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ATM-MAPK14信号通路在电离辐射诱导自噬中的作用和机制研究

摘要第4-9页
Abstract第9-14页
第1章 绪论第20-52页
    1.1 自噬第20-34页
        1.1.1 自噬的形成过程第20-22页
        1.1.2 自噬相关信号通路及调控基因第22-27页
        1.1.3 自噬的双刃剑作用第27-31页
        1.1.4 自噬与DNA损伤第31-34页
    1.2 ATM第34-46页
        1.2.1 ATM基因第34-36页
        1.2.2 ATM与DNA损伤第36-41页
        1.2.3 ATM与细胞周期第41-42页
        1.2.4 ATM与自噬第42-44页
        1.2.5 ATM与肿瘤第44-46页
    1.3 MAPK14第46-49页
        1.3.1 MAPK家族第46页
        1.3.2 MAPK14与肿瘤第46-47页
        1.3.3 MAPK14与自噬第47-49页
    1.4 立题依据第49-52页
第2章 材料与方法第52-66页
    2.1 主要试剂及仪器第52-54页
        2.1.1 主要试剂第52-53页
        2.1.2 主要仪器第53-54页
    2.2 主要实验材料和方法第54-66页
        2.2.1 常用缓冲液及溶液的配制第54-57页
        2.2.2 细胞株第57页
        2.2.3 照射条件第57页
        2.2.4 细胞模型的构建第57-60页
        2.2.5 细胞中总蛋白提取第60页
        2.2.6 蛋白浓度测定-标准曲线法第60-61页
        2.2.7 Western blot第61-62页
        2.2.8 免疫共沉淀(IP)第62页
        2.2.9 CCK8(Cell counting Kit-8)法第62-63页
        2.2.10 集落形成实验第63页
        2.2.11 流式细胞术检测细胞凋亡第63-64页
        2.2.12 流式细胞术检测MDC阳性细胞率第64页
        2.2.13 GFP-LC3形态学分析自噬第64页
        2.2.14 统计学方法第64-66页
第3章 实验结果第66-92页
    3.1 电离辐射诱导自噬和ATM磷酸化第66-70页
        3.1.1 电离辐射诱导Hela发生自噬第66-68页
        3.1.2 电离辐射诱导Hela细胞ATM Ser1981位点发生磷酸化第68页
        3.1.3 电离辐射诱导H1299发生自噬第68-70页
        3.1.4 电离辐射诱导H1299细胞ATM Ser1981位点发生磷酸化第70页
    3.2 ATM和MAPK14沉默细胞模型的构建第70-72页
        3.2.1 构建质粒Psuper-ATMRi和Psuper-MAPK14Ri第70-71页
        3.2.2 沉默ATM下调MAPK14表达水平第71-72页
    3.3 抑制ATM和MAPK14增加辐射敏感性第72-76页
        3.3.1 KU55933抑制Hela细胞ATM磷酸化并增加其辐射敏感性第72-73页
        3.3.2 沉默 ATM 和 MAPK14 增加 Hela 细胞的辐射敏感性第73-74页
        3.3.3 KU55933抑制H1299细胞ATM磷酸化第74-75页
        3.3.4 抑制或沉默ATM和MAPK14增加H1299细胞的辐射敏感性第75-76页
    3.4 抑制ATM和MAPK14不影响电离辐射诱导凋亡第76-78页
        3.4.1 沉默ATM和MAPK14不改变Hela细胞中电离辐射诱导凋亡第76-77页
        3.4.2 KU55933、沉默ATM和MAPK14不改变H1299细胞中电离辐射诱导凋亡第77-78页
    3.5 抑制ATM和MAPK14降低电离辐射诱导的自噬第78-86页
        3.5.1 KU55933抑制Hela细胞电离辐射诱导的自噬水平第78-81页
        3.5.2 沉默ATM和MAPK14抑制Hela细胞电离辐射诱导的自噬水平第81-82页
        3.5.3 KU55933抑制H1299细胞电离辐射诱导的自噬水平第82-84页
        3.5.4 沉默ATM和MAPK14抑制H1299细胞电离辐射诱导的自噬水平第84-86页
    3.6 抑制ATM和MAPK14减弱IR对m TOR信号通路的抑制作用第86-89页
        3.6.1 KU55933抑制Hela细胞中IR对m TOR信号通路的抑制作用第86-87页
        3.6.2 沉默ATM和MAPK14抑制Hela细胞中IR对m TOR信号通路的抑制作用第87-88页
        3.6.3 KU55933抑制H1299细胞中IR对m TOR信号通路的抑制作用第88页
        3.6.4 沉默ATM和MAPK14抑制H1299细胞中IR对m TOR信号通路的抑制作用第88-89页
    3.7 抑制ATM和MAPK14影响Beclin1/PI3KIII复合物第89-92页
        3.7.1 ATM和MAPK14对Hela细胞Beclin 1/PI3KIII复合物的影响第89-90页
        3.7.2 ATM和MAPK14对H1299细胞Beclin 1/PI3KIII复合物的影响第90-92页
第4章 讨论第92-100页
第5章 结论第100-102页
参考文献第102-130页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第130-132页
致谢第132-133页

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