鼠疫耶尔森氏菌外源获得性质粒编码小RNA的筛选、鉴定与功能的初步研究
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 本文研究中所用缩略词 | 第8-12页 |
| 前言 | 第12-20页 |
| 1. 鼠疫菌的危害 | 第12页 |
| 2. 鼠疫菌的生化特征和致病机理 | 第12-13页 |
| 3. 鼠疫菌和假结核菌的比较 | 第13页 |
| 4. 细菌小RNA的研究 | 第13-17页 |
| 4.1 细菌小RNA的概念和特征 | 第13-14页 |
| 4.2 细菌小RNA的分类 | 第14-15页 |
| 4.3 小RNA与其伴侣分子Hfq | 第15页 |
| 4.4 细菌小RNA的功能 | 第15-17页 |
| 5. 鼠疫菌小RNA的研究 | 第17-18页 |
| 6. 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 7. 技术路线 | 第19-20页 |
| 第一章 小RNA的鉴定 | 第20-38页 |
| 1. 引言 | 第20-21页 |
| 2. 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1 菌株 | 第21页 |
| 2.2 实验所用试剂 | 第21-22页 |
| 2.3 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.4 溶液配制 | 第23-24页 |
| 3. 实验方法 | 第24-33页 |
| 3.1 鼠疫菌的培养 | 第24-25页 |
| 3.2 总RNA的提取 | 第25-27页 |
| 3.3 体外转录制备小RNA探针 | 第27-30页 |
| 3.4 Northern Blot实验验证 | 第30-33页 |
| 4. 结果与分析 | 第33-38页 |
| 4.1 PCR扩增线性DNA模板 | 第33-34页 |
| 4.2 地高辛标记的RNA探针的制备 | 第34-35页 |
| 4.3 总RNA质量检测 | 第35页 |
| 4.4 Northern Blot验证小RNA | 第35-37页 |
| 4.5 讨论 | 第37-38页 |
| 第二章 鼠疫菌小RNA突变株的构建 | 第38-52页 |
| 1. 引言 | 第38-40页 |
| 2. 实验材料 | 第40页 |
| 2.1 菌株和质粒 | 第40页 |
| 2.2 主要试剂 | 第40页 |
| 2.3 主要仪器与试剂配制 | 第40页 |
| 3. 实验方法 | 第40-49页 |
| 3.1 小RNA突变株的构建 | 第40-45页 |
| 3.2 小RNA过表达株的构建 | 第45-49页 |
| 4. 结果与分析 | 第49-52页 |
| 4.1 小RNA缺失株的构建 | 第49-51页 |
| 4.2 小RNA过表达株的构建 | 第51页 |
| 4.3 讨论 | 第51-52页 |
| 第三章 小RNA生理和毒力的研究 | 第52-68页 |
| 1. 引言 | 第52页 |
| 2 实验材料 | 第52-56页 |
| 2.1 菌株 | 第52-53页 |
| 2.2 实验动物 | 第53页 |
| 2.3 主要试剂 | 第53-54页 |
| 2.4 主要仪器 | 第54页 |
| 2.5 溶液和培养基的配制 | 第54-56页 |
| 3. 实验方法 | 第56-58页 |
| 3.1 鼠疫菌小RNA对生物膜形成的影响 | 第56-57页 |
| 3.2 鼠疫菌小RNA对其生长的影响 | 第57页 |
| 3.3 鼠疫菌小RNA对高盐环境耐受的影响 | 第57页 |
| 3.4 鼠疫菌小RNA对酸性环境耐受的影响 | 第57-58页 |
| 3.5 小鼠存活实验 | 第58页 |
| 4. 结果与分析 | 第58-68页 |
| 4.1 小RNA对鼠疫菌生物膜形成的影响 | 第58-61页 |
| 4.2 小RNA对鼠疫菌在不同生长条件下的影响 | 第61-65页 |
| 4.3 小RNA对鼠疫菌毒力的影响 | 第65-66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录 | 第76-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第89页 |
