摘要 | 第4-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
第1章 绪论 | 第20-52页 |
1.1 自噬 | 第20-34页 |
1.1.1 自噬的形成过程 | 第20-22页 |
1.1.2 自噬相关信号通路及调控基因 | 第22-27页 |
1.1.3 自噬的双刃剑作用 | 第27-31页 |
1.1.4 自噬与DNA损伤 | 第31-34页 |
1.2 ATM | 第34-46页 |
1.2.1 ATM基因 | 第34-36页 |
1.2.2 ATM与DNA损伤 | 第36-41页 |
1.2.3 ATM与细胞周期 | 第41-42页 |
1.2.4 ATM与自噬 | 第42-44页 |
1.2.5 ATM与肿瘤 | 第44-46页 |
1.3 MAPK14 | 第46-49页 |
1.3.1 MAPK家族 | 第46页 |
1.3.2 MAPK14与肿瘤 | 第46-47页 |
1.3.3 MAPK14与自噬 | 第47-49页 |
1.4 立题依据 | 第49-52页 |
第2章 材料与方法 | 第52-66页 |
2.1 主要试剂及仪器 | 第52-54页 |
2.1.1 主要试剂 | 第52-53页 |
2.1.2 主要仪器 | 第53-54页 |
2.2 主要实验材料和方法 | 第54-66页 |
2.2.1 常用缓冲液及溶液的配制 | 第54-57页 |
2.2.2 细胞株 | 第57页 |
2.2.3 照射条件 | 第57页 |
2.2.4 细胞模型的构建 | 第57-60页 |
2.2.5 细胞中总蛋白提取 | 第60页 |
2.2.6 蛋白浓度测定-标准曲线法 | 第60-61页 |
2.2.7 Western blot | 第61-62页 |
2.2.8 免疫共沉淀(IP) | 第62页 |
2.2.9 CCK8(Cell counting Kit-8)法 | 第62-63页 |
2.2.10 集落形成实验 | 第63页 |
2.2.11 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第63-64页 |
2.2.12 流式细胞术检测MDC阳性细胞率 | 第64页 |
2.2.13 GFP-LC3形态学分析自噬 | 第64页 |
2.2.14 统计学方法 | 第64-66页 |
第3章 实验结果 | 第66-92页 |
3.1 电离辐射诱导自噬和ATM磷酸化 | 第66-70页 |
3.1.1 电离辐射诱导Hela发生自噬 | 第66-68页 |
3.1.2 电离辐射诱导Hela细胞ATM Ser1981位点发生磷酸化 | 第68页 |
3.1.3 电离辐射诱导H1299发生自噬 | 第68-70页 |
3.1.4 电离辐射诱导H1299细胞ATM Ser1981位点发生磷酸化 | 第70页 |
3.2 ATM和MAPK14沉默细胞模型的构建 | 第70-72页 |
3.2.1 构建质粒Psuper-ATMRi和Psuper-MAPK14Ri | 第70-71页 |
3.2.2 沉默ATM下调MAPK14表达水平 | 第71-72页 |
3.3 抑制ATM和MAPK14增加辐射敏感性 | 第72-76页 |
3.3.1 KU55933抑制Hela细胞ATM磷酸化并增加其辐射敏感性 | 第72-73页 |
3.3.2 沉默 ATM 和 MAPK14 增加 Hela 细胞的辐射敏感性 | 第73-74页 |
3.3.3 KU55933抑制H1299细胞ATM磷酸化 | 第74-75页 |
3.3.4 抑制或沉默ATM和MAPK14增加H1299细胞的辐射敏感性 | 第75-76页 |
3.4 抑制ATM和MAPK14不影响电离辐射诱导凋亡 | 第76-78页 |
3.4.1 沉默ATM和MAPK14不改变Hela细胞中电离辐射诱导凋亡 | 第76-77页 |
3.4.2 KU55933、沉默ATM和MAPK14不改变H1299细胞中电离辐射诱导凋亡 | 第77-78页 |
3.5 抑制ATM和MAPK14降低电离辐射诱导的自噬 | 第78-86页 |
3.5.1 KU55933抑制Hela细胞电离辐射诱导的自噬水平 | 第78-81页 |
3.5.2 沉默ATM和MAPK14抑制Hela细胞电离辐射诱导的自噬水平 | 第81-82页 |
3.5.3 KU55933抑制H1299细胞电离辐射诱导的自噬水平 | 第82-84页 |
3.5.4 沉默ATM和MAPK14抑制H1299细胞电离辐射诱导的自噬水平 | 第84-86页 |
3.6 抑制ATM和MAPK14减弱IR对m TOR信号通路的抑制作用 | 第86-89页 |
3.6.1 KU55933抑制Hela细胞中IR对m TOR信号通路的抑制作用 | 第86-87页 |
3.6.2 沉默ATM和MAPK14抑制Hela细胞中IR对m TOR信号通路的抑制作用 | 第87-88页 |
3.6.3 KU55933抑制H1299细胞中IR对m TOR信号通路的抑制作用 | 第88页 |
3.6.4 沉默ATM和MAPK14抑制H1299细胞中IR对m TOR信号通路的抑制作用 | 第88-89页 |
3.7 抑制ATM和MAPK14影响Beclin1/PI3KIII复合物 | 第89-92页 |
3.7.1 ATM和MAPK14对Hela细胞Beclin 1/PI3KIII复合物的影响 | 第89-90页 |
3.7.2 ATM和MAPK14对H1299细胞Beclin 1/PI3KIII复合物的影响 | 第90-92页 |
第4章 讨论 | 第92-100页 |
第5章 结论 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-130页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第130-132页 |
致谢 | 第132-133页 |