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慢病毒介导的HDAC1基因沉默对hUC-MSCs神经分化和TBI治疗的促进作用

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
缩略词第14-16页
引言第16-19页
第一部分 慢病毒介导的shRNA下调HDAC1表达对hUC-MSCs增殖和神经分化的影响第19-38页
    前言第19-20页
    1.1 材料与方法第20-30页
        1.1.1 主要试剂第20-22页
        1.1.2 脐带组织标本的获取第22页
        1.1.3 hUC-MSC的分离、培养、冻存及传代第22-23页
        1.1.4 hUC-MSC细胞表面抗原检测第23页
        1.1.5 高效shRNA干扰片段的筛选及重组慢病毒的合成第23-24页
        1.1.6 重组慢病毒复感染指数的筛选及稳定细胞系的建立第24-25页
        1.1.7 CCK-8 法检测细胞增殖情况第25页
        1.1.8 PI染色检测细胞周期情况第25页
        1.1.9 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA感染hUC-MSCs细胞后的成神经分化情况第25-29页
        1.1.10 统计学分析第29-30页
    1.2 结果第30-36页
        1.2.1 不同时期hUC-MSCs的显微结构第30页
        1.2.2 hUC-MSCs表面标记物的鉴定第30-31页
        1.2.3 靶向下调HDAC1表达的shRNA片段的筛选第31页
        1.2.4 确立合适的MOI值及建立LV-HDAC1shRNA稳定细胞系第31-32页
        1.2.5 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA对P5代hUC-MSCs细胞增殖的影响第32-33页
        1.2.6 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA对hUC-MSCs乙酰化水平的影响第33-34页
        1.2.7 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA对hUC-MSCs细胞周期的影响第34-35页
        1.2.8 重组慢病毒LV-HDAC1shRNA诱导hUC-MSCs向神经分化的情况第35-36页
    1.3 讨论第36-37页
    1.4 小结第37-38页
第二部分 LV-HDAC1 shRNA的感染hUC-MSCs对TBI小鼠的神经修复作用第38-59页
    前言第38-39页
    2.1 材料与方法第39-48页
        2.1.1 动物来源第39页
        2.1.2 主要试剂第39-41页
        2.1.3 实验动物分组第41页
        2.1.4 TBI脑损伤动物模型的建立及侧脑室移植第41-42页
        2.1.5 小鼠死亡率统计和生理体征观察第42页
        2.1.6 小鼠神经功能缺损情况的评估第42-44页
        2.1.7 小鼠学习记忆能力评估第44-45页
        2.1.8 小鼠脑含水量检测第45页
        2.1.9 小鼠主动脉灌流和脑切片制备第45页
        2.1.10 小鼠脑损伤体积检测第45-46页
        2.1.11 Elisa检测小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的表达第46-47页
        2.1.12 Elisa检测小鼠血清中GSH-Px、GSH、SOD、MDA的表达第47页
        2.1.13 Western Blot检测细胞移植后小鼠脑损伤部位乙酰化水平第47页
        2.1.14 qRT-PCR检测小鼠神经分化相关基因与神经营养因子的表达情况第47-48页
        2.1.15 统计学分析第48页
    2.2 结果第48-56页
        2.2.1 术后各组小鼠的致死及体重变化情况第48页
        2.2.2 术后各组小鼠的脑损伤体积变化情况第48-49页
        2.2.3 术后各组小鼠的脑含水量的比较第49-50页
        2.2.4 术后各组小鼠脑损伤部位乙酰化水平的比较第50-51页
        2.2.5 术后小鼠血清中炎症相关因子表达的比较第51-52页
        2.2.6 术后小鼠血清中氧化应激相关因子表达的比较第52页
        2.2.7 术后小鼠神经功能的恢复情况第52-53页
        2.2.8 术后小鼠学习认知水平的恢复情况第53-55页
        2.2.9 术后各组小鼠神经分化相关基因与神经营养因子的表达情况第55-56页
    2.3 讨论第56-58页
    2.4 小结第58-59页
结论第59-60页
参考文献第60-66页
综述 组蛋白去乙酰化酶与神经修复第66-77页
    参考文献第73-77页
附录 实验主要设备及耗材第77-79页
个人简历第79-80页
致谢第80页

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