| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-16页 |
| 1.1 旋毛虫保护性抗原的分类 | 第11页 |
| 1.2 表皮胶原蛋白的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2.1 表皮胶原蛋白的概述 | 第11页 |
| 1.2.2 表皮胶原蛋白的生物合成 | 第11-12页 |
| 1.2.3 表皮胶原蛋白的组成 | 第12页 |
| 1.2.4 表皮胶原蛋白的结构特征 | 第12页 |
| 1.2.5 旋毛虫表皮胶原蛋白的功能 | 第12-13页 |
| 1.3 秀丽隐杆线虫在寄生性线虫抗原研究中的应用 | 第13-15页 |
| 1.3.1 秀丽隐杆线虫简介 | 第13-14页 |
| 1.3.2 秀丽隐杆线虫作为表达系统的优势 | 第14页 |
| 1.3.3 利用秀丽隐杆线虫表达盘尾丝状线虫蛋白 | 第14页 |
| 1.3.4 利用秀丽隐杆线虫表达人的马来布鲁丝虫alt相关抗原 | 第14页 |
| 1.3.5 利用秀丽隐杆线虫表达捻转血矛线虫半胱氨酸蛋白酶 | 第14-15页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-30页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 虫种和实验动物 | 第16页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第16页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第16-17页 |
| 2.1.5 主要软件及网络资源 | 第17页 |
| 2.2 试验方法 | 第17-30页 |
| 2.2.1 旋毛虫rol-6 基因的克隆和序列分析 | 第17-21页 |
| 2.2.2 重组表达质粒pGEX-rol的构建 | 第21-22页 |
| 2.2.3 pGEX-rol（DE3）的诱导表达及条件优化 | 第22-23页 |
| 2.2.4 重组蛋白纯化与Western Blot检测 | 第23页 |
| 2.2.5 重组蛋白多抗制备 | 第23-24页 |
| 2.2.6 启动子sqt-1 的 5'端侧翼序列的克隆 | 第24-25页 |
| 2.2.7 重组表达质粒pPD-FSsqt-GFP的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.8 重组表达质粒pPD-rol-GFP的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.9 重组表达质粒pPD-FSsqt-rol-GFP的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.10 秀丽隐杆线虫的显微注射及荧光观察 | 第28-29页 |
| 2.2.11 秀丽隐杆线虫表达的rol-6 蛋白Western Blot检测 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-43页 |
| 3.1 旋毛虫rol-6 基因克隆结果 | 第30-33页 |
| 3.1.1 rol-6 编码序列扩增结果 | 第30页 |
| 3.1.2 重组克隆质粒pMD-rol的鉴定 | 第30-31页 |
| 3.1.3 rol-6 基因分析结果 | 第31-33页 |
| 3.2 重组表达质粒pGEX-rol的鉴定 | 第33页 |
| 3.3 诱导表达结果 | 第33-37页 |
| 3.3.1 pGEX-rol重组蛋白的表达鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3.2 诱导pGEX-rol（DE3）时间的优化 | 第34页 |
| 3.3.3 诱导pGEX-rol（DE3）IPTG浓度的优化 | 第34-35页 |
| 3.3.4 诱导pGEX-rol（DE3）温度的优化 | 第35页 |
| 3.3.5 重组蛋白的可溶性分析 | 第35-36页 |
| 3.3.6 重组蛋白Western Blot检测结果 | 第36页 |
| 3.3.7 重组蛋白多克隆抗体的效价 | 第36页 |
| 3.3.8 多克隆抗体Western Blot检测 | 第36-37页 |
| 3.4 启动子sqt-1 的 5'端侧翼序列的克隆 | 第37-40页 |
| 3.4.1 sqt-1 的 5'端侧翼序列的扩增 | 第37页 |
| 3.4.2 重组克隆质粒pMD-FSsqt的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.4.3 sqt-1 的 5'端侧翼序列分析结果 | 第38-40页 |
| 3.5 重组表达质粒pPD-FSsqt-GFP的构建 | 第40页 |
| 3.6 重组表达质粒pPD-rol-GFP | 第40-41页 |
| 3.7 重组表达质粒pPD-FSsqt-rol-GFP的鉴定 | 第41页 |
| 3.8 秀丽隐杆线虫显微注射后的荧光观察 | 第41-42页 |
| 3.9 秀丽隐杆线虫表达的rol-6 蛋白Western Blot检测结果 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 4.1 旋毛虫rol-6 基因的克隆和序列分析 | 第43页 |
| 4.2 旋毛虫rol-6 基因的原核表达及多抗制备 | 第43-44页 |
| 4.3 启动子sqt-1 的 5'端侧翼序克隆与启动活性的验证 | 第44页 |
| 4.4 旋毛虫rol-6 基因在秀丽隐杆线虫体内的表达 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |
