摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 试验研究目的与意义 | 第11页 |
1.2 国内外番茄抗冷研究动态 | 第11-22页 |
1.2.1 低温冷害 | 第11-12页 |
1.2.2 低温冷害对生物膜系统的影响 | 第12-13页 |
1.2.3 低温冷害对有机渗透调节物质的影响 | 第13-14页 |
1.2.4 提高植物抗冷性的措施 | 第14-17页 |
1.2.5 ABA简介 | 第17-18页 |
1.2.6 ABA与植物抗冷性 | 第18-19页 |
1.2.7 外源ABA对抗冷基因表达的影响 | 第19页 |
1.2.8 抗寒基因的研究 | 第19-20页 |
1.2.9 cDNA-AFLP的研究进展 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-31页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 主要仪器 | 第22页 |
2.1.3 试验试剂 | 第22页 |
2.2 试验设计和取材时期 | 第22-23页 |
2.3 试验方法 | 第23-31页 |
2.3.1 植物抗冷生理指标测定 | 第23-24页 |
2.3.2 生理测定数据处理 | 第24页 |
2.3.3 样品总RNA的提取与纯化 | 第24页 |
2.3.4 双链cDNA的制备 | 第24-25页 |
2.3.5 AFLP接头和引物的合成 | 第25-26页 |
2.3.6 cDNA的酶切与接头连接 | 第26-27页 |
2.3.7 预扩增反应 | 第27页 |
2.3.8 选择性扩增反应 | 第27-28页 |
2.3.9 聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染 | 第28-29页 |
2.3.10 差异片段的回收与二次扩增 | 第29页 |
2.3.11 差异片段测序及生物信息学分析 | 第29-30页 |
2.3.12 差异表达基因的Real-time PCR验证 | 第30-31页 |
3 结果分析 | 第31-42页 |
3.1 不同浓度外源ABA对番茄幼苗抗冷生理的影响 | 第31页 |
3.2 外源ABA对番茄幼苗抗冷性的影响 | 第31-34页 |
3.2.1 ABA对番茄幼苗渗透调节物质的影响 | 第31-32页 |
3.2.2 ABA对番茄幼苗抗氧化酶活性的影响 | 第32-33页 |
3.2.3 ABA对低温胁迫下MDA和叶绿素含量的影响 | 第33-34页 |
3.3 总RNA的提取结果 | 第34页 |
3.4 双链CDNA合成结果 | 第34页 |
3.5 CDNA酶切和预扩增 | 第34-35页 |
3.6 差异表达基因筛选 | 第35-40页 |
3.6.1 差异片段的二次扩增 | 第36-37页 |
3.6.2 差异表达基因的同源性和功能分析 | 第37-40页 |
3.7 差异表达基因REAL-TIMEPCR反应 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
4.1 ABA对番茄幼苗抗冷性的诱导 | 第42页 |
4.2 ABA对番茄幼苗抗冷性的生理影响 | 第42页 |
4.3 ABA诱导番茄抗冷差异基因分析 | 第42-43页 |
4.4 实时荧光定量PCR技术分析 | 第43页 |
4.5 CDNA-AFLP技术讨论 | 第43-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第52页 |