23-24页 |
2.1.3 制作动物哮喘模型其他方法 | 第24-26页 |
2.2 主要实验试剂和仪器 | 第26-27页 |
2.2.1 实验动物 | 第26页 |
2.2.2 主要试剂与仪器 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-31页 |
2.3.1 OVA法建立哮喘小鼠模型 | 第27页 |
2.3.2 小鼠气道反应性检测 | 第27-28页 |
2.3.3 肺组织病理损害观察 | 第28页 |
2.3.4 BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞及其他细胞分类计数 | 第28-29页 |
2.3.5 肥大细胞的染色 | 第29-30页 |
2.3.6 肺泡灌洗液(BALF)中IL-4 和IFN-γ 与血清中Ig E含量测定 | 第30-31页 |
2.4 统计学分析 | 第31页 |
2.5 结果与讨论 | 第31-35页 |
2.5.1 结果 | 第31-35页 |
2.6 讨论 | 第35-38页 |
第3章 慢性哮喘小鼠中YAP的表达情况 | 第38-53页 |
3.1 前言 | 第38-40页 |
3.2 主要实验试剂和仪器 | 第40-48页 |
3.2.1 实验材料 | 第40-41页 |
3.2.1.1 实验仪器 | 第40-41页 |
3.2.2 免疫组织化学法观察组织中YAP蛋白表达情况 | 第41-42页 |
3.2.3 RT-PCR检测YAP蛋白表达情况 | 第42-45页 |
3.2.4 Western-blot检测YAP表达情况 | 第45-48页 |
3.3 统计学分析 | 第48页 |
3.4 结果与讨论 | 第48-50页 |
3.4.1 诱导气管平滑肌细胞YAP的表达 | 第48-49页 |
3.4.2 Western bolt和q PCR检测YAP结果 | 第49-50页 |
3.5 结论与讨论 | 第50-53页 |
第4章 Hippo-YAP通路调控人气管平滑肌细胞增殖影响的研究 | 第53-66页 |
4.1 前言 | 第53页 |
4.2 实验方法步骤 | 第53-61页 |
4.2.1 实验材料 | 第53-54页 |
4.2.2 实验仪器 | 第54-55页 |
4.2.3 人气道平滑肌细胞(ASMCs)的培养 | 第55-56页 |
4.2.4 YAP sh RNA慢病毒载体的构建和YAP对在蛋白质和m RNA水平的沉默效果检测 | 第56-57页 |
4.2.5 Real time PCR检测CTGF、Ankrd1、YAP和PCNA基因的表达情况 | 第57-59页 |
4.2.6 CCK-8 法检测ASMCs细胞的增殖情况 | 第59-60页 |
4.2.7 流式细胞术检测ASMCs的增殖情况 | 第60-61页 |
4.3 统计分析方法 | 第61页 |
4.4 结果 | 第61-64页 |
4.4.1 sh YAP慢病毒转染对ASMCs细胞内YAP表达的抑制效应 | 第61-62页 |
4.4.2 LPA和S1P对ASMCs细胞的促进增殖作用 | 第62-63页 |
4.4.3 流式细胞仪检测YAP对ASMCs细胞周期的影响 | 第63-64页 |
4.5 结论与讨论 | 第64-66页 |
结论与展望 | 第66-68页 |
结论 | 第66页 |
创新点 | 第66页 |
展望 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第74-75页 |
综述 | 第75-80页 |
参考文献 | 第78-80页 |