| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 英文缩写词 | 第14-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-26页 |
| 1.1 成骨不全与胶原蛋白 | 第16-20页 |
| 1.2 内质网应激 | 第20-22页 |
| 1.3 细胞自噬 | 第22-26页 |
| 第二章 患者机体相关组织体外实验模型的建立 | 第26-29页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第26页 |
| 2.1.2 试剂配置 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27页 |
| 2.2.1 样本采集 | 第27页 |
| 2.2.2 样本处理 | 第27页 |
| 2.2.3 原代细胞培养 | 第27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 原代细胞中胶原蛋白的提取方法优化 | 第29-35页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第29页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第29-30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-31页 |
| 3.2.1 诱导剂不同作用浓度和时间的观察 | 第30页 |
| 3.2.2 细胞内胶原蛋白的提取 | 第30页 |
| 3.2.3 细胞培养基中胶原蛋白的提取 | 第30-31页 |
| 3.2.4 胃蛋白酶浓度梯度实验 | 第31页 |
| 3.2.5 胃蛋白酶作用时间 | 第31页 |
| 3.3 实验结果 | 第31-32页 |
| 3.3.1 抗坏血酸浓度和作用时间对胶原蛋白合成的影响 | 第31-32页 |
| 3.3.2 不同浓度 β-氨基丙腈对胶原蛋白合成的影响 | 第32页 |
| 3.3.3 胃蛋白酶浓度及作用时间对胶原蛋白纯化的影响 | 第32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-35页 |
| 第四章 原代细胞中RNA提取及反转录PCR | 第35-39页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第35-36页 |
| 4.1.1 实验试剂 | 第35页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第35-36页 |
| 4.2 实验方法 | 第36-37页 |
| 4.2.1 原代细胞中RNA提取 | 第36页 |
| 4.2.2 反转录PCR | 第36-37页 |
| 4.3 实验结果 | 第37-38页 |
| 4.4 实验讨论 | 第38-39页 |
| 第五章 成骨不全细胞全蛋白的提取 | 第39-43页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第39页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第39页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第39页 |
| 5.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 5.2.1 蛋白提取 | 第39-40页 |
| 5.2.2 蛋白定量 | 第40页 |
| 5.3 实验结果 | 第40-41页 |
| 5.3.1 标准曲线 | 第40-41页 |
| 5.3.2 蛋白浓度计算 | 第41页 |
| 5.4 实验讨论 | 第41-43页 |
| 第六章 内质网应激与成骨不全 | 第43-52页 |
| 6.1 实验材料与仪器 | 第43-45页 |
| 6.1.1 实验试剂 | 第43页 |
| 6.1.2 实验仪器 | 第43页 |
| 6.1.3 引物序列 | 第43-44页 |
| 6.1.4 溶液配置 | 第44-45页 |
| 6.2 实验过程 | 第45-47页 |
| 6.2.1 基因差异性表达 | 第45-46页 |
| 6.2.2 蛋白差异性表达 | 第46-47页 |
| 6.2.3 电镜观察 | 第47页 |
| 6.3 实验结果 | 第47-50页 |
| 6.3.1 基因的差异性表达 | 第47-49页 |
| 6.3.2 蛋白的差异性表达 | 第49页 |
| 6.3.3 电镜观察 | 第49-50页 |
| 6.4 实验讨论 | 第50-52页 |
| 第七章 细胞自噬与成骨不全 | 第52-56页 |
| 7.1 实验材料与仪器 | 第52页 |
| 7.1.1 实验试剂 | 第52页 |
| 7.1.2 实验仪器 | 第52页 |
| 7.1.3 引物序列 | 第52页 |
| 7.2 实验步骤 | 第52-53页 |
| 7.3 实验结果 | 第53-54页 |
| 7.3.1 自噬基因差异分析 | 第53页 |
| 7.3.2 蛋白表达差异分析 | 第53-54页 |
| 7.3.3 电镜观察 | 第54页 |
| 7.4 实验讨论 | 第54-56页 |
| 第八章 自噬通路抑制剂与激动剂对成骨不全细胞的影响 | 第56-60页 |
| 8.1 实验材料与仪器 | 第56页 |
| 8.1.1 实验试剂 | 第56页 |
| 8.1.2 实验仪器 | 第56页 |
| 8.1.3 试剂配置 | 第56页 |
| 8.2 实验步骤 | 第56-57页 |
| 8.3 实验结果 | 第57-58页 |
| 8.4 结果讨论 | 第58-60页 |
| 第九章 自噬抑制剂与激动剂对成骨不全细胞胶原蛋白合成的影响 | 第60-64页 |
| 9.1 实验材料与仪器 | 第60-61页 |
| 9.1.1 实验试剂 | 第60-61页 |
| 9.1.2 实验仪器 | 第61页 |
| 9.1.3 试剂配置 | 第61页 |
| 9.2 实验步骤 | 第61-62页 |
| 9.3 实验结果 | 第62页 |
| 9.4 结果讨论 | 第62-64页 |
| 第十章 总结与展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 攻读硕士期间发表/在投论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
